天然產(chǎn)物提取液中蛋白質(zhì)和脂肪等雜質(zhì)的去除試驗(yàn)畢業(yè)論文-資料下載頁
2025-06-19 21:29本頁面
【正文】 （上海佑科儀器儀表有限公司）852A雙數(shù)顯恒溫磁力攪拌器 （金壇市杰瑞爾電器有限公司）電子溫度計(jì) （南京好又多電器有限公司）TDL802B臺(tái)式離心機(jī) （上海安亭科學(xué)儀器廠）T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì) （北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）Agilent 1200LC高效液相色譜儀 （美國安捷倫科技有限公司） 主要試劑高純水（Water） 408制備無水乙醇（Ethanol absolute） AR(天津市富宇精細(xì)化工有限公司)氫氧化鈉（Sodium hydroxide） AR(天津市登科化學(xué)試劑有限公司)乙腈（Acetonitrile） 色譜純（天津市大茂化學(xué)試劑廠）有機(jī)玻璃(PMMA) 市售 分析方法用紫外分光光度計(jì)掃描迎春花、連翹提取液稀釋100倍后的吸收光譜。 實(shí)驗(yàn)方法 粗提取液純化(1)冷凍脫脂分別取迎春花、連翹花粗取液各50ml于兩個(gè)燒杯中，貼上標(biāo)簽置于冰箱中按設(shè)定溫度3℃進(jìn)行低溫處理，低溫處理完成以2000轉(zhuǎn)速高速離心得到除去脂肪后的提取液，分別將離心后所得提取液與固體殘?jiān)蛛x，觀察處理后的提取液的色澤及澄清度，取適量上層清液用紫外分光光度計(jì)測(cè)其在190nm900nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光譜。(2)高溫脫去蛋白質(zhì)將脫脂后的提取液分別用恒溫水浴加熱至45℃，并保溫1h，高溫處理完成后以2000高速離心得到去除蛋白質(zhì)的提取液，將提取液和固體殘?jiān)蛛x，靜置一夜觀察處理后的提取液的色澤及澄清度，取適量上層清液用紫外分光光度計(jì)測(cè)其在190nm900nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光譜。 提取液的高效液相色譜分析用高效液相色譜對(duì)純化后的溶液進(jìn)行分析，流動(dòng)相為乙腈：水(：)，柱溫為室溫，分離柱為C18；進(jìn)樣量20，檢測(cè)波長(zhǎng)為：迎春花；連翹花。 第三章 結(jié)果與討論 溫度控制條件的確定?；貧w方程為： Y=A+exp(x/t1)+Y0 （31）A= t1= Y0= 水45℃升溫曲線A= t1= Y0=根據(jù)上述分析的結(jié)果，確定控溫溫度與要求溫度的差為2℃。恒溫時(shí)間，冷凍時(shí)間為5小時(shí)，加熱時(shí)間為30分鐘。 迎春花原液3℃降溫曲線 連翹花原液3℃降溫曲線 迎春花原液45℃升溫曲線 連翹花原液45℃升溫曲線 除雜前提取液吸收光譜的測(cè)定連翹花中主要含有連翹苷、連翹酯苷及黃酮類成分，黃酮類成分主要是槲皮素；迎春花含丁香甙、迎春花苷、及黃酮類成分，黃酮成分主要是蘆丁。 迎春花樣品實(shí)物圖 連翹花樣品實(shí)物圖 C27H30O16 C15H10O7 蘆丁分子結(jié)構(gòu)式 槲皮素分子結(jié)構(gòu)式。 迎春花原液稀釋100倍吸收光譜 連翹花原液稀釋100倍吸收光譜 ；。 提取液處理前后的紫外光譜分析。 稀釋100倍迎春花原液經(jīng)冷凍處理前后紫外吸收光譜圖 稀釋100倍連翹花原液經(jīng)冷凍處理前后紫外吸收光譜圖 稀釋100倍迎春花原液經(jīng)脫脂45度去蛋白前后紫外吸收光譜圖 稀釋100倍連翹花原液經(jīng)脫脂45度去蛋白前后紫外吸收光譜圖，除雜后的光譜強(qiáng)度增加，說明提取液純度得到提高。 提取液的高效液相色譜譜圖分析 稀釋100倍迎春花冷凍處理高效液相色譜圖 稀釋100倍迎春花加熱處理高效液相色譜圖 稀釋100倍連翹花原液高效液相色譜圖 稀釋100倍連翹花冷凍處理高效液相色譜圖 稀釋100倍連翹花加熱處理高效液相色譜圖 ，經(jīng)過一系列除雜后，主要成分的含量增加，但峰面積整體下降，證明在除雜過程中目標(biāo)成分也有少量損失；雜質(zhì)峰的數(shù)目減少，說明大量雜質(zhì)被去除。 除雜前后對(duì)有機(jī)玻璃的上色效果 。 迎春花對(duì)有機(jī)玻璃上色紫外光譜圖 連翹花對(duì)有機(jī)玻璃上色紫外光譜圖，除雜后染色效果加強(qiáng)。這說明染色過程中，油脂和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)的存在，對(duì)有機(jī)玻璃染色存在不利的影響。 結(jié) 論本課題利用蛋白質(zhì)分子的熱變性和低溫脫脂原理為理論依據(jù)，對(duì)迎春花和連翹花提取液先進(jìn)行冷凍處理，經(jīng)高速離心后，再進(jìn)行加熱離心處理，制備了經(jīng)不同條件處理的提取液。通過本課題的研究，可以得出以下結(jié)論：：迎春花提取液在226nm處有最大吸收峰；連翹花提取液在204nm處有最大吸收峰。：經(jīng)除雜后的提取液光譜強(qiáng)大有較大的增強(qiáng)，提取液純度有較好的提高。：雜質(zhì)得到一定的去除，但目標(biāo)成分有少量的損失。經(jīng)一系列除雜后天然產(chǎn)物提取液純度提高，為實(shí)驗(yàn)室科研工作打下基礎(chǔ)。 參考文獻(xiàn)[1]陳尚钘，劉誠，[J].江西林業(yè)科技，2005，(3)：3236.[2][M] .北京：人民衛(wèi)生出版社，2001.[3]劉毅，[J].食品與機(jī)械，1999，(1)：28.[4]楊革，[J].食品科學(xué)，1998，(8)：20.[5][J].，8(2)：1820.[6]張兆俊，[J].糧食與油脂，2005，(5)：4041. [7]劉樹興，[J].陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，21(4)：3739. [8]Hawthorne SB,Miller parisen of soxhlet and lowand hightenperature supercritical extraction efficiencies of organics from environmental solids [J].Anal Chem，1994，66 (22)：40054012. [9]T suneo T，Y oko S，K oichi T，et of dye from krill[P].Jpn K okait okkyo K oho T JP：04057853 A2，19920205.[10]Cheez solvent elution technique for the extraction of organic pollutants in water[J].，1996，330：217. [11]黃俊嫻，梁榮選，[J].廣東化工，2006，33(6)：6366.[12][J].食品研究與開發(fā)，2003，24(2)：35.[13]陶興無，[J].中國釀造，2007，(8)：1416.[14]張玉香，[J].釀酒科技，2005，(4)：7274.[15]王洪新，[J].食品工業(yè)科技，2004，25(12)：6971.[16]蔣梅，楊仕標(biāo)，[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008，(3)：2526.[17]孫臣忠，王永文，[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)， 2005，20(5)：439441.[18]李全宏，[J].食品科學(xué)，2006，27(11)：244248.[19]李楊，[J].生命科學(xué)研究，2006，10(1)：1216.[20]Robb V A，Li W，Gutmann D of 1433 binding does not impair Protein B growth suppression[J].Ontogeny，2004，23(20)：35893596.[21]曾益坤，[J].中國油脂，2005，30(4)：1517.31
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