【正文】 形態(tài)變化， AC：培養(yǎng)于 PDB； DF：培養(yǎng)于含有孜然精油的 PDB；其中， A 與 D 培養(yǎng) 2h (400)， B 與 E 培養(yǎng) 6h (400） ， C 與 F 培養(yǎng) 10h (1000) 從上圖中可以看出，對照組中隨著 時間推移， 10 h 后，發(fā)芽管延伸，部分形成菌絲體。實驗組中，黃曲霉孢子未見發(fā)芽管，且孢子大小明顯小于對照組的；結(jié)果表明孜然精油能顯著抑制黃曲霉孢子的萌發(fā)，并對孢子有破壞作用 [ 17]。 有研究初步揭示對孢子萌發(fā)力抑制作用的機制在于核 DNA 的致死損傷。 采用顯微多道分光光度分析系統(tǒng)與單細(xì)胞凝膠電泳或稱彗星實驗（ et assay）圖像分析相結(jié)合，測定黃曲霉 DNA 損傷在國內(nèi)尚屬首次。發(fā)現(xiàn)首先是通過改變膜的選擇性通透性而損傷質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)入細(xì)胞后，又與 DNA 相互作用，使核 DNA 產(chǎn)生不可逆損傷，使有關(guān)基因 不能表達(dá) (待專文報道 ） ，從而失去對代謝的調(diào)節(jié)控制以及自我復(fù)制的正常進(jìn)行，最后導(dǎo)致孢子失去萌發(fā)力。該方法把鑒定 DNA 損傷的化學(xué)檢測推進(jìn)到數(shù)值化研究范圍，對活態(tài)細(xì)胞代謝及毒理學(xué)的研究具有重要理論和應(yīng)用價值 [25]。 A B C D E F 陜西科技大學(xué)畢業(yè)論文 22 4 結(jié)論與展望 結(jié)論 （ 1） 本次實驗中，采用的傳統(tǒng)水蒸餾法和亞臨界萃取法提取孜然種子中的精油，得率分別為 %， %，總體來說，得率不高。 （ 2） 抑菌實驗中，采用固體培養(yǎng)（揮發(fā)接觸發(fā)）法研究孜然精油對黃曲霉生長的抑制效果，水蒸餾精油與亞臨界精油的抑制率分別達(dá)到 %， %。 總體抑制效果較為明顯。 （ 3） 每隔 24 h 在 365 nm 紫外儀下拍照觀察其熒光性可知，孜然精油對黃曲霉 的產(chǎn)毒能力有一定的抑制作用，使其與對照組比較熒光性較弱。 （ 4） 孜然精油對黃曲霉菌絲體形態(tài)影響的實驗中，對照組與實驗組菌絲體形態(tài)差別明顯， 使黃曲霉菌絲體發(fā)生扭曲，收縮變形，嚴(yán)重破壞細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)，阻止菌絲體的生長。 （ 5） 孜 然精油對黃曲霉孢子萌發(fā)的影響實驗中，每隔兩小時觀察一次孢子萌發(fā)的狀態(tài)，共觀察 10 h。對照組與實驗組差別明顯，實驗組孢子數(shù)較少， 能顯著抑制黃曲霉孢子的萌發(fā)，引起孢子收縮、塌陷，降低孢子表面的粗糙 度，破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。 展望 （ 1）本研究發(fā)現(xiàn)，在孜然精油提取方面，采用的兩種方法提取率均不是很高，為了進(jìn)一步提高其精油得率，在水蒸餾方法中，可在得出油水混合物后直接將油水分離開來，再加入一定量的無水硫酸鈉除去多余的水分，提高精油得率。在亞臨界萃取中，可選用不同的萃取劑，適當(dāng)改變實驗條件這幾方面進(jìn)行進(jìn)一步的研究，來提高其得率。也可選用其他不同的方法如有機溶劑萃取等來提取精油并比較其精油得率。 （ 2）本研究發(fā)現(xiàn)了孜然精油能有效抑制黃曲霉 生長，但未研究其 最小抑菌濃度（ MIC）和最 小殺菌濃度（ MFC），應(yīng)進(jìn)一步在好的結(jié)果基礎(chǔ)上進(jìn)行深入的研究 [18]，可采用微孔板培養(yǎng)法。 （ 3） 在固體培養(yǎng)熒光性觀察下，發(fā)現(xiàn)孜然精油對黃曲霉 產(chǎn)毒能力也有一定的抑制效果，但未進(jìn)一步研究其機理，可采用 薄層層析法研究其對黃曲霉 產(chǎn) AFB1能 力的影響 [ 22, 23,24]。 （ 4）本研究還可以從細(xì)胞膜完整率測定以及黃曲霉蛋白表達(dá)的抑制等不同方面來進(jìn)行更深的研究。 常用植物香料提取液對黃曲霉抑制效果的研究 23 致 謝 大學(xué)四年一晃而過，最后的論文傾注了很多的心血，心中倍感充實，在論文即將完成之時，心中感概頗多，也愿為自己的大 學(xué)生活畫上圓滿的句號。 本論文是在 徐丹老師的悉心指導(dǎo)下完成的。首先要感謝我的徐丹老師， 從論文的選題、設(shè)計、試驗及論文的定稿，都傾注了大量的心血。從寒假開始，老師就提前督促我們完成實驗前期方案的設(shè)計，外文文獻(xiàn)的翻譯等工作。開學(xué)后從開題報告開始，一遍一遍的幫我們修改，指導(dǎo)實驗方案，老師嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的工作態(tài)度，淵博的專業(yè)知識，寬厚仁慈的胸懷、積極樂觀的生活態(tài)度，為我樹立了一輩子學(xué)習(xí)的典范，我們就是應(yīng)該這樣在人生的道路上積極的前行，不斷提高和充實自己。用知識來武裝自己。 我要感謝在實驗過程中在實驗儀器方面提供各種幫助給 我的化工學(xué)院的儀器管理老師杜老師，感謝在實驗室中提供給我各種幫助的研究生的學(xué)長學(xué)姐們，有不懂的地方總會耐心為我指導(dǎo)，讓我的實驗中少走了許多彎路。在此也要特別感謝石偉力學(xué)姐在實驗中的幫助，實驗原料儀器方面的購買都提供了很大的幫助。感謝舍友皇甫慧玲同學(xué)在我請假期間幫我記錄老師布置的任務(wù)以及實驗方案的改進(jìn)內(nèi)容。 很慶幸能有你們的幫助， 很榮幸能在這樣一個團(tuán)結(jié)奮進(jìn)、充滿朝氣和活力的學(xué)術(shù)團(tuán)體中完成我的論文實驗工作 !感謝室友在四年的學(xué)習(xí)生活中與我互相鼓勵，共同奮斗！ 感謝我的親人和朋友，你們永遠(yuǎn)是我最大的依靠，是 我的力量之源，我會繼續(xù)努力奮斗，堅持不懈！ 高迎利 2022 年 6 月 16 日 陜西科技大學(xué)畢業(yè)論文 24 參考文獻(xiàn) [1] Davis ND, IyerSK, Diener UL. 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