【正文】 先用乙醚除色素，再加飽和的中性醋酸鉛沉淀。3）吸附法：用新煅燒的氧化鎂或活性炭吸附提取液，再以甲醇解吸附。次生苷的提取：先發(fā)酵酶解，然后用醋酸乙酯或乙醇提取。也可先用乙醇提取，再酶解。分離：溶劑萃取法粗分色譜法：硅膠 單糖苷、次生苷、苷元——有機(jī)溶劑洗脫 極性大的強(qiáng)心苷——含水系統(tǒng)洗脫第 十 章生 物 堿生物堿是指除了生物界必需的含氮有機(jī)化合物氨基酸、氨基糖、肽、蛋白質(zhì)、核酸、核苷酸、含氮維生素以外的所有含氮有機(jī)化合物。大多結(jié)構(gòu)復(fù)雜、具有堿性且生物活性顯著。生物堿的通性一、物理性質(zhì)（一）性狀：多數(shù)為結(jié)晶形固體，少數(shù)為非晶形粉末；少數(shù)為液體——煙堿、毒芹堿、檳榔堿等。多數(shù)無色或白色，少數(shù)有顏色——小檗堿、蛇根堿為黃色。多數(shù)味苦。少數(shù)小分子生物堿和液態(tài)生物堿有揮發(fā)性——麻黃堿、煙堿。（二）旋光性：大多數(shù)生物堿有旋光性，多呈左旋。（三）溶解性游離生物堿：親脂性生物堿（叔胺堿、仲胺堿）——易溶于親脂性有機(jī)溶劑、酸水，難溶于水。親水性生物堿（季胺堿、含氮氧化物）——可溶于水、甲醇、乙醇，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。特殊官能團(tuán)生物堿（含酚羥基、羧基）——既溶于酸水也溶于堿水，PH8~9時溶解度最差，易沉淀。生物堿鹽：一般易溶于水，可溶于醇，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。水溶性大小規(guī)律：無機(jī)酸鹽有機(jī)酸鹽；含氧酸鹽鹵代酸鹽 小分子有機(jī)酸鹽大分子有機(jī)酸鹽二、化學(xué)性質(zhì)(一) 堿性：生物堿分子中氮原子具有孤電子對，可以給出電子，也可以接受質(zhì)子，因此具有堿性。表示方法：取決于它吸引質(zhì)子或給出電子的能力。主要和氮原子的雜化方式、電子云密度及立體效應(yīng)有關(guān)。 用其共軛酸的pKa值表示。 pKa值越大，堿性越強(qiáng)。堿性強(qiáng)弱的一般規(guī)律：季銨堿（強(qiáng)堿 pKa11） 脂胺、脂氮雜環(huán)（中強(qiáng)堿 pKa8~11） 芳胺、芳氮雜環(huán)（弱堿 pKa3~7） 酰胺類（極弱堿 pKa2）影響堿性的因素（1）氮原子的雜化方式：SP3 SP2 SP（2）電效應(yīng)1）誘導(dǎo)效應(yīng)：氮原子周圍引入供電子基，使之電子云密度增加，堿性增強(qiáng)。引入吸電子基，則電子云密度減小，堿性減弱。常見吸電子基：苯基、羰基、羥基、雙鍵、醚鍵、酯鍵。常見供電子基：烷基2）共軛效應(yīng)：當(dāng)有供電子基或吸電子基與氮原子處在同一共軛體系中，引起氮原子的電子云密度增加或降低，使堿性增強(qiáng)或降低的效應(yīng)。此效應(yīng)不受碳鏈長短的限制。（3）立體效應(yīng)：氮原子的周圍取代基的構(gòu)型、構(gòu)象等立體因素，如果阻礙氮原子與質(zhì)子的結(jié)合，則使其堿性降低。（4）氫鍵效應(yīng)：生物堿成鹽后，氮原子附近如有羥基、羰基并可與氮上的氫形成分子內(nèi)氫鍵，使質(zhì)子不易離去，從而堿性增強(qiáng)。 （二）沉淀反應(yīng)反應(yīng)條件：酸水或酸性稀醇中進(jìn)行。沉淀試劑：碘化物復(fù)鹽、重金屬鹽、大分子有機(jī)酸。 常用的有：碘化鉍鉀（橘紅色沉淀）、碘化汞鉀（類白色沉淀）、碘碘化鉀（紅棕色沉淀）；硅鎢酸（類白色或淡黃色沉淀）、苦味酸（黃色沉淀）；雷氏銨鹽（即硫氰酸鉻銨，與季銨堿生成紅色沉淀）。應(yīng)用：（1）檢識生物堿的存在 （2）定性鑒別(反應(yīng)、薄層) 3）追蹤提取分離生物堿 （4）分離純化季銨堿注意事項(xiàng)：消除假陽性的干擾，酸水浸出液中的蛋白質(zhì)、多肽、鞣質(zhì)也與此類試劑產(chǎn)生沉淀反應(yīng)，所以進(jìn)行沉淀反應(yīng)前，要先凈化（酸水提取液堿化后用氯仿萃取，再用酸水反萃氯仿，得到的酸水再進(jìn)行沉淀反應(yīng)）。（三）顯色反應(yīng)：不同生物堿可與特殊試劑生成不同顏色，用于鑒別。Mandelin試劑（1%鉻酸銨濃硫酸）：莨菪堿、阿托品——紅色 奎寧——淡橙色 嗎啡、士的寧——藍(lán)紫色 可待因——蘭色Marquis試劑（30%）：嗎啡——橙色至紫色 可待因——洋紅色至黃棕色生物堿的提取分離（一）總堿的提取水或酸水提取法：可直接用水（提取鹽、季銨堿）%~1%的酸水提取。常用酸：鹽酸、硫酸、醋酸、酒石酸方法：滲漉、浸漬 缺點(diǎn)：提取液體積大、雜質(zhì)多，需凈化 凈化方法（1）陽離子交換樹脂法：用強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂，多為磺酸型。交聯(lián)度4%~8%。先用中性水洗脫雜質(zhì)，再用酸水或鹽水洗脫生物堿；也可先將樹脂用氨水堿化（PH10左右），再用有機(jī)溶劑回流提取生物堿。（2）有機(jī)溶劑萃取法：先堿化，后萃取。（3） 加堿沉淀法：一般加石灰乳沉淀。此法用于生產(chǎn)。醇類溶劑提取法：游離生物堿及生物堿鹽的提取均可。 方法：滲漉、浸漬、回流。 缺點(diǎn)：常含有親脂性雜質(zhì)，可利用生物堿溶于 酸水，雜質(zhì)不溶而加以純化。親脂性有機(jī)溶劑提取法：先用堿水濕潤藥材，使生物堿游離，再用有機(jī)溶劑提取。 方法：浸漬、回流、連續(xù)回流。 堿水：10%氨水、石灰乳或碳酸鈉。如為弱堿，可直接用水提。 水溶性生物堿的提?。?）沉淀法：雷氏銨鹽 含季銨堿的水溶液加稀無機(jī)酸調(diào)PH2~3，加新鮮配制的雷氏銨鹽飽和水溶液，即可生成生物堿雷氏鹽沉淀，過濾，沉淀過氧化鋁柱凈化，用丙酮洗脫，在洗脫液中加硫酸銀分解生物堿雷氏鹽沉淀，生成生物堿的硫酸鹽，再加氯化鋇使生物堿轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，濃縮析晶。見書上333頁反應(yīng)式。（2）溶劑法：用正丁醇、異戊醇或氯仿甲醇混合液反復(fù)萃取。（二）生物堿的分離粗分：非酚性弱堿、酚性弱堿、非酚性叔胺堿、酚性叔胺堿、水溶性生物堿。見329頁流程。生物堿單體的分離（1）堿性差異：PH梯度萃取法。將生物堿混合物溶于酸水中，逐步加堿，每調(diào)節(jié)一次，用氯仿萃取，則生物堿依照堿性由弱到強(qiáng)被依次提出。將生物堿溶于有機(jī)溶劑中，用PH由高到低的酸性緩沖液依次萃取，生物堿則由強(qiáng)到弱被依次萃出。（2）生物堿或生物堿鹽的溶解度不同：氧化苦參堿極性大于苦參堿，難溶于乙醚，將總堿溶于氯仿后加乙醚，氧化苦參堿則沉淀析出。草酸麻黃堿的水溶性小于草酸偽麻黃堿，濃縮后草酸麻黃堿則析出結(jié)晶。（3）特殊功能基分離：酚性生物堿溶于稀氫氧化鈉中、含羧基的溶于碳酸氫鈉中、含內(nèi)酯的生物堿溶于熱氫氧化鈉中。（4）色譜法：常用氧化鋁、硅膠作吸附劑。 用石油醚、氯仿、二氯甲烷、甲醇等混合溶劑作洗脫劑。注意：硅膠作吸附劑時，需加堿在洗脫劑中，抑制硅膠的酸性。生物堿的檢識 （一）理化檢識：利用生物堿的沉淀反應(yīng)或顯色反應(yīng)可檢識中藥粗提物中是否存在生物堿。 方法：取中藥酸水提取液置3支試管中，分別加入三種生物堿沉淀試劑，如都產(chǎn)生沉淀，則可能有生物堿。注意避免假陽性。（二）色譜檢識TLC （1）硅膠：~，克服拖尾；或在展開劑中加入二乙胺、氨水等；或用濃氨水飽和。（2）氧化鋁：分離親脂性較強(qiáng)的生物堿，多用親脂性的混合溶劑；分離季銨堿多用正丁醇冰醋酸水系統(tǒng)。常用改良碘化鉍鉀，顯橘紅色顯色 紙層析（PC）：以水、甲酰胺為固定相，或以酸性緩沖液作為固定相進(jìn)行多層緩沖紙色譜進(jìn)行PH梯度層析。 以水為固定相時，用正丁醇冰醋酸水為展開劑。以甲酰胺或酸性緩沖液為固定相時，多以氯仿、乙酸乙酯等親脂性有機(jī)溶劑為展開劑。HPLC：反相、離子交換 堿性流動相 實(shí)例 麻黃、黃連、洋金花第十一章 鞣 質(zhì) 鞣質(zhì)是一類復(fù)雜的多元酚類高分子化合物。分子量在500~3000之間，能沉淀蛋白質(zhì)、生物堿和明膠。因其能與獸皮中的蛋白質(zhì)結(jié)合成致密柔韌、不易腐敗、有良好透氣性和透水性的皮革而得名。結(jié)構(gòu)及分類：可水解鞣質(zhì)、縮合鞣質(zhì)、復(fù)合鞣質(zhì)（一）可水解鞣質(zhì)：是多元醇與沒食子酸酯化的產(chǎn)物，具有酯鍵或甙鍵，易被酸、堿、酶水解，水解后的產(chǎn)物又分為沒食子酸和鞣花酸鞣質(zhì)。：水解后可生成沒食子酸和糖或多元醇。糖或多元醇中部分羥基被酚酸或縮酚酸所酯化，結(jié)構(gòu)中有酯鍵或酯式甙鍵。（鞣花酸鞣質(zhì)）：是六羥基聯(lián)苯二酸或與其有生源關(guān)系的酚酸與葡萄糖等多元醇形成的酯。水解后可產(chǎn)生逆沒食子酸。（二）縮合鞣質(zhì)：是兒茶素苯核之間通過碳碳鍵相連，不具有酯或甙鍵，在高溫下或稀堿、稀酸作用下不水解，迅速脫水縮合形成大分子化合物鞣紅故又稱鞣紅鞣質(zhì)類。此類主要存在于植物的果實(shí)、種子、及樹皮中。：以兒茶素為代表。共有六種異構(gòu)體。分布最廣的是（+）兒茶素 和（）表兒茶素。，4二醇類（白花素類）：易發(fā)生聚縮，在植物體內(nèi)含量很少。（三）復(fù)合鞣質(zhì)：由逆沒食子鞣質(zhì)部分與原花色素部分結(jié)合組成的，具有可水解鞣質(zhì)和縮合鞣質(zhì)的一切特征。理化性質(zhì)及檢識1. 大多為無定形粉末，具吸濕性。2.鞣質(zhì)極性較強(qiáng)， 能溶于水、甲醇、乙醇、丙酮?？扇苡诖姿嵋阴?、乙醚、丙酮和乙醇的混合液。難溶于氯仿、苯、石油醚等。3. 鞣質(zhì)含有很多酚羥基，很易被氧化，為強(qiáng)的還原劑，能還原斐林試劑。4. 鞣質(zhì)的水溶液與許多生物堿、重金屬鹽、蛋白質(zhì)等產(chǎn)生沉淀。簡易的檢識方法P141頁。四、提?。涸谶x擇合適溶劑的基礎(chǔ)上，控制溫度和時間，達(dá)到快速、完全和不破壞鞣質(zhì)的目的。提取鞣質(zhì)最好選用新鮮藥材，且立即提取。干燥宜在短時間內(nèi)