藥臨床前毒理安全性評(píng)價(jià)規(guī)范化管理講座-資料下載頁(yè)
2025-05-28 01:57本頁(yè)面
【正文】 理后的哺乳動(dòng)物肝臟微粒體（ S9）進(jìn)行體外代謝活化試驗(yàn)，即在加S9混合物和不加 S9混合物平行的條件下測(cè)試。 對(duì)照組：用溶媒作陰性對(duì)照，用已知突變?cè)麝?yáng)性對(duì)照。 結(jié)果判定：受試物的回復(fù)突變菌榮譽(yù)稱號(hào)數(shù)的增加與劑量相關(guān)并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，或至少某一測(cè)試點(diǎn)呈現(xiàn)可重復(fù)的并有統(tǒng)計(jì)意義的陽(yáng)性反應(yīng)時(shí)記為陽(yáng)性。 （ 2）哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) 細(xì)胞：哺乳動(dòng)物原代或傳代培養(yǎng)細(xì)胞。 劑量：至少應(yīng)用三種不同劑量，高劑量以 50%細(xì)胞生長(zhǎng)抑制濃度為基準(zhǔn)，否則應(yīng)說明選定劑量的理由。 標(biāo)本制作時(shí)間：藥物與細(xì)胞接觸后應(yīng)有適當(dāng)時(shí)間，最好包括整個(gè)細(xì)胞周期，通常在藥物處理后 24和 48小時(shí)制作染色體標(biāo)本。 代謝活化：應(yīng)用適當(dāng)?shù)拇x活化法。 對(duì)照組：用深媒作陰性對(duì)照，已知突變?cè)麝?yáng)性對(duì)照。 鏡檢：每種濃度至少觀察 100個(gè)中期分裂相細(xì)胞的染色體結(jié)構(gòu)的異常及多倍體的出現(xiàn)率。 結(jié)果判定：受試誘發(fā)的染色體畸變出現(xiàn)率較陰性對(duì)照有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加，并有劑量反應(yīng)關(guān)系時(shí)記為陽(yáng)性，同時(shí)標(biāo)明異常細(xì)胞出現(xiàn)的頻率和種類。 （ 3）體內(nèi)試驗(yàn)：一般選用微核試驗(yàn)，但作用于生殖系統(tǒng)的藥物進(jìn)行顯性致死試驗(yàn)等。 1）嚙齒類動(dòng)物微核試驗(yàn) 動(dòng)物：一般用小鼠，每組 10只性成熟動(dòng)物（雌雄各半）或 6至少只性成熟雄性動(dòng)物。 給藥劑量及途徑：至少采用三種劑量，最高劑量以 1/2LD50為基準(zhǔn)，腹腔和 /或口服一次給藥，必要時(shí)可連續(xù)給藥。否則應(yīng)說明選定劑量的理由。 對(duì)照組：用溶媒作陰性對(duì)照，已知能誘發(fā)微核陽(yáng)性的物質(zhì)作陽(yáng)性對(duì)照。 標(biāo)本制作：給藥后 18－ 30小時(shí)或 12－ 72小時(shí)處死動(dòng)物，取骨髓，離心，涂片， Giemsa染色或吖啶橙染色。 鏡檢：每只動(dòng)物至少觀察計(jì)數(shù) 1000個(gè)多染紅細(xì)胞，觀察其微核出現(xiàn)的頻度及多染紅細(xì)胞和正染紅細(xì)胞的比率。 結(jié)果判定：微核細(xì)胞出現(xiàn)的頻度與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加，并有劑量反應(yīng)關(guān)系時(shí)，或同一劑量有重復(fù)性并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí)記為陽(yáng)性。 2）嚙齒類動(dòng)物顯性致死試驗(yàn) 動(dòng)物：性成熟的嚙齒類動(dòng)物，一般采用小鼠。每組至少 15只雄鼠。 給藥劑量及途徑：至少采用三種劑量，但在初期評(píng)價(jià)中單劑量或二種劑量即可。高劑量以 30連續(xù)給藥使 100%動(dòng)物生存的最大耐受量為斟準(zhǔn)。口服或腹腔注射可采用一次給藥，每天給藥一次，連續(xù)給藥五天或連續(xù)給藥六周的方法之一。 交配方法：給藥的雄性動(dòng)物以適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔集資與未給藥的雌性動(dòng)物交配，交配時(shí)間取決于給藥方式，一般一次或連續(xù)給藥 5天的動(dòng)物，以最后約藥后 6周內(nèi)為交配時(shí)間；連續(xù)給藥 6周的動(dòng)物以最后給藥后 1周內(nèi)為交配時(shí)間。 對(duì)照組：用溶媒作陰性對(duì)照，已知能誘發(fā)顯性致死陽(yáng)性物質(zhì)作陽(yáng)性對(duì)照。但在同一實(shí)驗(yàn)室，對(duì)同一品系的動(dòng)物，可不設(shè)陽(yáng)性對(duì)照。 觀察指標(biāo)：交配的雌性動(dòng)物在妊娠后期剖腹，觀察子宮內(nèi)胚胎著床數(shù)，生存胎仔數(shù)，死亡胎仔數(shù)及未著床數(shù)。顯性致死率以 DL表示 ： 試驗(yàn)組妊娠鼠的平均生存胎仔 DL（ %）＝（ 1－ ） 100 陰性對(duì)照組妊娠鼠的平均生存胎仔 結(jié)果判定：死亡胎仔數(shù)的增加，胚胎著床總數(shù)的減少，或未著床胚胎數(shù)的增加，生存胎仔減少，這些結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義并有劑量反應(yīng)關(guān)系時(shí)記為陽(yáng)性顯性致死效應(yīng)。 （ 1）一般生殖毒性試驗(yàn) （ 2）致畸胎試驗(yàn) （ 3）圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn) （ 1）致癌試驗(yàn)的預(yù)備試驗(yàn) （ 2）致癌試驗(yàn) （ 3）評(píng)價(jià)
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1