【正文】 （ 一）利用純物質(zhì)對照定性 在一定的色譜條件下， 一個未知物只有一個確定的保留時間 。 因此，將已知純物質(zhì)在相同的色譜條件下的保留時間，與未知物的保留時間進(jìn)行比較，就可以定性鑒定未知物。 若二者相同，則未知物可能是已知的純物質(zhì)；不同，則未知物就不是該純物質(zhì)。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 注意 純物質(zhì)對照法進(jìn)行定性分析，只適 用于組分性質(zhì)已有所了解，組成比較簡 單，且有純物質(zhì)的未知物。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 （二）相對保留值法 相對保留值 α is 是指組分 i與基準(zhǔn)物質(zhì) s調(diào)整保留值的比值 α is = tri ? / trS180。= Vri? / Vrs? 它僅隨固定液及柱溫變化而變化；但與其它操作條件無關(guān)。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 相對保留值測定方法 ： 在某一固定相及柱溫下，分別測出組 分 i和基準(zhǔn)物質(zhì) s的調(diào)整保留值；再用已求 出的相對保留值與文獻(xiàn)相應(yīng)值比較即可定 性。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 基準(zhǔn)物質(zhì)的選擇： 通常選容易得到純品的，而且與被分 析組分相近的物質(zhì)作基準(zhǔn)物質(zhì) 。 如正丁烷、環(huán)己烷、正戊烷、苯、對二甲 苯、環(huán)己醇、環(huán)己酮等。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 （三）加入已知物增加峰高法 當(dāng)未知樣品 中組分較多，所得色譜峰過密，用上述方法不易辨認(rèn)時，或僅作未知樣品指定項目分析時均可用此法。 首先作出未知樣品 的色譜圖，然后在未知樣品加入某已知物，又得到一個色譜圖。 峰高增加的組分即可能為這種已知物。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 （四）保留指數(shù)定性法 retention index 保留指數(shù)又稱為柯瓦（ Kov225。ts） 指數(shù) 它表示物質(zhì)在固定液上的保留行為，是目前使用最廣泛并被國際上公認(rèn)的定性指標(biāo)。 它具有重現(xiàn)性好、標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一及溫度系數(shù)小等優(yōu)點。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 保留指數(shù)也是一種相對保留值 : 把組分的保留行為換算成相當(dāng)于正構(gòu)烷 烴的保留行為，也就是用正構(gòu)烷烴系列作為 標(biāo)準(zhǔn)，以兩個保留時間緊鄰待測組分的正構(gòu) 烷烴來 標(biāo)定 該組分，這個相對值稱為保留指 數(shù) ， 并假定正構(gòu)烷烴的保留指數(shù)為 n?100。 被測物的保留指數(shù)值可用內(nèi)插法計算。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 確定 i在某固定液 X上的 保留指數(shù) IiX ： 先選取兩個 正構(gòu)烷烴作為基準(zhǔn)物質(zhì)， 其中一個的碳數(shù)為 Z，另一個為 Z+1，它們的調(diào)整保留時間分別為 t?R(Z) 和 t?R(Z+1) 。 使被測物質(zhì) i的調(diào)整保留時間 t?R(i)恰好位于兩者之間，即 t?R(Z) ? t?R(i) ? t?R(Z+1) 。 將含 i和所選的兩個 正構(gòu)烷烴的混合物注入固定液 為 X的色譜柱，在一定溫度條件下 ，進(jìn)行色譜分析，得以下 色譜圖。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 信號 t?R(Z) t?R(i) t?R(Z+1) t 進(jìn)樣 內(nèi)插法求 IiX示意圖 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 據(jù)此，可用內(nèi)插法求算保留指數(shù) IiX 。 大量實驗數(shù)據(jù)表明，化合物調(diào)整保留時間的對數(shù)值與其保留指數(shù)間的關(guān)系基本上是一條直線關(guān)系。 )lglglglg(1 0 0/)(/)1(/)(/)( ZttttIZRZRZRiRiX ??????YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 保留指數(shù)的物理意義 ： 它是與被測物質(zhì)具有相同調(diào)整保留時間 的假想的 正構(gòu)烷烴的碳數(shù)乘以 100。 保留指數(shù)僅與固定相的性質(zhì)、柱溫有 關(guān)，與其它實驗條件無關(guān)。 其準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性都很好。 只要柱溫與固定相相同，就可應(yīng)用文獻(xiàn) 值進(jìn)行鑒定，而不必用純物質(zhì)相對照。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 (五 ) 與其它儀器聯(lián)用定性 這是最可靠的定性方法。早期應(yīng)用填充柱分離組分，冷阱收集后測定紅外光譜、質(zhì)譜和核磁共振譜等，即所謂 “ 離線 ” (offline)聯(lián)用的方法對組分定性。這種方式分離度不好，靈敏度不高，操作麻煩。目前常用 “ 在線” (online)聯(lián)用方式，用毛細(xì)管色譜柱與傅利葉紅外儀聯(lián)用 (GCFTIR)或與質(zhì)譜聯(lián)用 (GCMS)。這些聯(lián)用儀器和技術(shù)已完全成熟 , 成為現(xiàn)代儀器分析的重要工具。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 二、定量分析 定量分析的任務(wù)是求出混合樣品中各組分的百分含量。 色譜定量的依據(jù)是，當(dāng)操作條件一致時，被測組分的質(zhì)量（或濃度）與檢測器給出的響應(yīng)信號成正比 。 即： mi = fi Ai 式中 mi為被測組分 i的質(zhì)量； Ai為被測組分 i的峰面積； fi為被測組分 i的校正因子。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 可見，進(jìn)行色譜定量分析時需要： （ 1） 準(zhǔn)確測量檢測器的響應(yīng)信號 — 峰面積或峰高； （ 2） 準(zhǔn)確求得比例常數(shù) — 校正因子； （ 3） 正確選擇合適的定量計算方法。 將測得的峰面積或峰高換算為組分的百分含量。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 ?（ 一）峰面積測量方法 峰面積是色譜圖提供的基本定量數(shù)據(jù)； 其測量的準(zhǔn)確與否直接影響定量結(jié)果。 不同峰形的色譜峰采用不同的定量方法： （ 1）對稱形峰面積的測量 —— 峰高乘以半峰寬法 對稱峰的面積 A = ? h ?Y1/2 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 （ 2）不 對稱形峰面積的測量 —— 峰高乘平均峰寬法 對于不對稱峰的測量如仍用峰高乘以半峰寬，誤差就較大，因此采用峰高乘平均峰寬法： A = h（ + ） 式中 和 以及 。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 （二）定量校正因子 色譜定量分析的依據(jù)是被測組分的量與其峰面積成正比。 但是峰面積的大小不僅取決于組分的質(zhì)量，而且還與它的性質(zhì)有關(guān)。 即當(dāng)兩個質(zhì)量相同的不同組分在相同條件下使用同一檢測器進(jìn)行測定時，所得的峰面積卻不相同。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 因此， 混合物中某一組分的百分含量并不 等于該組分的峰面積在各組分峰面積總和中所 占的百分率 。 這樣，就不能直接利用峰面積計算物質(zhì)的 含量。 為了使峰面積能真實反映出物質(zhì)的質(zhì)量， 就要對峰面積進(jìn)行校正，即在定量計算是引入 校正因子。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 校正因子分為： 絕對校正因子和相對校正因子。 絕對校正因子定義為： fi = mi / Ai fi值與組分 i質(zhì)量絕對值成正比，所以稱為絕對校正因子。 但要精確求出 fi值是比較困難的。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 一方面 由于精確測量絕對進(jìn)樣量困難； 另一方面 峰面積與色譜條件有關(guān)，要保持測 定 fi值時的色譜條件相同，既不可能又不方便。 另外即便能夠得到準(zhǔn)確的 fi值，也由于沒有統(tǒng) 一的標(biāo)準(zhǔn)而無法直接應(yīng)用。 為此提出相對校正因子的概念來解決色 譜定量分析中的計算問題。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 相對校正因子 相對校正因子定義為 fi? = fi / fs 即某組分 i的相對校正因子 fi?為 組分 i與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) s的絕對校正因子之比。 fi? =（ mi /Ai） /（ ms/As） =（ mi / ms） （ As / Ai ） fi? Ai =（ mi / ms） As YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 可見，相對校正因子 fi?就是當(dāng)組分 i的質(zhì)量 與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) s相等時，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積是組 分 i峰面積的倍數(shù)。 若某組分質(zhì)量為 mi ，峰面積 Ai ，則 fi? Ai的數(shù)值與質(zhì)量為 mi的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積相等。 也就是說，通過相對校正因子， 可以把各個組 分的峰面積分別換算成 與其質(zhì)量相等的標(biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)的峰面積 ，于是比較標(biāo)準(zhǔn)就統(tǒng)一了。 這就是歸一法求算 各組分百分含量的基礎(chǔ) 。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 相對校正因子的表示方法 上面介紹的相對校正因子中組分和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 都是以質(zhì)量表示的，故又稱為相對質(zhì)量校正 因子； 若以摩爾為單位，相對摩爾校正因子。 另外相對校正因子的倒數(shù)還可定義為相對響 應(yīng)值 S?（分別為相對質(zhì)量響應(yīng)值 Sw?、相對摩 爾響應(yīng)值 SN?）。 通常所指的校正因子都是相對校正因子。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 相對校正因子的測定方法 相對校正因子值只與被測物和標(biāo)準(zhǔn)物以及檢測器的類型有關(guān)，而與操作條件無關(guān)。 因此， fi? 值可自文獻(xiàn)中查出引用。 若文獻(xiàn)中查不到所需的 fi? 值，也可以自己測定。 GC中常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)： 對熱導(dǎo)檢測器（ TCD）是苯； 對氫焰檢測器（ FID）是正庚烷。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 測定 相對校正因子最好是用色譜純試劑。 若無純品，也要確知該物質(zhì)的百分含量。 測定時首先準(zhǔn)確稱量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和待測物，然后將它們混合均勻進(jìn)樣，分別測出其峰面積，再進(jìn)行計算。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 （三）定量計算方法 1. 歸一化法 把所有出峰組分的含量之和按 100%計的定量方法稱為歸一化法。 其計算公式如下： Pi % = (mi / m) 100% = Aif?i / (A1f?1 + A2f?2 + ?+Anf?n) 100% 式中 Pi %為被測組分 i的百分含量； A A2 ? An為組分的峰面積； f? f?2 ? f?n為各組分的 相對校正因子 。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 當(dāng) f?i 為質(zhì)量相對校正因子時，得質(zhì)量百分?jǐn)?shù)； 當(dāng) f?i 為摩爾相對校正因子時，得摩爾百分?jǐn)?shù)。 歸一化法的 優(yōu)點 是簡單、準(zhǔn)確，操作條件變化時對定量結(jié)果影響不大。 但此法在實際工作中仍有一些限制： 比如，樣品的所有組分必須流出，且出峰； 某些不需要定量的組分也必須測出其峰面積及 f?i 值； 此外，測量低含量或微量雜質(zhì)時，誤差較大 。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 2. 內(nèi)標(biāo)法 當(dāng)樣品各組分不能全部從色譜柱流出； 或有些組分在檢測器上無信號； 或只需定量分析某幾個出現(xiàn)色譜峰的組分； 常常采用內(nèi)標(biāo)法。 它是將一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物，加入到準(zhǔn)確稱量的試樣中，根據(jù)試樣和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量 ,以及被測組分和內(nèi)標(biāo)物的峰面積的比值 ,求出被測組分的含量。 YANGTZE NORMAL UNIVERSITY 現(xiàn)代儀器分析 由于被測組分與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量之比等于峰面積之比，即