高效液相色譜分析法hplc-資料下載頁(yè)
2025-08-20 09:08本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】特指一種用液體為流動(dòng)相的色譜分離分析方法。驗(yàn)技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。第三章高效液相色譜分析法HPLC. §2-1高效液相色譜法的特點(diǎn)。力，只與固定相有相互作用。且流動(dòng)相種類較多，選擇余地廣，改。也可以增大分離選擇性。體系中的痕量組分。反相色譜分離水溶液中的物質(zhì)----生化物質(zhì)。色譜法分析離子型體的含量。離高分子化合物。相忽略大低，流動(dòng)相柱溫BT????選擇兼顧柱效和分析時(shí)間，）（忽略固定相傳質(zhì)阻抗smmssmmCCCCCC?????溫影響小）質(zhì)和固定相性質(zhì)（受柱：調(diào)整流動(dòng)相種類、性?選粘度小、低流速的流動(dòng)相——甲醇，
【正文】 線性范圍： 見圖中的直線部分 CD所對(duì)應(yīng)的 活度范圍。 斜率和轉(zhuǎn)換系數(shù) 斜率： 離子選擇性電極在能斯特響應(yīng)范圍內(nèi)，被測(cè)離子活度變化 10倍，所引起的電位變化值稱為該電極對(duì)給定離子的斜率。 實(shí)際斜率與理論斜率存在一定的偏差，這種偏差常用 轉(zhuǎn)換系數(shù) Ktr表示，計(jì)算式為： zFRT3 0 ?理論斜率%100l 2121 ???aazFRTK tr??Ktr愈接近 100%，電極的性能愈好。 響應(yīng)時(shí)間 實(shí)際響應(yīng)時(shí)間：離子選擇電極和參比電極接觸試樣溶液時(shí)算起，直至電池電動(dòng)勢(shì)達(dá)到穩(wěn)定在 1mV內(nèi)所需的時(shí)間。 壽命和電極內(nèi)阻 待測(cè)離子的價(jià)態(tài) 四、離子選擇性電極的種類 根據(jù)膜電位響應(yīng)機(jī)理、膜的組成和結(jié)構(gòu) 分為以下幾類： △ c/c≈177。 4n △ E(%) 剛性基質(zhì)電極 H+、 Li+ 流動(dòng)載體電極 液膜、冠醚 敏化電極 氣敏電極 氨電極、硫化氫電極 酶電極 葡萄糖電極、 組織電極 晶體膜 電極 原電極 非晶體 膜電極 均相膜電極 LaF、 Ag2S 非均相膜電極 Ag2SCuS 離子選擇電極 CO2 氣敏電極 167。 45 測(cè)定離子活度的實(shí)驗(yàn)方法與應(yīng)用 校正曲線法 Calibration graph method (standard curve, working curve) 特點(diǎn)：簡(jiǎn)單、快速、 需要配置濃度穩(wěn)定的一系 列標(biāo)準(zhǔn)溶液、便于批量分 析。但不能完全消除樣品 中基底組分的干擾，需要 加大量“總離子強(qiáng)度緩沖 劑”。 E logai logci 標(biāo)準(zhǔn)加入法 Standard addition method 設(shè)某未知試樣的體積為 V0 , 被測(cè)離子濃度為 Cx , 則測(cè)得的電動(dòng)勢(shì) Ex為： 加入體積為 Vs , 濃度為 c s 的標(biāo)液后 測(cè)得的電動(dòng)勢(shì) Es有公式： )VVVcVc(fxlgSKEsssx39。s ????00221x39。x cfxlgSKE 111 ??因?yàn)轶w積變化小，所以離子強(qiáng)度基本不變，即 f1=f2, x1=x2，經(jīng)過(guò)換算 得精確計(jì)算式： 10)10( ??????SxxSEESssx VVVVVVccxs考慮 V0Vs ， 則 V0+Vs=Vx，得近似計(jì)算式： 10)110( ???? SEEssxxsVVcc方法特點(diǎn)：僅需要配置一種標(biāo)準(zhǔn)溶液，數(shù)據(jù)處理可以程序化、能校正基底干擾，但每次加入標(biāo)準(zhǔn)溶液的精度要求高。有一定操作難度。 格氏作圖法 Gran graphical determination 格氏作圖法： 也稱連續(xù)標(biāo)準(zhǔn)加入法，它是在測(cè)量過(guò)程中連續(xù)多次加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)一系列的 ΔE值對(duì)相應(yīng)的 VS值作圖來(lái)求得結(jié)果。方法的準(zhǔn)確度較一次加入法高。 (V0 + Vs)10E/S~Vs作圖求出橫坐標(biāo)上的負(fù)截距值 (V0 + Vs)10 Δ E/S = k (cxV0 + cSVS) (V0 + Vs)10Δ E/S = k (cxV0 + cSVS)=0 Cx = cSVS V0 方法特點(diǎn)：能校正單次加標(biāo)樣造成的偶然誤差，定量精度較高。但必須作圖，數(shù)據(jù)處理慢。 下圖 離子選擇電極電位法的應(yīng)用 離子選擇性電極是一種以電位法測(cè)量溶液中某些特定離子活度的指示電極。由于所需儀器設(shè)備簡(jiǎn)單，輕便，適于現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量，易于推廣，對(duì)于某些離子的測(cè)定靈 敏度可達(dá) ppm級(jí)（個(gè)別可達(dá) ppb數(shù)量級(jí)），特效性較好，因此發(fā)展極為迅速。 微離子選擇性微電極廣泛地應(yīng)用于腦髓液、大腦表層、體液和胃液中的原位細(xì)胞外 測(cè)定。 近年來(lái)，在生物化學(xué)物質(zhì)的活體檢測(cè)傳感器研究中，離子選擇電極得到廣泛應(yīng)用。 167。 46 電位滴定法 (potentiometric titration) 一、電位滴定法原理 電位滴定法：是基 于電位突躍來(lái)確定 滴定終點(diǎn)的方法。 Data processing of potentiometric titration 電位滴定分析的特點(diǎn)： (1) 能用于混濁或有色溶液的滴定與缺乏 指示劑的滴定 。 (2) 能用于非水溶液中某些有機(jī)物的滴定 。 (3) 能用于測(cè)定熱力學(xué)常數(shù) 。 (4) 能用于連續(xù)滴定和自動(dòng)滴定 ,并適用微 量分析 。 (5) 準(zhǔn)確度較直接電位法高。 二、 滴定終點(diǎn)的確定 1. 圖解法確定電位滴定終點(diǎn) (1) EV 曲線法； (2) △ E/△ V VT 曲線法； (3) △ 2E/△ 2V VT 曲線法。 三、電位滴定法的類型和指示電極的選擇 1. 酸堿滴定 通常采用 pH玻璃電極 為指示電極、飽和甘汞電極為參比電極。 2. 氧化還原滴定 滴定過(guò)程中，氧化態(tài)和還原態(tài)的濃度比值發(fā)生變化，可采用 零類電極 作為指示電極。 3. 沉淀滴定 根據(jù)不同的沉淀反應(yīng)，選用不同的離子選擇指示電極。 4. 配位滴定 在用 EDTA滴定金屬離子時(shí)，可采用相應(yīng)的金屬離子選擇性電極和第三類電極作為指示電極。 作業(yè)： 2， 3， 7， 9， 10， 12， 12，
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