高等藥物分析復習資料-資料下載頁
2025-05-03 00:29本頁面
【正文】 ：與傳統(tǒng)的萃取分離不同,萃取拆分技術(shù)要求互相接觸的兩種液相中至少有一種具有旋光性。從理論上講,只要兩個對映異構(gòu)體的分離因數(shù)大于 1,在足夠多的級數(shù)下,即可實現(xiàn)拆分。目前至少存在配位萃取拆分體系、 親和萃取拆分體系以及形成非對映體異構(gòu)體萃取拆分體系等3種萃取拆分體系。⑥旋轉(zhuǎn)帶蒸餾技術(shù)是一種分離能力較強的新型蒸餾技術(shù),通過選擇旋轉(zhuǎn)帶蒸餾塔中的電機轉(zhuǎn)速和加熱套溫度,進而控制采樣速度,經(jīng)過數(shù)次重復蒸餾、富集、再蒸餾來達到分離目的。1高速逆流色譜高速逆流色譜的分離基礎是流體動力學平衡。由于螺旋管柱的行星式運動產(chǎn)生了一個在強度和方向上變化的離心力場， 使在螺旋柱中互不相溶的兩相不斷混合從而達到穩(wěn)定的流體動力學平衡。兩相溶劑的流體動力學分布如圖2所示?？拷行妮S的將近1/4的區(qū)域是兩相混合區(qū)， 在此處兩相發(fā)生劇烈的混合。在其余的區(qū)域， 兩相分離成兩層， 重相占據(jù)螺旋管的每一段的外部， 輕相占據(jù)每一段的內(nèi)部，并且兩相沿螺旋管形成一個清晰的線性界面?；旌虾蛢A析區(qū)域交替出現(xiàn)在螺旋管中， 并且兩相液體在螺旋管中總是處于接觸狀態(tài)， 沒有死體積的存在。所以可以根據(jù)所用體系液體的流動趨勢選用合適的模式， 使得其中一相作為固定相保留在螺旋管中， 另一相作為流動相帶著樣品在螺旋管內(nèi)穿過固定相相， 在此過程中使樣品在兩相中不斷混合和分配， 從而根據(jù)樣品在兩相中分配系數(shù)的不同達到樣品之間相互分離的目的。高速逆流色譜的特點HSCCC 作為一種常用的分離純化技術(shù)， 具有以下優(yōu)點： （1）無不可逆吸附。聚四氟乙烯管中的固定相不需要載體， 可以消除固液色譜中因使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象， 避免樣品在分離過程可能存在的變性， 適用于分離極性物質(zhì)和生物活性物質(zhì)； （2）回收率高。由于液體作為流動相和固定相，滯留在柱中的樣品可以通過多種洗脫方式予以完全回收， 能夠同時完成分離純化與制備， 適于制備性分離； （3）操作簡單快捷。因其固定相為液體， 體系更換與平衡較常規(guī)方法方便、 快捷； （4）進樣量大。與HPLC 相比，HSCCC 進樣量最多可達到克級水平，是 HPLC 的數(shù)百倍。 （5）分離效率高。與常壓、 低壓色譜相比， HSCCC 的分離能力強， 有些樣品經(jīng)一次分離即得到1個甚至多個化合物， 并且分離時間短， 純度高。高速逆流色譜的影響因素：由于高速逆流色譜是無需任何固態(tài)載體支撐的液液色譜， 其中作為固定相的液體在色譜柱中的保留程度對于高速逆流色譜的分離過程是十分重要的。首先， 所選擇的溶劑體系對固定相保留率有很大的影響， 如兩相密度差、 粘度、 界面張力等。通過研究表明， 兩相的密度差對固定相保留率的影響最大， 固定相保留率和密度差基本呈線性關系。其次， 還存在一些人為可以操控的條件會對固定相保留率產(chǎn)生影響，如高速逆流色譜的轉(zhuǎn)速、 流速、 以及柱溫等。其中， 螺旋管柱的轉(zhuǎn)速以及它產(chǎn)生的離心力場對兩相的混合程度具有決定性的影響。因此， 對于界面張力較高的溶劑系統(tǒng)， 應使用較高的轉(zhuǎn)速， 以使兩相之間能夠劇烈的混合， 從而促進分配和減少質(zhì)點傳遞的阻力。對于界面張力較低的溶劑系統(tǒng)， 應使用較低的轉(zhuǎn)速， 以避免過分混合引起的乳化作用， 以及固定相流失的問題。在流動相流速方面， 杜琪珍等總結(jié)得出固定相保留率和流速平方根之間的線性關系。國外學者也發(fā)現(xiàn)了類似的流動相線性速度的平方和固定相保留率之間的線性關系。儀器的柱溫對固定相的保留同樣也有著不可忽視的作用， 其溫度對于親水性強的正丁醇溶劑體系的固定相保留率影響較大， Ito等通過研究發(fā)現(xiàn)升溫能改變?nèi)軇┑恼扯龋?進而影響兩相的分層時間。在50℃～60℃時， 正丁醇體系的分層時間最短， 在該溫度下可以改善固定相的保留率。然而， 對于大部分的疏水性溶劑體系， 由于兩相分層快， 柱溫升高后兩相分層時間縮短不明顯， 因而對改善保留率的效果不明顯。離子液體定義：簡言之離子液體即完全由正負離子組成的室溫下為液體的鹽，由于陰陽離子數(shù)目相等，因而整體上顯電中性。體積差異較大、對稱性均比較低，陰陽離子之間的靜電勢低, 熔點低。陰陽離子之間存在較強的相互作用，幾乎無蒸氣壓，化工過程中替代易揮發(fā)易燃而造成環(huán)境污染和安全事故有機溶劑成為可能。優(yōu)點：對有機物、無機物都有良好的溶解性，使許多化學反應得以在均相中完成，且反應器體積大為減小。具有結(jié)構(gòu)可調(diào)控性:溶解性、液體狀態(tài)范圍取決于陰、陽離子及其取代基的構(gòu)成和配對，可根據(jù)需要，定向設計離子液體體系。離子液體作為電解質(zhì)具有較大的電化學窗口、良好的導電性、熱穩(wěn)定性和極好的抗氧化性。應用：在有機合成中的應用，在催化中的應用，在分離、分析及純化中的應用（萃取分離中的應用、在色譜分析中的應用、在液膜體系中的應用），在電化學中的應用。離子液體在色譜分析中得到應用主要是由于其具有以下的一些特殊性質(zhì)：熔點較低，液態(tài)溫度區(qū)間大、較低的蒸氣壓、極性范圍大、良好的電導率和較高的離子遷移率、表面張力大、溶解性能好、穩(wěn)定性好。離子液體在色譜分析中的應用主要分為： 離子液體在氣相色譜中的應用、離子液體在高效液相色譜中的應用、離子液體在毛細管電泳中的應用2ELISAELISA是一種免疫測定（immunoassay，IA）?；A:抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關，由此進行定性或定量分析。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：（1）固相的抗原或抗體，即免疫吸附劑（immunosorbent）；（2）酶標記的抗原或抗體，稱為結(jié)合物（conjugate）；（3）酶反應的底物。 可設計出各種不同類型的檢測方法?？乖贵w反應①可逆性：抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡，其反應式為：Ag+Ab→AgAb抗體的親和力（affinity），可以用平衡常數(shù)K表示：K=[AgAb]／[Ag][Ab] ,AgAb的解離程度與K值有關。高親和力抗體的抗原結(jié)合點與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合，兩者結(jié)合牢固，不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性。②特異性：抗原抗體的結(jié)合發(fā)生在抗原的決定簇與抗體的結(jié)合位點之間?；瘜W結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型互補關系，具有高度的特異性。 某一特定的物質(zhì)，而不需先分離待檢物。③最適比例④敏感性：酶反應測定法的敏感度約為510μg/ml，免疫測定中凝膠擴散法和濁度法的敏感度與酶反應法相仿，標記的免疫敏感度可提高數(shù)千倍，達ng/ml水平
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