【導讀】中華人民共和國衛(wèi)生部。二○○二年十一月。醫(yī)療衛(wèi)生機構消毒技術規(guī)范。消毒技術規(guī)范目錄

　　

【正文】 染性腹瀉等由病人或其陪護人進行消毒處理。 （ 4）各類傳染病 (包括非法定傳染病 )爆發(fā)流行時應在當地疾病預防控制和監(jiān)督機構的監(jiān)督指導下，由有關單位及時進行消毒，或由當地疾病預防控制和監(jiān)督負責對其進行消毒處理。 （ 5）在醫(yī)院中對傳染病病人的終末消毒由醫(yī)院安排專人進行。 （ 6）非專業(yè)消毒人員開展疫源地消毒前應接受培訓。 時限要求 接到甲類傳染病疫情報告和乙類傳染病中的肺炭疽和艾滋病的疫情報告后，城市應在 6 h內，農村應在 12 h 內采取消毒措施 ，其他傳染病按病種不同應在 24h 至 48h 內采取消毒措施。 裝備要求 承擔疫源地消毒任務的單位，應根據工作需要和條件配備消毒工具和防護用品，儲備一定數量的消毒劑。 (1)消毒工具：背負式噴霧器、氣溶膠噴霧器、機動噴霧器、配藥桶（ 10L）、刻度量杯（筒）、工具箱、消毒車。 (2)防護用品：工作服、隔離服、防護眼鏡、口罩、防鼠疫口罩、帽子、手套、長筒膠靴、毛巾、污物袋、手電筒、皮卷尺、雨衣、長柄毛刷、裝工作衣的布袋（ 30cm179。 30cm179。 40cm）、肥皂盒、皮膚消毒盒（瓶）。 (3)消毒劑：儲備一定 量的消毒劑并與有關廠家建立聯系，確保處理突發(fā)疫情的需要。常用消毒劑有過氧乙酸、含氯消毒劑、碘伏等。 技術要求 (1)疫區(qū)消毒 1)消毒范圍和對象：以傳染源排出病原體可能污染的范圍為依據確定消毒范圍和對象。 2)消毒持續(xù)時間：以傳染病流行情況和病原體監(jiān)測結果為依據確定消毒的持續(xù)時間。 3)消毒方法的選擇：以消毒因子的性能、消毒對象、病原體種類為依據選擇消毒方法。盡量避免破壞消毒對象的使用價值和造成環(huán)境的污染。 4)疑似傳染病疫源地的消毒：可按疑似的該類傳染病疫源地進行消毒處理或按下一條進行處 理。 5)不明傳染病疫源地的消毒：應根據流行病學指征確定消毒范圍和對象，采取最嚴格的消毒方法進行處理。 6)注意與其它傳染病控制措施配合：搞好傳染源的管理，疫區(qū)的封鎖、隔離，殺蠅、防蠅 ，滅鼠、防鼠，滅蚤，搞好飲用水、污水、食品的消毒及衛(wèi)生管理，搞好環(huán)境衛(wèi)生。加強易感人群的保護。 7)填報消毒工作記錄，必要時進行消毒效果評價。 — 22— (2)疫點的隨時消毒 1)對病人應根據病情做到“三分開”與“六消毒”?！叭珠_”是指：①分住室（條件不具備可用布簾隔開，至少要分床）；②分飲食；③分生活用具（包括餐具、洗漱用具、便盆、 痰罐等）?！傲尽笔侵福孩傧痉置诨蚺判刮铮ㄈ绾粑纻魅静≈饕獮榭诒欠置谖?，腸道傳染病主要為糞便，接觸性傳染病主要為膿液、痂皮等）；②消毒生活用具；③消毒雙手；④消毒衣服、被單；⑤消毒患者居室；⑥消毒生活污水、污物。 2)病人陪伴和護理人員，除做好病人的隨時消毒外，應做好本人的衛(wèi)生防護，護理病人后，應消毒雙手。 (3)疫點的終末消毒程序 1)在出發(fā)前，應檢查所需消毒用具、消毒劑和防護用品，做好準備工作。 2)消毒人員到達疫點，首先查對門牌號和病人姓名，并向有關人員說明來意，做好防疫知識宣傳，禁止無關人員進 入消毒區(qū)域內。 3)對脫掉外衣應放在自帶的布袋中（不要放在污染或可能受到污染的地方）。穿隔離服、膠鞋，戴上口罩、帽子。用過氧乙酸或含氯制劑時，須戴防護眼鏡。 4)仔細了解病員患病前和患病期間居住的房間、活動場所，用過的物品、家具，吐瀉物、污染物傾倒或存放地點，以及污水排放處等，據此確定消毒范圍和消毒對象。根據消毒對象及其污染情況，選擇適宜的消毒方法。 5)進入疫點時，應先消毒有關通道 。 6)測量房屋、家具及地面需消毒的面積和體積，估算需消毒的污水量。 7)必要時，由檢驗人員對不同消毒對象進行消毒前采樣。 8)消毒前應關閉門窗，將水缸蓋好，將未被污染的貴重衣物、飲食類物品、名貴字畫及陳列物品收藏好。 9)如系呼吸道傳染病，應對室內空氣進行消毒 。 10)如系腸道傳染病，應先于室內滅蠅，再進行消毒。 11)對室內地面、墻壁、家具和陳設物品消毒時，應按照先上后下，先左后右的方法，依次進行消毒 。 12)病人用過的餐（飲）具、污染的衣物若不能集中在消毒站消毒時，可在疫點進行煮沸、浸泡或擦拭消毒。 作浸泡消毒時，必須使消毒液浸透被消毒物品。作擦拭消毒時，必須反復擦拭 2 次～ 3 次 。對污染重、經濟價值不大的物品和廢棄物，在征得病 家同意后焚燒。 13)室內消毒后，必要時對廁所、垃圾、下水道口、自來水龍頭、缸水和井水等進行消毒。 14)對傳染源密切接觸者進行人員衛(wèi)生處理。 15)疫點消毒工作完畢，對消毒人員穿著的工作服、膠靴等進行噴灑消毒后脫下。將衣物污染面向內卷在一起，放在布袋中帶回消毒。所用消毒工具表面用消毒劑進行擦洗消毒。 16)必要時，到達規(guī)定的消毒作用時間后，由檢驗人員對不同消毒對象進行消毒后采樣。 17)填寫疫點終末消毒工作記錄。 18)離開病家前，讓病家開窗通風，擦拭打掃。 (4)消毒人員注意事項 1）出發(fā)前，要檢查應攜 帶的消毒工具是否齊全無故障，消毒劑是否足夠。 2）應主動取得病家合作和相關人員的配合。選擇消毒因子時，應盡量采用物理法消毒。在用化學法消毒時應盡量選擇對相應致病微生物殺滅作用良好，對人、畜安全，對物品損害輕微，對環(huán)境影響小的消毒劑。 3）消毒過程中，不得吸煙、飲食。要注意自我保護，既要防止或減少受到消毒因子的傷 — 23— 害又要避免受到微生物感染。 4)消毒過程中，不得隨便走出消毒區(qū)域，禁止無關人員進入消毒區(qū)內。 5)消毒應有條不紊，突出重點。凡應消毒的物品，不得遺漏。嚴格區(qū)分已消毒和未消毒的物品，勿使已消毒的物品被再 次污染。 6)攜回的污染衣物應立即分類作最終消毒。 7)清點所消耗的藥品器材，加以整修、補充。 8)填好的消毒記錄應及時上報。 — 24— 消毒 產品消毒效果檢 驗技術 規(guī)范 消毒劑殺微生物試驗 適用范圍 主要適用于消毒劑鑒定和日常監(jiān)測，用來評價各種用途的消毒劑對微生物的殺滅效果。按此方法進行的試驗，只是對消毒劑的殺菌能力的重要方面進行驗證，側重反映消毒劑的實用劑量與殺菌能力。不能反映消毒劑的全面特性。 菌懸液與菌片的制備 適用范圍 制備消毒 劑殺菌試驗用細菌懸液與菌片，以供消毒劑殺菌試驗時使用。 試驗器材 （ 1）菌種 :金黃色葡萄球菌 ATCC 653銅 綠 假單胞 菌 ATCC 1544 大腸桿菌 809 枯草桿菌黑色變種 ATCC 937 龜 分枝 桿菌膿腫亞種 ATCC 9332 白色葡萄球菌 803 白色念珠菌 ATCC1023黑曲霉菌 ATCC16404。在上述規(guī)定的菌株基礎上，根據消毒劑特定用途或試驗特 殊需要，還可增選其他菌株。 （ 2）有機干擾物：見附錄 A。 （ 3）磷酸鹽緩沖液 ： 見附錄 A。 （ 4）無菌蒸餾水。 （ 5） 稀釋液 ：見附錄 A。 （ 6）細菌培養(yǎng)基 ： 胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（ TSA），胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（ TSB）等， 見附錄 A。 （ 7）革蘭染色液 ： 見附錄 A。 （ 8）芽孢染色液：見附錄 A。 （ 9）恒溫水浴箱。 （ 10）玻璃漏斗。 （ 11）刻度吸管（ 、 、 ），毛細吸管。 （ 12）數字可調移液器（ 10μl， 20μl， 100μl， 200μl， 1000μl）及配套用一次性塑料吸頭。 （ 13）離心機。 （ 14）電動混合器 （ 15）濁度計。 細菌懸液制備程序 （ 1）細菌繁殖體懸液的 制備 1）取凍干菌種管，在無菌操作下打開，以毛細吸管加入適量營養(yǎng)肉湯，輕柔吹吸數次，使菌種融化分散。取含 ml～ 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置 37℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h。用接種環(huán)取第 1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，于 37℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h。挑取上述第 2 代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，于 37℃ 培養(yǎng) 18h～24h，即為第 3代培養(yǎng)物。 — 25— 2） 取菌種第 3代～ 14代的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物（ 18h～ 24h），用 吸取 ml～ ， 反復吹吸，洗下菌苔。隨后，用 移至另一無菌試管中，用電動混合器混合 （振蕩） 20s，或在手掌上振敲 80次，以使細菌懸浮均勻。 3）初步制成的菌懸液，先用細菌濃度比濁測定法粗測其含菌濃度，然后以稀釋液稀釋至所需使用的濃度。 4）細菌繁殖體懸液應保存在 4℃ 冰箱內備用。 應當天使用不得過夜。 5）懷疑有污染時，應以菌落形態(tài)、革蘭染色與生化試驗等法進行鑒定。 （ 2）細菌芽孢懸液的制備 1）取凍干菌種管，在無菌操作下打開，以毛細吸管吸加適量營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，輕柔吹吸數次，使菌種融化 分散。取含 5 ml～ 10ml營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置 37℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h。用接種環(huán)取第 1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，于 37℃培養(yǎng) 18h～ 24h。挑取上述第 2 代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，于 37℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h，即為第 3 代培養(yǎng)物。 2）用 吸管吸取 ml～ 第 3代～ 5代的 18h～ 24h 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物，接種于羅氏瓶中營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面，將其搖動使菌液布滿營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的表面，再將多余肉湯培養(yǎng)物吸出， 將羅氏瓶 置 于 37℃溫箱內，培養(yǎng) 5d～ 7d。 3）用接種環(huán)取菌樣少許涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在顯微鏡（油鏡）下進行鏡檢。 當芽孢形成率達 95% 以上 時 ， 即 可進行以下處理。否則， 應繼續(xù) 在室溫下放置一定時間，直至達到上述芽孢形成率后再進行以下處理。 改良芽孢染色法：①用接種環(huán)取菌樣涂布于玻片上，待自然干燥。而后通過火焰加熱將菌固定于玻片上。②將涂片放入平皿內，片上放兩層濾紙，滴加足量的 % 孔雀綠水溶液。將平皿蓋好，放 54℃ ～ 56℃ 條件下，加熱 30min。取出，去濾紙，用自來水沖洗殘留孔雀綠溶 液。 ③ 加 % 沙黃水溶液，染 1min。水洗，待干后鏡檢。芽孢呈綠色，菌體呈紅色。 4）羅氏瓶培養(yǎng)物，用 吸管加 無菌蒸餾水于每一羅氏瓶中，以 L棒輕輕推刮下菌苔。吸出第一批洗下的菌懸液，再向瓶內吸加 無菌蒸餾水，重復洗菌一遍。將第一和第二批洗下的菌懸液集中于一含玻璃珠的無菌三角燒瓶中，振搖 5min，打碎菌塊，使成均勻的芽孢懸液。 5）必要時，將盛裝菌懸液的三角燒瓶置 45℃ 水浴中 24h，使菌自溶斷鏈，分散成單個芽孢。 6）用無菌棉花或紗布過濾芽孢懸液，清除其中的瓊脂凝塊。 7）將過濾后的芽孢懸液，置無菌離心管內，以 3000 r/min 速度離心 30min。棄上清液，加蒸餾水吹吸使芽孢重新懸浮。再離心和重新懸浮清洗，先后共 3遍。 8）將洗凈的芽孢懸浮于三角燒瓶內蒸餾水中，并加入適量小玻璃珠。 9）將芽孢液放于 80℃ 水浴中 10min（或 60℃ ， 30min），以殺滅殘余的細菌繁殖體。待冷至室溫后，保存于 4℃ 冰箱中備用。 有效使用期為半年。 10）芽孢懸液在使用時，應先進行活菌培養(yǎng)計數。 11）懷疑有雜菌污染時，應以菌落形態(tài)、革蘭染色與生化試驗等法進行鑒定。 菌片的制備程序 （ 1）消毒試驗中使用的菌片是以菌液滴加于載體上制成。載體應根據消毒對象選擇，常用的有金屬、玻璃、濾紙、線、 棉 布等。根據其特點選擇適宜材料載體作為代表。載體可以為方形，大小為 10mm10mm。 當以金屬片為載體時，因方形金屬載體在振敲時可將玻璃試 — 26— 管撞碎，故改用 12mm 直徑圓形金屬片（厚 ）。 （ 2）所用載體（除濾紙片外）于染菌前，應進行脫脂處理。脫脂方法如下： ① 將載體放在含 洗滌劑 的水中煮沸 30 min； ② 以自來水洗凈； ③ 用蒸餾水煮沸 10min； ④ 用蒸餾水漂洗至 pH 呈中性 ； ⑤ 晾干 、 熨平備用。 （ 3）布片用白平紋棉布制作。在剪開前，先將脫脂的布塊按載體規(guī)定的大小，抽去邊緣一周的經緯紗各一根，再按抽紗痕剪開。此法制成的載體大小一致，且無毛邊。金屬片以不銹鋼制作，紙片以新華濾紙制作。 （ 4）載體經壓力蒸汽滅菌后，使用滴染法 染菌 。 染菌用菌懸液：使用 TSB營養(yǎng)肉湯配制。細菌繁殖體，可直接使用經 18h～ 24h培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)物，細菌芽孢可使用 4℃ 冰箱貯存液。含菌量約為 1108cfu/ml～ 5108cfu/ml，可使用濁度計調整菌液濃度。 滴染法染菌時，將經滅菌的載體片平鋪于無菌平皿 內，逐片滴加菌液。菌液滴加量每片為 10μl。用 10μl移液器接滅菌塑料吸頭滴染菌液，并用接種環(huán)涂勻整個載體表面。滴染菌液后，染菌載體可置 37℃ 溫箱內干 燥 （約 20min～ 30min），或置室溫下自然陰干后再使用。 （ 5）每個菌片的回收菌數，按活菌培養(yǎng)計數所得結果，應為 5105 cfu/片～ 5106 cfu/片。 注意事項 （ 1）用濁度計測定的菌懸液濃度，只用于在滴染菌片時對菌懸液稀釋度的估計。作為菌懸液含菌濃度或菌片染菌量的正式報告（如殺菌試驗中陽性對照組菌懸液或菌片所含菌量），必須 以活菌培養(yǎng)計數的實測結果為準，不得使用根據比濁法判定的估計值。 （ 2）滴染時，菌液滴加量不宜過多，避免流散影響染菌的準確性。