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電泳技術(shù)ppt課件-資料下載頁

2025-05-01 18:13本頁面
  

【正文】 電時,兩性電解質(zhì)載體即形成一個 由陽極到陰極連續(xù)增高的 pH梯度 。 P進(jìn)入時,不同的 P移動到與其等電點(diǎn)相當(dāng)?shù)?pH位置上,從而使不同等電點(diǎn)的 P得以分離。 ? 優(yōu)點(diǎn):分辨率高,區(qū)帶清晰、窄,加樣部位自由,重現(xiàn)性好,可測定 P或多肽的等電點(diǎn)。 ? 缺點(diǎn):需無鹽溶液,不適用于在等電點(diǎn)不溶解或發(fā)生變性的 P。 ? 1 穩(wěn)定的 pH梯度的形成 ? 2 兩性電解質(zhì)載體 要求: 由多乙烯多胺與丙烯酸加成制備(有不同 pH范圍的商品兩性電解質(zhì)載體) ? 3 支持 pH梯度的介質(zhì) 密度梯度溶液(用于自由電泳) 凝膠(如聚丙烯酰胺凝膠) ? 4 操作要點(diǎn) pH梯度支持介質(zhì)的制備 聚焦電泳 檢測 兩性電解質(zhì)載體的除去 電泳技術(shù)思考題 ? 1名詞解釋 電泳、電泳分離技術(shù)、泳動度、電滲、區(qū)帶電泳、相對遷移率、不連續(xù)凝膠電泳 ? 2 影響泳動度的主要因素有哪些? ? 3 區(qū)帶電泳的操作步驟一般有哪些? ? 4 如何制備聚丙烯酰胺凝膠? ? 5 不連續(xù)電泳樣品壓縮成層原理。 ? 6 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳原理。 ? 7 采用電泳技術(shù)如何測定蛋白質(zhì)分子量?如何測定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)?
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