電泳技術ppt課件-在線瀏覽
2025-06-18 18:13本頁面
【正文】 泳含兩層或三層不同孔徑的凝膠，用不同 pH值的緩沖液： ? 樣品膠：大孔徑， ～ 沖液 ? 濃縮膠：與樣品膠相同 ? 分離膠：小孔徑， ～ TrisHCl緩沖液 ? 樣品壓縮成層原理： ? 電極緩沖液： ? HCl→ ( 解離） → Cl － ， Cl － 泳動速度最快（快離子） ? CH2(NH2)COOH → ( 樣品膠、濃縮膠 ~） → CH2(NH2)COO－ （ ％～ ％）泳動速度最慢（慢離子） ? 蛋白質（ P）泳動速度介于快慢離子之間 ? 電泳時， Cl － 超過 P走在最前面，其后形成一個 離子濃度較低的低電導區(qū) → 較高電位梯度 → P和慢離子加速移動 → P壓縮成層 ? 樣品進入分離膠后， pH為 （電泳過程實測）， CH2(NH2)COO－ 增加，泳動速度增大，很快超過 P， P在均一的電位梯度和 pH條件下分離 SDS凝膠電泳原理 ? 聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中加入 SDS， P電泳遷移率取決于其分子量，而與形狀及所帶電荷無關。 ? 分離測定： ? 測分子量（與標準蛋白比較） ? 鑒定樣品純度（條帶數(shù)目） ? 測定樣品 P含量：掃描定量（比色） 凝膠電泳的操作要點 ? 1 凝膠制備 ? 2 電極緩沖液 ? 3 樣品處理及加樣
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