【正文】 是最早使用的區(qū)帶電泳。當(dāng)濾紙條被緩沖液潤濕后，再蓋上絕緣密封罩，即可由電泳電源輸入直流電壓（ 100V～ 1000V） 進行電泳 。此電泳的特點是分離速度快、 電泳時間短、樣品 用量少。 0603 血清蛋白的電泳圖譜 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （三）凝膠電泳 由區(qū)帶電泳中派生出一種用凝膠物質(zhì)作支持物進行電泳的方式，被稱為凝膠電泳。電泳中常用的凝膠為葡聚糖、交聯(lián)聚丙烯酰胺和瓊脂糖。 0604 凝膠電泳圖 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （四）等電聚焦電泳 1． 等電聚焦電泳過程 一種利用有 pH值梯度的介質(zhì)，分離等電點不同的蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)。 0605 凈電荷與 PH的關(guān)系曲線 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 2．等電聚焦電泳的特點 ①使用兩性載體電解質(zhì)，在電極之間形成穩(wěn)定、連續(xù)、線性的 pH梯度；②由于 “ 聚焦效應(yīng) ” ，即使很小的樣品也能獲得清晰、鮮明的區(qū)帶界面；③電泳速度快 。⑤ 加入樣品的位置可任意選擇；⑥可用于測定蛋白質(zhì)類物質(zhì)的等電點 。 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （ 五 ） 等速電泳 采用兩種不同濃度的電解質(zhì)組成 ，一種為前導(dǎo)電解質(zhì) ， 充滿整個毛細(xì)管柱；另一種為尾隨電解質(zhì) ， 置于一端的電泳槽中 。 0606 等速電泳示意圖 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （ 六 ） 雙向凝膠電泳 （ 二維電泳 ） 第一向采用等電聚焦 根據(jù)復(fù)雜的蛋白質(zhì)成分中各個蛋白質(zhì)的 PI的不同 ， 將蛋白質(zhì)進行分離 。 其結(jié)果不再是條帶狀 ， 而是呈現(xiàn)為斑點狀 。 將抗原樣品在瓊脂平板上先進行電泳 ，使其中的各種成分因電泳遷移率的不同而彼此分開 ，然后加入抗體做雙相免疫擴散 ， 把已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴散而相遇 ， 在二者比例適當(dāng)?shù)牡胤?， 形成肉眼可見的沉淀弧 。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 0609 毛細(xì)管電泳儀裝置示意圖 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 三、毛細(xì)管電泳的特點 1. 高靈敏度 2. 高速度 3. 高分辨率 4. 樣品少 5. 自動化程度高 6. 應(yīng)用范圍廣 0610 英特雷勃 —— 全自動電泳儀 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 四、毛細(xì)管電泳的分離模式 （一）毛細(xì)管區(qū)帶電泳 它是通過在充滿電解質(zhì)溶液的毛細(xì)管中，不同質(zhì)荷比大小的組分在電場的作用下，依遷移速度的不同而進行分離的。 0611 毛細(xì)血管區(qū)帶電泳原理圖 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 ? （二）毛細(xì)管凝膠電泳 ? 將板上的凝膠移到毛細(xì)管中作支持物進行的電泳。 ? 適用于分離、測定肽類、蛋白質(zhì)、 DNA類物質(zhì)的分離。在含有膠束的流動相中，溶質(zhì)在“水相”和“膠束相” (準(zhǔn)固定相 )之間進行分配，即使是中性溶質(zhì)，因其本身疏水性不同，在二者之間的分 配也會有差異，疏水性強的溶質(zhì)在“膠束相”中停留時間長，遷移速度就慢。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 0612毛細(xì)管膠束電動色譜原理圖 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （四）毛細(xì)管等電聚焦電泳 不同等電點的分子分別聚集在不同的位置上，不作遷移而彼此分離，這就是等電聚焦分離過程。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （五）毛細(xì)管等速電泳 毛細(xì)管內(nèi)首先導(dǎo)入具有比被分離各組分高電泳淌度的前導(dǎo)電解質(zhì)，然后進樣，隨后再導(dǎo)入比各分離組份低電泳淌度的尾隨電解質(zhì)，在強電場的作用下，各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中發(fā)生分離。 0613 CEC加壓毛細(xì)管電色譜儀 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 五、毛細(xì)管電泳儀的基本結(jié)構(gòu) 毛細(xì)管電泳儀的結(jié)構(gòu)并不復(fù)雜，主要有高壓源、毛細(xì)管柱、檢測器，以及兩 個供毛細(xì)管兩端插入而又可 和電源相連的緩沖液槽。其輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍為 0V～ 600V、輸出電流為 0mA～ 100mA。 0615 穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （二）全自動醋纖膜電泳儀 全自動醋纖膜電泳儀為全自動電泳儀，有可見光單系統(tǒng)，使用醋酸纖維薄膜電泳片，優(yōu)點為自動化程度高。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （三）全自動熒光 /可見光雙系統(tǒng)電泳儀 全自動熒光 /可見光雙系統(tǒng)電泳儀為全自動電泳儀，具有熒光 /可見光雙系統(tǒng)，在使用熒光試劑項目如 CK、 LD同工酶時為全自動。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （四）全自動瓊脂糖電泳儀 全自動電泳儀，有可見光單系統(tǒng)，使用瓊脂糖凝膠電泳膠片，優(yōu)點為靈敏度高，可適用于低濃度蛋白檢驗 。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （五）雙向電泳及雙向電泳 液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 雙向電泳是將樣品進行電泳后，在它的直角方向再進行一次電泳。樣品經(jīng)過電荷與質(zhì)量兩次分離后可得到分子的等電點、分子量等信息。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （六）高效毛細(xì)管電泳及高效毛細(xì)管電泳 質(zhì)譜聯(lián)用 高效毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場為推動力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （七）毛細(xì)管電泳芯片 利用毛細(xì)管電泳芯片可以進行 DNA長度分析、序列分析和基因分型等研究。因為其可承載高電壓（ 2300V/cm）并具有較小的樣品體積，故有利于得到較好的分離效果。 0616 DNA測序系統(tǒng) 第五節(jié) 電泳儀的臨床應(yīng)用 一、 血