20xx年醫(yī)學(xué)專題—電泳技術(shù)-昆明醫(yī)科大學(xué)-資料下載頁(yè)
2025-11-03 06:23本頁(yè)面
【正文】 hu224。n)不同的帶電顆粒通過(guò)一定孔徑的凝膠時(shí)，因受阻滯的程度不同而表現(xiàn)出不同的遷移率，這就是分子篩效應(yīng)。分子量小，阻力小，移動(dòng)快；分子量大，阻力大，移動(dòng)慢。 電荷效應(yīng)(Effect of electric charge)：帶電顆粒由于所帶電荷量不同，而在電泳中表現(xiàn)出不同的遷移率，這就是電荷效應(yīng)。,第二十六頁(yè)，共三十八頁(yè)。,4.染色 聚丙烯酰胺凝膠的常用染色方法有兩種： 考馬斯亮藍(lán)染色法： 利用蛋白質(zhì)－染料結(jié)合的原理，靈敏度高，可以檢測(cè)(jiǎn c232。)低至8－10 ng的蛋白質(zhì)。線性范圍是20倍。但染料會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行修飾而影響質(zhì)譜分析。 銀染法： 銀染是利用甲醛將銀離子（Ag+）在蛋白質(zhì)或者核酸上還原成黑色的單質(zhì)銀，來(lái)指示條帶。銀染的靈敏度比考馬斯亮藍(lán)染色高100倍，可以檢測(cè)低至1 ng的蛋白質(zhì)。線性范圍是40倍。但對(duì)某些蛋白質(zhì)染色效果差，且影響其后的蛋白質(zhì)測(cè)序和質(zhì)譜分析。,第二十七頁(yè)，共三十八頁(yè)。,聚丙烯凝膠電泳分析(fēnxī)蛋白質(zhì)（考馬斯亮藍(lán)染色）,聚丙烯凝膠電泳分析(fēnxī)核苷酸多態(tài)性（銀染）,第二十九頁(yè)，共三十八頁(yè)。,常規(guī)的聚丙烯酰胺凝膠電泳適合于核苷酸多態(tài)性和蛋白質(zhì)的分析、分離。 SDSPAGE則常用于測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量和蛋白質(zhì)的亞基數(shù)。目前已發(fā)現(xiàn)有些蛋白質(zhì)不能用SDSPAGE測(cè)定分子量。如電荷異?；驑?gòu)象異常的蛋白質(zhì)，帶有較大輔基的蛋白質(zhì)（某些(mǒu xiē)糖蛋白）以及一些結(jié)構(gòu)蛋白，如膠原蛋白等。,四、電泳(di224。n yǒnɡ)的應(yīng)用: (Charge of the application),第三十頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十一頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十二頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十三頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十四頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十五頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十六頁(yè)，共三十八頁(yè)。,第三十七頁(yè)，共三十八頁(yè)。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),電泳技術(shù)。利用電泳現(xiàn)象對(duì)某些化學(xué)或生物物質(zhì)進(jìn)行分離、分析或提純的方法和技術(shù)叫電泳技術(shù)。EB顯帶（EB banding）。無(wú)紫外吸收，不染色就可以用于紫外波長(zhǎng)的凝膠掃描作定量分析。生物大分子在聚丙烯酰胺凝膠中泳動(dòng)時(shí)，有電荷效應(yīng)與分子篩效應(yīng)。在電泳分離后能保持蛋白質(zhì)和酶等生物大分子的生物活性。目前已發(fā)現(xiàn)(fāxi224。n)有些蛋白質(zhì)不能用SDSPAGE測(cè)定分子量,第三十八頁(yè)，共三十
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