舊版pfge脈沖場電泳技術培訓4chef故障排除-資料下載頁
2025-01-12 22:57本頁面
【正文】 cell suspensions ?Do NOT leave bacterial cell suspensions at room temp for extended periods of time prior to casting plugs （七） 起始的菌體懸液質量 Preparing cell suspension For Internal BioRad use ONLY! （八） 制作包埋菌體的小膠塊步驟 1% % % % % S S S When agarose is reheated, water evaporates and the agarose concentration increases, resulting in plugs that do not have the expected agarose percentage. Reheating the agarose 6 times increased the concentration from 1% to 2%. S = standard Potential problems: ?Agarose that is too hot may damage the cells ?Agarose thickens and solidifies as it cools, making pipetting difficult and leading to an uneven distribution of cells within plugs Remendations: ?Equilibrate melted agarose to 50 – 54186。C and keep warm while casting plugs. ?Limit mechanical force (pipetting) when mixing melted agarose with cell suspensions. ?Do not reuse plug agarose more than 3 or 4 times. Repeated heating results in loss of fluid and increases the agarose concentration. 反復熔化包埋用 瓊 脂糖 濃 度增加 % For Internal BioRad use ONLY! Exposure time: ? Too short = difficulty visualizing faint, bottom bands ? Too long = Increased background, loss of distinction between closely migrating bands Increasing exposure time Underexposed (6 secs) Just right (24 secs) Overexposed (60 secs) （九） 圖 象采集步 驟 Image acquisition For Internal BioRad use ONLY! （十）其它的問題 … 循環(huán)通路中有氣泡 Air Bubble Accumulating ? 通常循 環(huán) 速度慢造成 ? 檢查 管路和 連 接部分?？赡懿糠止苈酚辛?縫 容易使空氣 進入 ? 檢查 管路中不要被 東 西堵塞 ? 建 議 ? 更 換 管路， 嘗試 采用外管直徑更小點的管子，并 檢查 所有連 接 處 密封性好 ? 如有堵塞，反向沖洗清 潔 ? 瓊 脂糖碎片堵塞引起 ，使用 擋 膠條 . For Internal BioRad use ONLY! （十）其它的問題 … Lambda DNA 標準品 沒有清晰的條帶 ? 小片段部分模糊 /丟 失 Lambda ladder marker (λDNA）片段被另一堆 DNA 在 頂 部混淆 污 染了 . ? 如何修復 Lambda ladder marker : ? 在微型離心管內先加入 ml of x TBE ? 切小 塊 λDNA ，尺寸與 樣 品孔大小相似，放入含 TBE 的微型管內，確 認 膠 塊 浸在液體下面 ? 把微管放置在 45 186。C 水浴或加 熱 10分鐘 ? 再將微管放在冰上，直到加 樣 品孔中 For Internal BioRad use ONLY! （十）其它的問題 … 無法啟動電泳 或死機 (Unable to Start a Run) ? 儀 器 死機 . ? 在程序 設 置中的某一步停滯 ? 無法修復的 錯誤 重 設時間 ? 按住 ?,? 鍵 ，等待 儀 器 鳴 響 6 秒后，重啟 儀 器 For Internal BioRad use ONLY! PFGE技 術 的故障排除 … 參考儀器操作說明書的第 11章節(jié) For Internal BioRad use ONLY! Thank you! PFGE技 術 的故障排除 …
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1