舊版pfge脈沖場電泳技術(shù)培訓(xùn)4chef故障排除(存儲版)
【正文】 nternal BioRad use ONLY! （三）歪曲的條帶 (Distorted Bands) ? 小膠 塊 放入 樣 品孔 時 沒放均勻 穩(wěn) 妥。 這 種 現(xiàn) 象往往是看到在凝膠上端（靠近梳孔） 聚集著 DNA 樣 品，而泳道中既無條 帶 ，也沒拖尾 建 議 : 用同 樣 的 酶 消化另一膠 塊 ，確 認(rèn) 并不是先前的那 塊 有 問題 ，（如先前 實驗時 忘 記 加入 酶 ， 或沒有接觸到 酶 反 應(yīng) 液 如果仍然看到如此 現(xiàn) 象 時 ，可以幫助確定 該酶 與菌株的適用性 問題 For O26 single band was confirmed to be a valid pattern （六） 限制性核酸內(nèi)切 酶 步 驟 問題 Troubleshooting Restriction Steps For Internal BioRad use ONLY! SfiI NotI Lanes 2 – 4, 6 and 7 are smears caused by expired enzyme that did not cut DNA. The same plugs cut with NotI enzyme yielded distinct bands, indicating that the plugs were fine and smears were due to using expired enzyme. S = standard ?提示 : 如何判斷不完全 酶 切是由于 酶 或 buffer 質(zhì) 量造成的 ？ 采用另一種 酶 （以前 實驗 成功 驗證過 ）或同 樣 品種但不同批次的 酶 ， 對 同批 樣 品 進 行 酶 切 測試 ?加入 牛血清白蛋白 (BSA) ，即使 該酶 的供 應(yīng) 沒有提及。C 水浴或加 熱 10分鐘 ? 再將微管放在冰上，直到加 樣 品孔中 For Internal BioRad use ONLY! （十）其它的問題 … 無法啟動電泳 或死機 (Unable to Start a Run) ? 儀 器 死機 . ? 在程序 設(shè) 置中的某一步停滯 ? 無法修復(fù)的 錯誤 重 設(shè)時間 ? 按住 ?,? 鍵 ，等待 儀 器 鳴 響 6 秒后，重啟 儀 器 For Internal BioRad use ONLY! PFGE技 術(shù) 的故障排除 … 參考儀器操作說明書的第 11章節(jié) For Internal BioRad use ONLY! Thank you! PFGE技 術(shù) 的故障排除 … 。因 為 multistate 模式要求 輸 入與垂直方向的 夾 角，一 Samples are not going in the correct direction in the CHEF Mapper, the problem may be a programming error while in the MultiState mode. The multistate mode will ask for an angle from the vertical, rather than the included angle. So, for example, the researcher mistakenly programs in 120 degrees, then the sample will run in the wrong direction at a 30 degree angle. For Internal BioRad use ONLY! （四） 樣品遷移方向錯誤 Samples Migrate to the Wrong Direction ? 樣 品條 帶 整體 偏向左 側(cè) 或右 側(cè) ， 可能的原因： ? 電 極斷裂 Broken electrode or electrodes. ? 某 對電 極的 電 位有差異 ? 電 泳槽的 電 子部分由 問題 ，比如，在槽蓋的 電 插座上未 連接通，靠 這 部分通路 連 接主機 電 源部分 ? 建 議 ? 測 量 電 極 對 的 電壓 /電 流 （拆 、揭開 電 泳槽面 , 24對電線 ） For Internal BioRad use ONLY! （四） 樣品遷移方向錯誤 條帶傾斜 For Internal BioRad use ONLY! （四） 樣品遷移方向錯誤 Samples Migrate to the Wrong Direction For Internal BioRad use ONLY! Top of gel (wells) Bottom of gel Ladders （四） 樣 品遷移方向 錯誤 Samples Migrate to the Wrong Direction For Internal BioRad use ONLY! （四） 樣 品遷移方向 錯誤 Samples Migrate to the Wrong Direction ?
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