【正文】 動，因此速度較快而首先流出層析柱。相反，分子量較小的物質(zhì)可以自由地進出凝膠網(wǎng)孔，它們不斷地在凝膠顆粒之中來回流動，從而導致進出速度下降。 （ 2）常用的凝膠層析材料 ? （ 1）葡聚糖凝膠， ? （ 2）聚丙烯酰胺凝膠。 ?AM901 型凝膠層析儀 （ 3）凝膠層析的應用價值 ? （ 1）可用于分離和提純蛋白質(zhì)、酶、多肽、激素、多糖、核酸等物質(zhì)。能徹底分離分子量相差只有 25%的二種蛋白質(zhì)。 ? （ 2）凝膠層析具有設(shè)備簡單、分離迅速、不影響產(chǎn)物的分子生物學特性等優(yōu)點。 親和層析法 ? 是利用生物分子之間所具有的專一親和力而設(shè)計出的一種層析方法。 ? （ 1）親和層析的原理 ? （ 2）親和層析的例子 （ 1）親和層析的原理 ? （ 1）載體活化 將載體在堿性條件下用溴化氫（ CNBr）進行活化。 （ 2）通過偶聯(lián)反應制成親的吸附劑 將某一種能夠與生物分子進行可逆性結(jié)合的物質(zhì)（稱作配基）通過偶聯(lián)反應聯(lián)結(jié)到載體上， （ 3）含有生物分子的樣品通過層析柱。 （ 4）生物分子與配基結(jié)合而被吸附， （ 5）未能進行特異性結(jié)合的其它雜蛋白，通過洗滌而流出層析柱。 （ 2）親和層析的例子 ? 層析目的 分離 DNA解聚酶 ? 層析方法 以珠狀的瓊脂糖、或者聚丙烯酰胺作為載體，以 DNA解聚酶的抑制物作為配基 ? 層析結(jié)果 （ 1） DNA解聚酶被特異性地結(jié)合在層析柱上， （ 2）其它物質(zhì)全部流出 （ 3）最后用適當?shù)南疵撘和ㄟ^層析柱，可獲得純度極高的 DNA解聚酶 九：干燥技術(shù) ? 干燥操作往往是生物產(chǎn)品生產(chǎn)的最后一步，干燥的目的就在于除去物料中的水分，便于保藏和運輸。 ? 干燥注意事項 由于生物產(chǎn)品多數(shù)為熱敏性物質(zhì)，所以干燥過程必須注意使用那些干燥時間不太長、干燥溫度不過高的設(shè)備。 ? 干燥技術(shù)和設(shè)備 ? （一）噴霧干燥 ? （二）氣流干燥 ? （三）沸騰干燥 ? （四）鼓式干燥 ? （五）冷凍干燥 （一）噴霧干燥 ? 噴霧干燥是利用不同的噴霧裝置，如噴嘴、或者轉(zhuǎn)盤，將濃縮液或者懸浮液噴成霧狀，使它們形成具有極大表面積的分散液滴，在干燥室內(nèi)緩緩沉降，并與熱空氣流發(fā)生強烈的熱交換，在幾秒到幾十秒之內(nèi)得到迅速干燥的方法。 ? 噴霧干燥由于干燥時間極短、避免了生物產(chǎn)品活性的破壞，適用于抗生素、酶制劑、熱不穩(wěn)定性蛋白質(zhì)的干燥。 ?高速離心噴霧干燥機 （二）氣流干燥 ? 是利用顆粒在氣流中能夠自由流動的特性，使物料與氣流一起流經(jīng)一段長的管道，顆粒物料在與氣流一起流動的過程中，水分得到迅速汽化，因此，等到到達干燥管道出口處時，顆粒物料已經(jīng)被干燥。 ?PG系列氣流干燥機 （三）沸騰干燥 ? 是利用流態(tài)化技術(shù)，被干燥物料由最上層逐層往下移動，而熱空氣則自下而上，與物料呈現(xiàn)逆向流動，在每層面上，使物料呈現(xiàn)出“沸騰狀態(tài)?！狈Q為沸騰干燥法。 ? 沸騰干燥的缺點 （ 1）干燥時間過短，則干燥不透。 （ 2）干燥時間過長，則生物產(chǎn)品的活性遭到破壞。 ?GFG型高效沸騰干燥機 （四）鼓式干燥 ? 這種干燥器有二個相向轉(zhuǎn)動的鼓，鼓內(nèi)通入熱空氣，當溶液被加入到鼓面上流動時，就得到了汽化。最后，干燥的物料由刮刀刮下。 ? 鼓式干燥的應用范圍 只能對那些熱穩(wěn)定性良好的藥物進行干燥。 ?HZG型直接加熱式回轉(zhuǎn)滾筒干燥機 （五）冷凍干燥 ? 基本原理 ? 冷凍干燥的程序 ? 冷凍干燥的應用 ? 冷凍干燥的設(shè)備 基本原理 ? 又稱升華干燥。將濕的物料在 50℃ 到 10℃ 之間凍結(jié)成固態(tài)，然后在高真空（ 、 1mmHg=）條件下，將其中的水分直接升華成氣態(tài)，從而達到脫水、干燥的目的。 冷凍干燥的程序 ? （ 1）凍結(jié) 一般生物制品的共晶點在 20℃ ，因此，通常將制品凍結(jié)在 35℃ 到 40℃ 之間。再維持 1— 2小時，以保證凍結(jié)完全徹底。 ? （ 2）升華 在低溫 30℃ 到 10℃ 之間，利用高真空度（ — 30Pa）時，將溶劑變成氣體直接用真空泵抽走。通過升華過程，可驅(qū)除制品中 90%的水分。 ? （ 3）再干燥 將游離的冰晶升華完成之后，繼續(xù)對制品進行加熱，以驅(qū)除殘余的水分。 冷凍干燥的應用 ? 冷凍干燥法由于處理溫度較低，對于熱敏性物質(zhì)的處理特別有利。 ? 適宜于抗生素、維生素的干燥。 ?SZG系列雙錐回轉(zhuǎn)真空干燥機 冷凍干燥的設(shè)備 ? （ 1）大規(guī)模生產(chǎn)設(shè)備由低溫干燥箱 +冷凍機 +真空泵所構(gòu)成。 ? （ 2）小批量試制時可以在玻璃質(zhì)冷凍干燥器中進行。將樣品置于培養(yǎng)皿中，厚度不超過 1cm，在冰箱中凍成硬塊，再放入裝有 P2O5或者硅膠吸水劑的真空干燥器中，連續(xù)抽真空，來達到濃縮、干燥的目的。 第二節(jié)：利用微生物進行藥物的生產(chǎn)實例 ? 一：抗生素類 ? 二：氨基酸類 ? 三：維生素類 ? 四：其它有機物與醫(yī)藥中間體 一：抗生素類 ? （一）、抗生素的分類 ? （二）發(fā)酵法可以生產(chǎn)的種類 ? （三）生產(chǎn)和制造實例 ?抗生素瓶洗烘灌塞生產(chǎn)聯(lián)動線 （一）、抗生素的分類 ? 按進行生產(chǎn)的微生物母體分 ? （ 1）由細菌生產(chǎn)的抗生素 短桿菌肽，短桿菌肽 S、桿菌肽、多粘菌素 B。 ? （ 2）由霉菌生產(chǎn)的抗生素 青霉素、灰黃霉素、甾酸菌素。 ? （ 3）由放線菌生產(chǎn)的抗生素 鏈霉素、氯霉素、金霉素、四環(huán)素、紅霉素、螺旋霉素、利福霉素、卡那霉素、交沙霉素、麥迪加霉素。 按化學結(jié)構(gòu)分 （ 1） β 內(nèi)酰胺類抗生素 青霉素類、頭孢菌素類。 （ 2）氨基糖苷類 鏈霉素、新霉素、卡那霉素、慶大霉素。 （ 3）大環(huán)內(nèi)酯類 紅霉素、竹桃霉素、麥迪加霉素、制霉菌素。 （ 4）四環(huán)素類 土霉素、金霉素、四環(huán)素。 （ 5）多肽類 桿菌肽、多粘菌素 B （二）發(fā)酵法可以生產(chǎn)的種類 ? （ 1）青霉素 （ 2）頭孢菌素 （ 3）鏈霉素 （ 4）卡那霉素 （ 5）慶大霉素 （ 6）紅霉素 （ 7）羅紅霉素 （ 8）麥迪霉素 （ 9）乙酰螺旋霉素 （ 10）四環(huán)素 （ 11）土霉素（氧四環(huán)素） （ 12）金霉素（氯四環(huán)素） （ 13）林可霉素 （ 14）多粘菌素 （ 15）桿菌肽 （三）生產(chǎn)和制造實例 ? 青霉素（在前面已經(jīng)講解） ? 鏈霉素 鏈霉素 ? （ 1）生產(chǎn)準備 （ 2）工藝流程 （ 3）生產(chǎn)細則 （ 1）生產(chǎn)準備 ? 生產(chǎn)用菌種 鏈霉菌、小單孢菌 ? 原始材料 氨基酸、酵母 ? 培養(yǎng)基 黃豆餅粉、糊精、淀粉、葡萄糖、碳酸鈣、微量元素。 [2]工藝流程 ? 菌種 ↓ 斜面培養(yǎng) 斜面種子 ↓ 搖瓶培養(yǎng) 搖瓶種子 ↓ 種子罐培養(yǎng) 23級 種子培養(yǎng)液 ↓ 發(fā)酵罐培養(yǎng) 發(fā)酵液 ↓ 過濾 濾液 ↓ 陽離子交換樹脂進行吸附交換 飽和樹脂 ↓ 洗脫 洗脫液 ↓ 脫色、脫鹽、濃縮 成品濃縮液 ↓ 無菌過濾、干燥 成品 （ 3）生產(chǎn)細則 ? （ 1）發(fā)酵溫度 2528℃ 。 ? （ 2）采用間隙補料、或者流加補料的工藝。 ? （ 3）發(fā)酵 57天。 ? （ 4）板框過濾 離心分離 離子交換精制 噴霧干燥。 2：氨基酸類 ? （ 1） L賴氨酸 ? （ 2） L蘇氨酸 ? （ 3） L苯丙氨酸 ? （ 4） L異亮氨酸 ? （ 5） L亮氨酸 ? （ 6） L纈氨酸 ? （ 7） L組氨酸 3：維生素類 ? （ 1） VC ? （ 2） VA ? （ 3） VD2 ? （ 4） VD3 ? （ 5） VB1 ? （ 6） VB2 ? （ 7） VB12 ? （ 8） VE 4：其它有機物與醫(yī)藥中間體 ? （ 1）檸檬酸 ? （ 2）乳酸 ? （ 3）葡萄糖酸 ? （ 4）醋酸 ? （ 5）乙醇 ? （ 6）丙酮 ? （ 7）甘油