大規(guī)模細胞培養(yǎng)及發(fā)酵技術(shù)-資料下載頁
2025-05-14 23:56本頁面
【正文】 速率 (補料 ). ? 維持培養(yǎng)液中低的谷氨酰銨濃度減少其轉(zhuǎn)化和降解 . ? 在低的 pH培養(yǎng)減少 NH3形成 . ? 去除培養(yǎng)液中的銨 : – 酶轉(zhuǎn)化 – 通過特殊的 “PTFE” 膜將 NH3 擴散到低 pH 溶液中 ? 使用能夠逐步接受高 NH3 濃度的細胞 谷氨酰胺 ? 與葡萄糖一樣 , 谷氨酰胺也是細胞的主要物質(zhì) : * 碳和氮 * 能量 ? 谷氨酰胺通常被認為是細胞培養(yǎng)的主要限制營養(yǎng) – 谷氨酰胺是生物合成的前體物質(zhì) : * 嘌呤 * 嘌呤核苷 – 谷氨酰胺是合成嘧啶，氨基糖和天冬的主要氨基受體 谷氨酰胺 ? 監(jiān)控谷氨酰胺的水平 : – 確保細胞生長所需的能量 . ? 開發(fā)長時間細胞培養(yǎng)標準化補料策略 . ? 計算谷氨酰胺的消耗速率和決定批次培養(yǎng)最佳的其始濃度 . 谷氨酸 ? 需用來計算谷氨酰胺 – 需確證谷氨酸 的濃度，確保沒加進谷氨酰胺結(jié)果 . ? 谷氨酰胺的降解產(chǎn)物 Na/K NaK: – 對合適培養(yǎng)基生產(chǎn)很重要 . – 維持溶液 /培養(yǎng)基合適的離子強度 . 滲透壓 ? 滲透壓是溶液濃度的一個反應 : – 測定滲透壓的參考方法是使用滲透壓計 – 典型細胞培養(yǎng)液滲透壓值 : 300 +/30 mOsmol/kg. ? 滲透壓升高 50100 mOsmol/kg 會明顯影響某些細胞的生長 . ? 某些溶液 /化合物可作為滲透壓的保護劑 (維持滲透壓穩(wěn)定和更低 ). 這些物質(zhì) : – 甘氨酸，肌氨酸，脯氨酸 滲透壓 ? 用于對引進的培養(yǎng)基進行質(zhì)量控制 ? 關(guān)聯(lián)滲透壓與細胞數(shù)、細胞活性和產(chǎn)量的關(guān)系 ? 監(jiān)控連續(xù)補加營養(yǎng)引起滲透壓的增加 細胞密度 ? 細胞密度通常等于 “生物量” – 它是指給定體積的細胞數(shù)，可以是體積濃度或百分比濃度 . – 它不是指活細胞數(shù)量 (但可很好顯示細胞活力） ? 細胞活力 /活性測定取決于細胞的種類、細胞生命周期及膜的結(jié)構(gòu) . ? “活性取決于你怎樣定義細胞 .” 細胞密度 ? 細胞密度不意味著終產(chǎn)物量或生產(chǎn)率 – 它顯示 ?細胞體積 /數(shù)量’ , 但不能體現(xiàn) : ? 是否細胞是正確細胞 . ? 是否終產(chǎn)物是由細胞產(chǎn)生 . ? 是否所有的細胞是活的 . ? 在細胞中的終產(chǎn)物的量 .
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