大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)及發(fā)酵技術(shù)-展示頁
2025-05-26 23:56本頁面
【正文】 重要參數(shù) ? NH4+ ? K+/Na+ ? Ca++ ? 滲透壓 ? 細(xì)胞密度 動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)存在的問題 ? 細(xì)胞凋亡 ? 細(xì)胞在高密度條件下，由于細(xì)胞的多層生長，存在細(xì)胞接觸抑制效應(yīng)，細(xì)胞的生長和表達(dá)均受到嚴(yán)重影響 動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)存在的問題 ? 細(xì)胞凋亡主要是細(xì)胞生長的條件較惡劣，包括： 細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的應(yīng)用 ? 生產(chǎn)疫苗 ? 蛋白質(zhì)和多肽藥物 ? 基因治療 ? 單抗 微生物培養(yǎng)技術(shù) 概述 傳統(tǒng)：釀酒、抗生素、制醋 基因工程：生產(chǎn)蛋白質(zhì)藥物、疫苗等（大腸桿菌、酵母） 一般采用高密度發(fā)酵技術(shù) 微生物培養(yǎng) 培養(yǎng)過程決定于： ? 菌種 ? 培養(yǎng)條件 微生物培養(yǎng)過程重要參數(shù)： ? 溫度 ? pH ? 溶氧 ? 葡萄糖 /甘油 ? 乙酸 ? 乳酸 ? NH4+ ? 磷酸鹽 ? 乙醇 (酵母 ) ? 甲醇 (酵母 ) ? 細(xì)胞密度 微生物高密度培養(yǎng) 發(fā)酵培養(yǎng)基 表達(dá)基因的調(diào)控 宿主菌 質(zhì)粒的拷貝數(shù)及穩(wěn)定性 高密度培養(yǎng)的關(guān)鍵是發(fā)酵的補(bǔ)料控制 ,根據(jù)重組菌的生長特點(diǎn)及產(chǎn)物的表達(dá)方式采取合理的營養(yǎng)物質(zhì)的流加方式 ? 恒速流加 ? 變速流加 ? 指數(shù)流加 微生物高密度培養(yǎng)乙酸的形成 :培養(yǎng)液中葡萄糖的含量超過菌體生長所需量或在缺氧的情況下 ,便會大量產(chǎn)生乙酸 . 減少乙酸的策略 : ? 限制性流加葡萄糖 ? 甘油代替葡萄糖 ? 降低培養(yǎng)溫度 ? 宿主菌 ? 降低比生長速率 ? 透析培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng)和微生物發(fā)酵中的重要參數(shù) 了解生物技術(shù)的應(yīng)用 pH ? 不同的細(xì)胞具有不同最佳 pH范圍 ? pH 能影響葡萄糖和谷氨酰胺的代謝，在低 pH條件下，葡萄糖消耗速度慢 ? pH能影響細(xì)胞的生長和目標(biāo)產(chǎn)物的量 E f f e c t s o f p H o n I g GP r o d u c t i o n010203040 7 p H U n i t slog H+CO2 ? 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中， CO2 與碳酸氫鹽形成緩沖對，穩(wěn)定培養(yǎng)液中的 pH
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