細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)入門-展示頁
2024-11-23 05:45本頁面
【正文】 同品質(zhì)進(jìn)行如下的處理程序： 1 . 針式濾器帽不能泡酸液 ,用 NaOH 泡 612 小時(shí) ,或者煮沸 20分鐘 ,在包裝之前要裝好濾膜兩張，安裝濾膜時(shí)注意光面朝上 (凹向上 )，然后將螺旋稍微擰松一些，放入鋁盒中在高壓鍋內(nèi) 15 磅 30 分鐘消毒，再烘干備用。金屬器械洗消： 金屬器皿不能泡酸，洗消時(shí)可先用洗滌劑刷洗，后用自來水沖干凈，然后用 75％酒精擦拭，再用自來水，然后用蒸餾水沖洗，再烘干或空氣中晾干。 ：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)，蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，隨著溫度的上升安全閥冒出蒸氣，當(dāng)蒸氣成直線冒出 35 分鐘后，關(guān)閉安全閥，氣壓表指數(shù)隨之上升，當(dāng)指針指向 15 磅時(shí)，調(diào)節(jié)電開關(guān)維持 2030 分鐘即可。 、清洗：烘干后泡入清潔液（酸液）， 12 小時(shí)后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗（避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗），再用蒸餾水沖洗 3 次。 ：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí)，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向 15 磅時(shí)，維持 2030 分鐘。 、清洗：用清潔液（重鉻酸鉀 120g：濃硫酸 200ml：蒸餾水 1000ml）浸泡 12 小時(shí)，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗 15 次，最后蒸餾水沖洗 35 次和用雙蒸水過 3 次。 、泡鹽酸：烤箱中烘干，然后再浸入 5％稀鹽酸中 12 小時(shí)以除去臟物、鉛、砷等物。 ，防止交叉污染。 ，動(dòng)作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。 無菌操作的演示： 、 PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用 75％酒精擦拭瓶子的外表面 。 實(shí)驗(yàn)人員的無菌準(zhǔn)備： 。 無菌操作 無菌室的滅菌： ：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等，然后用 3‰ 來蘇爾或者新潔爾滅或者 ％過氧乙酸擦拭。 培養(yǎng)室的設(shè)備： 液氮罐、儲(chǔ)品柜（存放雜物）、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱（ 80℃ ）、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)（書寫實(shí)驗(yàn)記錄）。細(xì)胞培養(yǎng)從頭學(xué) 從最基礎(chǔ)的地方教起，一步一步詳細(xì)介紹細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，非常好的開門教程 常用設(shè)備 準(zhǔn)備室的設(shè)備： 單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜（放置未消毒物品）、儲(chǔ)品規(guī)（放置消毒過的物品）、包裝臺(tái)。配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平（稱量藥品）、 PH 計(jì)（測(cè)量培養(yǎng)用液 PH 值）、磁力攪拌器（配置溶液室攪拌溶液）。必須放在無菌間的設(shè)備：離心機(jī)（收集細(xì) 胞）、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2 孵箱（孵育培養(yǎng)物）、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、 4℃ 冰箱（放置 serum 和培養(yǎng)用液）。 孵箱（培養(yǎng)箱）滅菌：先用 3‰ 新潔爾滅擦拭，然后用 75％酒精擦拭或者 ％過氧乙酸，再用紫外燈照射 ：打開紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各 2030分鐘 ：用 75％酒精（ 3‰ 新潔爾滅）擦拭超凈臺(tái)、 邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái)。 、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋 75％酒精棉球擦凈雙手。 （如瓶蓋、滴管）要放在高處，使用時(shí)仍要過火。如吸管不能碰到廢液缸。 器械 的清洗和消毒 玻璃器械洗消： 一、新的玻璃器皿的洗消： ，除去灰塵。 、烘干： 12 小時(shí)后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干。 、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙（油光紙）包裝。 二、舊的玻璃器皿的洗消： 1．刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液（洗滌劑）的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。 、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙（油光紙）等包裝， 以便于消毒儲(chǔ)存及防止灰塵和再次被污染。（玻璃培養(yǎng)瓶消毒前可將膠帽輕輕蓋上） ：因?yàn)楦邏合竞笃髅髸?huì)被蒸氣打濕，所以要放入烤箱內(nèi)烘干備用。 放入鋁制盒內(nèi)包裝好在高壓鍋內(nèi) 15 磅高壓（ 30 分鐘）消毒，
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