細胞培養(yǎng)知識-展示頁
2025-08-14 10:10本頁面
【正文】 括其它一些成分。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH 指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2 體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2 濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。成纖維細胞喜歡較高pH ( ), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH ( )。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細胞所需pH 在 。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細胞通?？赡褪?60mOsm/kg ～320 mOsm/kg。無機鹽培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。碳水化合物碳水化合物是細胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應置于20℃冰箱中保存，在使用前加入培養(yǎng)液內。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。合成培養(yǎng)基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質：氨基酸氨基酸是組成蛋白質的基本單位。細胞培養(yǎng)基種類與基本成分細胞培養(yǎng)基的種類很多，按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基（目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基），按其物質狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。恒定的細胞生長溫度維持培養(yǎng)細胞旺盛生長，必須有恒定適宜的溫度。在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質污染，或者自身代謝物質積累，可導致細胞中毒死亡。血清是細胞培養(yǎng)液中最重要的成分之一，含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。細胞培養(yǎng)基礎知識 細胞培養(yǎng)基本條件合適的細胞培養(yǎng)基合適的細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。優(yōu)質血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。無菌無毒細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。因此，在體外培養(yǎng)細胞時，必須保持細胞生存環(huán)境無菌無毒，及時清除細胞代謝產物。合適的氣體環(huán)境氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌，液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供，用戶可直接使用，非常方便。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細胞自身不能合成，必須依靠培養(yǎng)液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。因此，各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2 周以上時，還應重新加入原來量的谷氨酰胺。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細胞調節(jié)細胞膜功能。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內波動。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時需按以下方法調節(jié)鈉離子濃度。但是，細胞培養(yǎng)最適pH 值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2 濃度設定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3 ；如果CO2 濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3 。HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。在這種培養(yǎng)條件下，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。維生素在細胞培養(yǎng)中，盡管血清是維生素重要來源， 但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合
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