【正文】 入無(wú)血清培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基可以消除來(lái)自血清的不均一性。隨后的其他配方如N1N3則含有較低濃度的轉(zhuǎn)鐵蛋白。它的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、黃體酮、腐胺和硒。 三、無(wú)血清培養(yǎng)基 1979年神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)了一個(gè)重要進(jìn)展，用化學(xué)添加劑即可維持神經(jīng)細(xì)胞存活與生長(zhǎng)而不需要在培養(yǎng)基中添加血清。 血清的不同批號(hào)含有不同的成分，所以許多人發(fā)現(xiàn)，應(yīng)該在使用前對(duì)血清進(jìn)行測(cè)試。然而，很多人也將胎牛血清用于神經(jīng)元培養(yǎng)，也有人用馬血清來(lái)培養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞。胎牛血清中富含有絲分裂因子，常選其作增殖細(xì)胞用的血清，也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)?；A(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清，血清終濃度多為5~20%。 RT Dulbecco’s PBS Metal Salt Solution 0591410ml ( for 1L) Nissui RT Glutamine (、凍干的谷氨酰胺) Nissui 溶液用于高壓滅菌的無(wú)L谷氨酸培養(yǎng)基的補(bǔ)充物，如Eagle’s MEM。 RT Hanks’ Solution ② 05906100g Nissui 不含酚紅、碳酸氫鈉。 RT Earle’s Solution 05907100g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。低蛋白含量，使得后期對(duì)細(xì)胞產(chǎn)物如單克隆抗體和生物活性物質(zhì)的收集和純化更加便利。SFM101是一種無(wú)血培養(yǎng)基，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)和幫助小鼠雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體作用顯著。用于懸浮培養(yǎng)。特別適用于HeLa、L或其他細(xì)胞系的培養(yǎng)。該培養(yǎng)基加入1％胎牛血清培養(yǎng)CHO細(xì)胞的效果等同于αMEM加入5％胎牛血清。 RT UC Medium 202 05923103g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。由于是無(wú)血清配方，減少了牛血清各批次間成分不同而對(duì)試驗(yàn)的干擾。該培養(yǎng)基能克服一般RPMI 1640 培養(yǎng)基只能膜過(guò)濾除菌而難以除去諸如支原體的缺點(diǎn)，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠和人的白血病細(xì)胞、各種細(xì)胞系和KATOIII細(xì)胞株能顯著增強(qiáng)它們的活性。 0687500g ( for 1L) Nissui 不含L谷氨酸、碳酸氫鈉。用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。 RT RPMI 1640 Medium ① 0684100g 。 0681500g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。該培養(yǎng)基用于克隆哺乳動(dòng)物細(xì)胞的增殖，特別用于中國(guó)田鼠細(xì)胞。該培養(yǎng)基比Eagle’s MEM多添加了7種氨基酸、丙酮酸鈉和維生素B12。 RT ES Medium 05971100g ( for 1L) Nissui 含有卡那霉素，不含L谷氨酸、碳酸氫鈉。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。 RT Eagle’s MEM ④ 05903100g ( for 1L) Nissui 含有卡那霉素，不含L谷氨酸、碳酸氫鈉。 RT Eagle’s MEM ③ 05902100g ( for 1L) Nissui 不含卡那霉素、酚紅、L谷氨酸、碳酸氫鈉。 RT Eagle’s MEM ② 05901100g ( for 1L) Nissui 含有卡那霉素，不含酚紅、L谷氨酸、碳酸氫鈉。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。trade05900100g 。021502729776221 13788987962 RT Eagle’s MEM ①該培養(yǎng)基比Eagle’s MEM氨基酸濃度多2倍、維生素濃度多4倍，并含有甘氨酸、L絲氨酸、丙酮酸鹽和微量鐵離子。 RT Dulbecco’s Modified Eagle Medium ② 05919100g ( for 1L) Nissui 不含L谷氨酸、碳酸氫鈉。該培養(yǎng)基比Eagle’s MEM氨基酸濃度多2倍、維生素濃度多4倍，并含有甘氨酸、L絲氨酸、丙酮酸鹽和微量鐵離子。 RT Dulbecco’s Modified Eagle Medium ① 0688100g 。該培養(yǎng)基比Eagle’s MEM多8種氨基酸、4種維生素、丙酮酸、4種核苷、4種脫氧核苷。 L15培養(yǎng)基已用來(lái)成功的培養(yǎng)了外周神經(jīng)元，但尚未在CNS神經(jīng)元的發(fā)育研究中全面檢測(cè)過(guò)。Leiboviz`s L15培養(yǎng)基可用來(lái)在大氣環(huán)境中令神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)，該培養(yǎng)基采用了與眾不同的BSS作基礎(chǔ)，它含有高濃度的氨基酸來(lái)提高緩沖能力，培養(yǎng)基中使用半乳糖作碳源，以阻止培養(yǎng)基中乳酸形成，少量溶解的CO2由丙酮酸代謝產(chǎn)生。實(shí)際操作中并非如此簡(jiǎn)單。這些基礎(chǔ)培養(yǎng)基的組成成分是建立在對(duì)不同細(xì)胞系生長(zhǎng)的研究之上的，但通常在原代培養(yǎng)中使用也能有比較令人滿意的結(jié)果。%或者加入丙酮酸（若培養(yǎng)基中這兩種物質(zhì)缺乏時(shí)）。F12中含有硫酸亞鐵，據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。選擇某種培養(yǎng)基，應(yīng)仔細(xì)了解成分表，應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)最通用的培養(yǎng)基。最廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。細(xì)胞培養(yǎng)基的分類(lèi)培養(yǎng)細(xì)胞的完全培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如MEM）和添加劑（如血清或無(wú)血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長(zhǎng)因子）組成，培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn)，其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。 一、基礎(chǔ)培養(yǎng)基 絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無(wú)機(jī)鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長(zhǎng)的細(xì)胞，同MEM含有相同的營(yíng)養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。例如，有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有谷氨酸，而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域，但它對(duì)某些對(duì)谷氨酸敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言，則并非最佳選擇，特別是如果神經(jīng)元生長(zhǎng)在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。 在所有這些培養(yǎng)基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的濃度，這是因?yàn)樗哂胁环€(wěn)定性以及在許多細(xì)胞培養(yǎng)中它常用作碳源。MEM與F12均要用5%的CO2來(lái)平衡，DMEM含更高濃度的NaCO3，要用10%的CO2來(lái)平衡，當(dāng)然也可以在較低CO2濃度下使用。 原則上，HEPES作為緩沖劑可用來(lái)代替碳酸氫鹽，以解除需要高濃度CO2培養(yǎng)環(huán)境的限制。顯然，溶解的CO2與碳酸氫鹽對(duì)良好的細(xì)胞生長(zhǎng)是重要的。這一培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)是明顯的，特別是在保持較高CO2有困難時(shí)，例如在長(zhǎng)時(shí)間的顯微操作及生理學(xué)研究中。 (日水培養(yǎng)基 NISSUIMEM 細(xì)胞培養(yǎng) 原代傳遞用組織(細(xì)胞)培養(yǎng)產(chǎn)品 αMEM ①05921102g ( for 1L) Nissui 含核（糖核）苷、脫氧核（糖核）苷，不含碳酸氫鈉。 RT αMEM ② 05922101g ( for 1L) Nissui 不含核（糖核）苷、脫氧核（糖核）苷、碳酸氫鈉。 0316500g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。該培養(yǎng)基廣泛用于病毒研究、原生細(xì)胞、單細(xì)胞培養(yǎng)。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。該培養(yǎng)基廣泛用于病毒研究、原生細(xì)胞、單細(xì)胞培養(yǎng)。 00680500g ( for 1L) Nissui 含有卡那霉素，不含L谷氨酸、碳酸氫鈉。特別有助于HeLa、L和其他細(xì)胞系的生長(zhǎng)。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。用于懸浮培養(yǎng)。 RT Eagle’s MEM Amino Acids and Vitamins Medium 0590420g ( for 1L) Nissui 該培養(yǎng)基用作25倍濃縮液，加熱至37℃并溶解，可用于少數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、在半固態(tài)瓊脂上形成細(xì)胞群落或斑塊。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。 RT Ham’s F12 Medium 05910100g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。 RT Medium 199 0683100g 。該培養(yǎng)基不能增殖細(xì)胞，但能用于病毒學(xué)研究中的細(xì)胞培養(yǎng)，并且可用于生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎疫苗。 0682500g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。 RT RPMI 1640 Medium ② 0689100g 。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。 RT SFM101 05963基礎(chǔ)培養(yǎng)基 1 / 補(bǔ)充物A 110ml(凍干) / 補(bǔ)充物B 15ml ( for 1L) Nissui SFM101是一種無(wú)血培養(yǎng)基，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)和幫助小鼠雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體作用顯著。低蛋白含量，使得后期對(duì)細(xì)胞產(chǎn)物如單克隆抗體和生物活性物質(zhì)的收集和純化更加便利。UC Medium 202是培養(yǎng)CHO細(xì)胞的低濃度血清培養(yǎng)基，用于細(xì)胞增殖和生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物。 RT Eagle’s MEM Liquid 06650500ml Nissui 含卡那霉素、L谷氨酸、碳酸氫鈉。 RT RPMI 1640 Liquid 06652500ml Nissui 含L谷氨酸、碳酸氫鈉。 RT SFM101 Liquid 06654500ml Nissui 即用型培養(yǎng)基，無(wú)須添加其他物質(zhì)。由于是無(wú)血清配方，減少了牛血清各批次間成分不同而對(duì)試驗(yàn)的干擾。 RT Dulbecco’s PBS㈠ 05913100g ( for 1L) Nissui 能高壓滅菌（121℃，15分鐘）或膜過(guò)濾滅菌。 RT Hanks’ Solution ① 05905100g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。用于免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、透析或其他。 RT )二、血清 細(xì)胞在單純的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不能存活，在特殊類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)中必須提供某些痕量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生長(zhǎng)因子才能使細(xì)胞得以生長(zhǎng)并維持生長(zhǎng)狀態(tài)。特殊用途的血清來(lái)源須用經(jīng)驗(yàn)確定，廣泛應(yīng)用的血清種類(lèi)有馬血清與胎牛血清。而馬血清常常用來(lái)作有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。用大鼠進(jìn)行神經(jīng)元培養(yǎng)的某些研究者喜歡使用同型血清；人類(lèi)的胎盤(pán)血清，亦曾用于神經(jīng)組織的器官類(lèi)型的培養(yǎng)，也用在一些特殊培養(yǎng)種類(lèi)中。大多數(shù)試劑商提供樣品，所滿意的批號(hào)即可選用，這樣可以一次得到足夠一年用量的血清，血清在使用前通常在56℃加熱30分鐘，這一過(guò)程稱為滅活。其工作基礎(chǔ)是用合適的激素、營(yíng)養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，最后找到了適合大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)的試劑配方，該配方稱為N2，專(zhuān)門(mén)用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)，最早是用在B104大鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系的培養(yǎng)。胰島素和胰島素樣生長(zhǎng)因子對(duì)于大多數(shù)類(lèi)型細(xì)胞的存活和生長(zhǎng)有重要作用，硒是谷胱甘肽產(chǎn)生的合作因子，可能有助于過(guò)氧化物和超氧化物的水解，有報(bào)道說(shuō)還能防止細(xì)胞的光照損傷。 未料到的是上述配方構(gòu)成的培養(yǎng)基可以支持神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞