【正文】 液肉湯()　　 1000mL　　瓊脂　　　　　　　　　17～20g制法：加熱溶化瓊脂，分裝燒瓶或試管，121℃高壓滅菌30min。25 肉浸液肉湯成分：　　絞碎牛肉　　　　　　　500g　　氯化鈉　　　　　　　　5g　　蛋白胨　　　　　　　　10g　　磷酸氫二鉀　　　　　　2g　　蒸餾水　　　　　　　　1000mL制法：將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g加蒸餾水1000mL，混合后放冰箱過夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。24 乳酸－苯酚溶液成分：　　苯酚　　　　　　　　　10g　　乳酸()　　　　10g　　甘油　　　　　　　　　20g　　蒸餾水　　　　　　　　10mL制法：將苯酚在水中加熱溶解，然后加入乳酸及甘油。分裝每瓶100mL或每管10mL，121℃高壓滅菌15min。22 磷酸鹽緩沖液儲(chǔ)存液　　磷酸二氫鉀　　　　　　　　34g　　1mol/L氫氧化鈉溶液　　　　175mL　　蒸餾水　　　　　　　　　　825mL　　　　制法：先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中，用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000mL。結(jié)果：陽性反應(yīng)，細(xì)菌變?yōu)楹诤稚?；陰性反?yīng)，細(xì)菌不變色。試驗(yàn)方法：挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加2%兒茶酚溶液1mL及3%過氧化氫溶液1mL。21 過氧化物酶試驗(yàn)試劑：2%兒茶酚溶液。試驗(yàn)方法：挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加3%過氧化氫溶液2mL，觀察結(jié)果。陽性培養(yǎng)物大多數(shù)于半分鐘內(nèi)出現(xiàn)強(qiáng)陽性反應(yīng)，2min以后出現(xiàn)微弱或可疑反應(yīng)均作為陰性結(jié)果。如系平板培養(yǎng)物，則可用試劑混合液滴在菌落上?！　?%α萘酚－乙醇溶液。如欲檢查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否未被分解，可再加入鋅粉少許，可使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽而呈現(xiàn)紅色。硝酸鹽還原為亞硝酸鹽時(shí)于立刻或數(shù)分鐘內(nèi)顯紅色。試驗(yàn)方法：接種后在36177。硝酸鹽還原試劑：　　甲液：。以毛細(xì)吸管吸取試劑，直接滴加于菌落上，其顯色反應(yīng)與以上相同。加鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液一滴，陽性者呈現(xiàn)粉紅色，并逐漸加深；再加α萘酚溶液一滴，陽性者于半分鐘內(nèi)呈現(xiàn)鮮藍(lán)色?！　　?%α萘酚－乙醇溶液。同時(shí)，將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對(duì)照培養(yǎng)基，分裝試管備用。放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻。尿素酶陽性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。試驗(yàn)方法：挑取瓊脂培養(yǎng)物接種，在36177。尿素的最終濃度為2%，177。121℃高壓滅菌15min。 15 尿素瓊脂成分：　　蛋白胨　　　　　　1g　　氯化鈉　　　　　　5g　　葡萄糖　　　　　　1g　　磷酸二氫鉀　　　　2g　　%酚紅溶液　　　3mL　　瓊脂　　　　　　　20g　　蒸餾水　　　　　　1000mL　　20%尿素溶液　　　 100mL　　177。產(chǎn)硫化氫者使培養(yǎng)基變?yōu)楹谏?。試?yàn)方法：挑取瓊脂培養(yǎng)物，沿管壁穿刺，于36177。每批蛋白胨買來后，應(yīng)先用已知菌種鑒定后方可使用。輕搖試管，陽性者于試劑層呈深紅色；或加入歐－，沿管壁流下，覆蓋于培養(yǎng)液表面，陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。試驗(yàn)方法：挑取小量培養(yǎng)物接種，在36177。歐－波試劑：將1g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi)。靛基質(zhì)試劑柯凡克試劑：將5g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中。對(duì)照管應(yīng)為黃色。氨基酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿，培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色。試驗(yàn)方法：從瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物接種，于36177。對(duì)照培養(yǎng)基不加氨基酸。12 氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基成分：　　蛋白胨　　　　　　　　　　5g　　酵母浸膏　　　　　　　　　3g　　葡萄糖　　　　　　　　　　1g　　蒸餾水　　　　　　　　　　1000mL　　%滇甲酚紫－乙醇溶液　　1mL　　L－氨基酸或DL－氨基酸　　 　　制法：除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100mL，分別加入各種氨基酸：賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸。1℃培養(yǎng)4h或18～24h?！　?1苯丙氨酸培養(yǎng)基成分：　　酵母浸膏　　　　　　　　　　　　　　　3g　　DI－苯丙氨酸(或L－苯丙氨酸1g)　　　 　2g　　磷酸氫二鈉　　　　　　　　　　　　　　1g　　氯化鈉　　　　　　　　　　　　　　　　5g　　瓊脂　　　　　　　　　　　　　　　　　12g　　蒸餾水　　　　　　　　　　　　　　　　1000mL制法：加熱溶解后分裝試管，121℃高壓滅菌15min，使成斜面。試驗(yàn)方法：用瓊脂培養(yǎng)物穿刺接種，放在22～25℃培養(yǎng)，每天觀察結(jié)果，記錄液化時(shí)間。10營養(yǎng)明膠成分：　　蛋白胨　　　　　5g　　牛肉膏　　　　　3g　　明膠　　　　　　120g　　蒸餾水　　　　　1000mL　　～制法：加熱溶解、～，分裝小管，121℃高壓滅菌10min，取出后迅速冷卻，使其凝固。經(jīng)離心沉淀，立即混合均勻，經(jīng)10～15min，觀察結(jié)果。6H2O)12g，溶于2%鹽酸溶液100mL中即成。以標(biāo)志管內(nèi)液面高度，高壓滅菌121℃20min。1℃培養(yǎng)?；靹蚝螅盅b試管，121℃高壓滅菌15min，直立凝固備用?！　?8 Hugh－Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗(yàn)用)成分：　　蛋白胨　　　　　　　　　　　　　　 2g　　氯化鈉　　　　　　　　　　　　　　 5g　　磷酸氫二鉀　　　　　　　　　　　　 　　瓊脂　　　　　　　　　　　　　　　 4g　　葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　 10g　　%溴麝香草酚藍(lán)溶液　　　　　　　 12mL　　蒸餾水　　　　　　　　　　　　　　 1000mL　　制法：將蛋白胨和鹽類加水溶解后。再用清水、蒸餾水沖洗干凈，并用新棉花做成棉塞，干熱滅菌后使用。如在葡萄糖銨斜面生長極微小的菌落可視為陰性結(jié)果。1℃培養(yǎng)24h。將接種環(huán)滅菌后挑取菌液接種，同時(shí)再以同法接種普通斜面一支作為對(duì)照。7H2O)　　　 　　　　　　磷酸二氫銨　　　　　　　　　　　　1g　　磷酸氫二鉀　　　　　　　　　　　　1g　　葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　2g　　瓊脂　　　　　　　　　　　　　　　20g　　蒸餾水　　　　　　　　　　　　　　1000mL　　%溴麝香草酚藍(lán)溶液　　　　　　　40mL　　制法：先將鹽類和糖溶解于水內(nèi)，校正pH，再加瓊脂，加熱溶化，然后加入指示劑，混合均勻后分裝試管，121℃高壓滅菌15min，放成斜面。陽性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色?！　≡囼?yàn)方法：用新鮮的瓊脂培養(yǎng)物接種，于36177。陽性者培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。試驗(yàn)方法：用瓊脂培養(yǎng)物接種整個(gè)斜面，在36177。　05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分：　　檸檬酸鈉　　　　　　　　　　　 3g　　葡萄糖　　　　　　　　　　　　 　　酵母浸膏　　　　　　　　　　　 　　單鹽酸半胱氨酸　　　　　　　　 　　磷酸二氫鉀　　　　　　　　　　 1g　　氯化鈉　　　　　　　　　　　　 5g　　%酚紅溶液　　　　　　　　　 6mL　　瓊脂　　　　　　　　　　　　　 15g　　蒸餾水　　　　　　　　　　　　 1000mL制法：加熱溶解，分裝試管，121℃高壓滅菌15min。陽性反應(yīng)立刻或于數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色，如為陰性，應(yīng)放在36177。哈夫尼亞菌則應(yīng)在22～25℃培養(yǎng)。V－P試驗(yàn)：用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36177。鮮紅色為陽性，黃色為陰性。1℃培養(yǎng)2～5d，哈夫尼亞菌則應(yīng)在22～25℃培養(yǎng)?！　?4 緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR和VP試驗(yàn)用)成分：　　磷酸氫二鉀　　5g　　多胨　　　　　7g　　葡萄糖　　　　　5g　　蒸餾水　　　　　1000mL　　制法：溶化后校正pH，分裝試管，每管1mL，121℃高壓滅菌15min。1℃培養(yǎng)4d，每天觀察結(jié)果。放成斜面。7H2O)　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　磷酸二氫銨　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　1g　　磷酸氫二鉀　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　1g　　檸檬酸鈉　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　5g　　瓊脂　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　20g　　蒸餾水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　1000mL　　%溴麝香草酚藍(lán)溶液　　　　　　　　　　　　　　　　　40mL　　制法：先將鹽類溶解于水內(nèi)，校正pH，再加瓊脂，加熱溶化。如果β－半乳糖苷酶產(chǎn)生，則于1～3h變黃色，如無此酶則24h不變色。試驗(yàn)方法：自瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物1滿環(huán)接種，于36177。遲緩反應(yīng)需觀察14～30d。試驗(yàn)方法：從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種，于36℃177。將5mL糖溶液加入于100mL培養(yǎng)基內(nèi)，以無菌操作分裝小試管?！　?其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后，分裝每瓶100mL，121℃高壓滅菌15min。常用培養(yǎng)基配方（微生物學(xué)與微生物檢驗(yàn)學(xué)部分）渤海大學(xué)生物與食品科學(xué)學(xué)院2006年3月目 錄01糖發(fā)酵管02 ONPG培養(yǎng)基03西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基04緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR和VP試驗(yàn)用)05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基06丙二酸鈉培養(yǎng)基07葡葡糖銨培養(yǎng)基08　Hugh－Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗(yàn)用)09 馬尿酸鈉培養(yǎng)基10營養(yǎng)明膠11苯丙氨酸培養(yǎng)基12 氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基13蛋白胨水(靛基質(zhì)試驗(yàn)用)14 硫酸亞鐵瓊脂(硫化氫試驗(yàn)用)15 尿素瓊脂16 氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基17 氧化酶試驗(yàn)18 硝酸鹽培養(yǎng)基19 細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)20 過氧化氫酶試驗(yàn)21 過氧化物酶試驗(yàn)22 磷酸鹽緩沖液23明膠磷酸鹽緩沖液24 乳酸－苯酚溶液25 肉浸液肉湯26肉浸液瓊脂27牛肉(或牛心)消化湯28血消化湯29豆粉瓊脂30血瓊脂31營養(yǎng)瓊脂32營養(yǎng)肉湯33 乳糖膽鹽發(fā)酵管34乳糖發(fā)酵管35 EC肉湯36 緩沖蛋白胨水(BP)37 氯化鎂孔雀綠增菌液(MM) 38 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB) 39 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(換用方法) 40 亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)41 GN增菌液42 腸道菌增菌肉湯43 亞硫酸鉍瓊脂(BS) 44 DHL瓊脂45 HE瓊脂46 SS瓊脂47 WS瓊脂48 麥康凱瓊脂49 伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB) 50三糖鐵瓊脂(TSI) 51 三糖鐵瓊脂(換用方法) 52 克氏雙糖鐵瓊脂(KI) 53 克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法) 54 葡萄糖半固體發(fā)酵管55 5%乳糖發(fā)酵管56 CAYE培養(yǎng)基57 Honda氏產(chǎn)毒肉湯58 Elek氏培養(yǎng)基(毒素測定用)59 氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養(yǎng)基60 胰蛋白胨水61 Rustigian氏尿素培養(yǎng)液62 氯化鈉結(jié)晶紫增菌液63 氯化鈉蔗糖瓊脂64 嗜鹽菌選擇性瓊脂65 %氯化鈉三糖鐵瓊脂66 氯化鈉血瓊脂67 %氯化鈉生化試驗(yàn)培養(yǎng)基68 改良磷酸鹽緩沖液(小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌專用) 69 CIN－1培養(yǎng)基70 嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基 71 改良Y培養(yǎng)基72 改良克氏雙糖73 快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂74 DNA酶甲基綠瓊脂(DTA) 75 Cary－Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基76 Skirrow氏培養(yǎng)基77 TTC瓊脂78 甘氨酸培養(yǎng)基79 改良磷酸鹽緩沖液80 氯化鎂孔雀綠肉湯81 胰酪胨大豆肉湯82 Baird－Parker氏培養(yǎng)基83 %氯化鈉肉湯84 匹克氏肉湯85 甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂86 %檸檬酸鈉溶液87 酪蛋白瓊脂88 木糖－明膠培養(yǎng)基89 庖肉培養(yǎng)基90 卵黃瓊脂培養(yǎng)基91亞硫酸鹽－多粘菌素－磺胺嘧啶瓊脂(SPS) 92液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT) 93含鐵牛奶培養(yǎng)基94 動(dòng)力硝酸鹽培養(yǎng)基（A法）95 動(dòng)力－硝酸鹽培養(yǎng)基(B法) 96 血清肉湯97 馬丁氏肉湯98 明膠培養(yǎng)基99 察氏培養(yǎng)基100 高鹽察氏培養(yǎng)基101 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 102 馬鈴薯瓊脂103 孟加拉紅培養(yǎng)基104 玉米粉瓊脂105 大米粉培養(yǎng)基106 亞硒酸鹽煌綠增菌液107 煌綠肉湯增菌液108 腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基109 %蛋白胨水稀釋劑110半固體瓊脂01 糖發(fā)酵管成分：　牛肉膏　　　　　　5g　　蛋白胨　　　　　　10g　　氯化鈉　　　　　　3g　　磷酸氫二鈉(Na2HPO412H2O)　　2g　　%滇麝香草酚藍(lán)溶液　12mL　　蒸餾水　　　　　　1000mL　　制法：　1葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后，%加入葡萄糖，分裝于有一個(gè)倒置小管的小試管內(nèi)，121℃高壓滅菌15min。另將各種糖類分別配好10%溶液，同時(shí)高壓滅菌。 注：蔗糖不純，加熱后會(huì)自行水解者，應(yīng)采用過濾法除菌。1℃培養(yǎng)，一般觀察2～3d。02 ONPG培養(yǎng)基成分：　　鄰硝基酚β－D半乳糖昔(ONPG)　　　　　　　 60mg　　(O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside)　　()　　　　　　　 10mL　　1%蛋白胨水()　　　　　　　　　　　　　30mL制法：將ONPG溶于緩沖液內(nèi)，加入蛋白胨水，以過濾法除菌，分裝于10mm75mm試管，用橡皮塞塞緊。1℃培養(yǎng)1～3h和24h觀察結(jié)果。03 西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分：　　氯化鈉　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　5g　　　硫酸鎂(MgSO4然后加入指示