細胞培養(yǎng)相關技術ppt課件-展示頁
2025-05-12 03:43本頁面
【正文】 ，需將瓶蓋微松，以保證通氣。 群體培養(yǎng)（左）和克隆培養(yǎng)（右） 培養(yǎng)細胞生長的條件 ? 無污染環(huán)境 : 生物安全柜，超凈工作臺 ? 基質 : 玻璃，塑料 … ? 營養(yǎng)需要 : 氨基酸，碳水化合物，無機鹽，緩沖系統，維生素 … ( 商業(yè)化合成培養(yǎng)基 ) ? pH: ? 溫度 : 37 ℃ ，細胞培養(yǎng)箱 ? 氣體環(huán)境 O2 CO2: 5% CO2 +H2O ← →H 2CO3 ← →H + + HCO3 實驗準備 實驗用品： ? 超凈工作臺 ， 壓力蒸汽消毒器 ， 電熱干燥箱 ， 濾器 ， 酸缸 ， 紫外燈 ， 甲醛熏蒸器 ? CO2培養(yǎng)箱 ? 倒置顯微鏡 ? 酶標儀 、 微孔板震蕩器 ? 液氮 罐 ? 自動雙重純水蒸餾器 ， 純水儀 ? 耗材：培養(yǎng)瓶 ， 吸管 ， 電動移液器 ， 培養(yǎng)板 ， 凍存管 ? 。 停止期（平臺期） ： ? 細胞長滿瓶壁后，細胞雖有活力但不再分裂 ? 機制：接觸抑制、密度依賴性 細胞培養(yǎng)方式 ? 群體培養(yǎng)（ mass culture），將含有一定數量細胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細胞貼壁生長，匯合后形成均勻的單細胞層 ? 克隆培養(yǎng)（ clonal culture），將高度稀釋的游離細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，各個細胞貼壁后，彼此距離較遠，經過生長增殖每一個細胞形成一個細胞集落，稱為克?。?clone）。 ? 細胞株潛伏期一般為 6～ 24小時。 ? 底物 ：膠原、玻璃、塑料、其它細胞等 ? 血清中有促使細胞貼壁的冷析球蛋白和纖粘素、膠原等糖蛋白（ 生長基質 ），這些帶正電荷的糖蛋白的促貼壁因子先吸附于底物上，懸浮細胞再與吸附有促貼壁因子的附著。 ? 10分鐘一 4小時 貼壁期： ? 細胞附著于 底物 上，游離期結束。 ? 美國標準細胞庫或細胞銀行（ ATCC）和人遺傳突變細胞庫（ HGMR）、細胞衰老細胞庫（ CAR）等 ? ATCC不僅是美國，也是世界最大的細胞庫，是世界衛(wèi)生組織 WHO的國際培養(yǎng)細胞文獻中心 ? ATCC現液氮凍存有 3200個已經過鑒定的細胞系，接納來自世界各國已經鑒定的細胞予以貯存，同時也向世界各國的研究者或實驗室免費提供研究用細胞（做盈利性研究時收費） ? 武漢大學細胞典藏物中心 細胞典藏物中心 每代貼附生長細胞的生長過程 ? 游離期 ? 貼壁期 ? 潛伏期 ? 對數生長期 ? 停止期（平臺期） 游離期： ? 細胞接種后在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)．也稱懸浮期。 ? 細胞株 cell strain 從一個經過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群，稱細胞株。如細胞系的生存期有限，則稱之為有限細胞系（ finite cell line）；已獲無限繁殖能力能持續(xù)生存的細胞系，稱連續(xù)細胞系或無限細胞系（ infinite cell line）。 ? 傳代 細胞在培養(yǎng)器皿中生長一定時間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中。 細胞培養(yǎng)：模擬體內的生理環(huán)境，在無菌、適溫和豐富的營養(yǎng)條件下，使離體細胞生存、生長并維持結構和功能的一門技術。細胞培養(yǎng)相關技術講座 石春薇 2022年 12月 21日 細胞培養(yǎng) Cell culture 轉染 Transfection 免疫熒光染色 Immunofluorescence staining 體外培養(yǎng)細胞的特性 ? 培養(yǎng)細胞的生長方式 貼附生長： 必須貼附于支持物表面才能生長，如各種實體瘤細胞。 懸浮生長： 于懸浮狀態(tài)下即可生長，不需要貼附于支持物表面，如各種造血系統腫瘤細胞。 基本概念 ? 原代培養(yǎng) 動物或人組織直接用蛋白酶消化所得的細胞經體外
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1