熒光光譜的原理及應(yīng)用-資料下載頁
2025-04-30 06:33本頁面
【正文】 板顯示、納米生物標記和傳感器等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。 75 稀土摻雜納米材料 400 500 600 7000501001505D0?7F35D0?7F15D0?7F2 Intensity (a.u.)Wav el en gth ( nm)E xci t ati on E mi ssi onsi t e Bs i t e A7F0?5D2VB ? CB( a )( b)ZnO:Eu3+ ZnO→Ln 3+ 能量傳遞 ZnO 敏化發(fā)光更高效 基質(zhì)敏化的稀土離子發(fā)光 76 與蛋白質(zhì)或其他大分子結(jié)構(gòu) 非共價相互作用 而使一種或幾種 熒光性質(zhì)發(fā)生改變 的小分子物質(zhì)?？捎糜谘芯看蠓肿游镔|(zhì)的性質(zhì)和行為。 熒光探針 目前常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。 熒光探針除應(yīng)用于核酸和蛋白質(zhì)的定量分析外，在核酸染色、 DNA電泳、核酸分子雜交、定量 PCR技術(shù)以及 DNA測序上都有著廣泛的應(yīng)用。 熒光探針： 77 熒光探針 過渡金屬配合物 很多能實現(xiàn)較強的紅外波段寬帶發(fā)射，可以有效避開組織體的吸收，可以穿透組織體實現(xiàn)紅外成像，克服同位素原子示蹤對人體的傷害；壽命處于μ s 量級，可以用于較大分子的形變和轉(zhuǎn)動擴散研究，當(dāng)然，結(jié)合其特有的發(fā)射波段也能對活體環(huán)境中的許多擴散和轉(zhuǎn)變過程進行研究。 78 稀土離子 是一類核酸探針的檢測試劑。 在水溶液中僅有 Tb(Ⅲ )和 Eu(Ⅲ )發(fā)出熒光，與 DNA配合后仍保留熒光性能，可特異識別核苷酸。 Tb(Ⅲ )和 Eu(Ⅲ )與一些小分子配體配合，由于配體本身性質(zhì)、中心離子 配體成鍵及溶劑等因素影響，使配合物的激發(fā)態(tài)壽命達到 ms 級，并發(fā)出窄而強的熒光。 Tb(Ⅲ )和 Eu(Ⅲ )與小分子的配合物探針通過共價鍵與靶 DNA 共價結(jié)合后多用于實時定量熒光 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物的分析及雜交測試。 該類探針要求稀土配合物易于合成并且足夠穩(wěn)定，同時熒光發(fā)射強度大。 Nurmi 等用 Tb(Ⅲ )和 Eu(Ⅲ )標記的探針進行實時同步擴增及前列腺特異抗原的測定，信噪比要高于傳統(tǒng)的 TaqMan 探針，而循環(huán)閾值則降低。 熒光探針 79 量子點熒光探針 是由 Ⅱ Ⅳ 族和 Ⅲ Ⅴ 族元素組成的半導(dǎo)體納米顆粒，將核酸連接到量子點的表面，做成探針，通過體外雜交常規(guī)熒光 (FISH)分析，發(fā)現(xiàn)染色體的異常及變異，可取代一些有機熒光染料進行生物分子檢測。研究較多的有 CdSe、 CdTe、 ZnS 等。 熒光探針 80 量子點探針 較傳統(tǒng)的有機熒光染料具有一定的優(yōu)越性： 首先，熒光光譜范圍寬，通過改變納米晶體材料和尺寸，獲得的激光誘導(dǎo)熒光光譜范圍在 400nm～ 2181。m； 其次，熒光光譜范圍可調(diào)，穩(wěn)定性好，熒光壽命長，且可用單一波長的激發(fā)光源同時激發(fā)不同大小尺寸的量子點，得到不同熒光發(fā)射波長的檢測信號，相對于有機熒光染料的單一光源激發(fā)得到單一熒光發(fā)射信號，降低了實驗成本并簡化了分析步驟。 熒光探針 總之，量子點熒光探針用于生物熒光標記，是一個具有廣闊應(yīng)用前景的領(lǐng)域。 81 利用熒光探針來研究高分子的鏈結(jié)構(gòu)及高分子材料物化參數(shù) 通過熒光探針來研究高分子光化學(xué)與光物理問題 通過熒光探針研究高分子體系的聚合反應(yīng)過程 利用熒光探針研究特殊環(huán)境的物理化學(xué)性質(zhì) 熒光探針法測定膠束，囊胞等特殊環(huán)境的微極性和微黏度 熒光探針法測定膠束的聚集數(shù) 熒光探針研究高分子溶液的 SolGel過程和凝膠化點的測定 ?? 參考書目：高分子光化學(xué)導(dǎo)論 —— 基礎(chǔ)和應(yīng)用 吳世康著 科學(xué)出版社 202210出版 熒光探針技術(shù)在高分子科學(xué)中的應(yīng)用 82 物質(zhì)的檢測 —— 熒光分析方法與應(yīng)用 特點： （ 1） 靈敏度高 比紫外 可見分光光度法高 2～ 4個數(shù)量級； 檢測下限： ～ ?g/cm3 相對靈敏度： 。 （ 2） 選擇性強 既可依據(jù)特征發(fā)射光譜 ， 又可根據(jù)特征吸收光譜； （ 3） 試樣量少 缺點 ：應(yīng)用范圍小 。 83 定量依據(jù)： 熒光強度 If正比于 吸收的光量 Ia和熒光量子效率 ? ： If = ? Ia 由朗格 比耳定律： Ia = I0(110? l c ) If = ? I0(110? l c ) = ? I0(? l c ) 濃度很低時 ， 將括號項近似處理后： If = ? I0 ? l c = Kc 物質(zhì)的檢測 —— 熒光分析方法與應(yīng)用 84 定量方法 標準曲線法： 配制一系列標準濃度試樣測定熒光強度 ， 繪制標準曲線 ， 再在相同條件下測量未知試樣的熒光強度 ， 在標準曲線上求出濃度； 比較法： 在線性范圍內(nèi) ， 測定標樣和試樣的熒光強度 ， 比較； 物質(zhì)的檢測 —— 熒光分析方法與應(yīng)用 85 (1)無機化合物的分析 與有機試劑配合物后測量；可測量約 60多種元素 。 鈹 、 鋁 、 硼 、 鎵 、 硒 、 鎂 、 稀土常采用熒光分析法； 氟 、 硫 、 鐵 、 銀 、 鈷 、 鎳采用熒光熄滅法測定； 銅 、 鈹 、 鐵 、 鈷 、 鋨及過氧化氫采用催化熒光法測定； 鉻 、 鈮 、 鈾 、 碲采用低溫?zé)晒夥y定； 鈰 、 銪 、 銻 、 釩 、 鈾采用固體熒光法測定 (2)生物與有機化合物的分析 見表 物質(zhì)的檢測 —— 熒光分析方法與應(yīng)用 86 87 88 參考資料 ，張建成，王奪元，化學(xué)工業(yè)出版社 ，樊美公，科學(xué)出版社 90 問題 ？ ？ ？
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