【正文】
ml H2O ml 10% SDS ml 10% 過硫酸銨 ml TEMED ml 小心滴加 ddH2O覆蓋于分離膠表面,靜置 30min待凝膠凝結(jié),棄去上層水。 3.配制 5% 濃縮膠 5ml: 30%Acr/Bis ml 1 mol/L Tris pH ml H2O ml 10% SDS ml 10% 過硫酸銨 ml TEMED ml? 4.電泳? (1)上樣 20 ul ? (2)電泳 濃縮膠段: 80 V/cm 分離膠段: 120 V/cm? 5.考馬斯亮藍(lán)染色:將電泳膠浸泡于考馬斯亮藍(lán)染色液中,室溫放置 10分鐘。? 6.脫色:將電泳膠從染色液中取出,浸泡于脫色液中,每隔 20分鐘換一次脫色液。三次后,脫色過夜。 生長溫度、誘導(dǎo)濃度、誘導(dǎo)時(shí)間; 進(jìn)行 500ml大規(guī)模培養(yǎng) — 裂解細(xì)胞 — 純化融合蛋白 —