【正文】 oXTyr是受體定位于被覆陷窩（ coated pit）所必需 ? LDL受體基因 ? LDL受體基因突變 典型病例：家族性高膽固醇血癥 功能缺陷： 1. 用抗體或其他方法無法檢得 LDL受體 2. LDL受體不能或遲緩地轉(zhuǎn)移到細(xì)胞表面 3. LDL受體不能結(jié)合 LDL 4. 受體結(jié)合 LDL后不能內(nèi)移 家族性高膽固醇血癥 ? 患兒男 ,10歲 6個月。因自幼皮膚多發(fā)黃色脂肪瘤 ,其弟弟 2歲 ,于出生后 1歲多皮膚出現(xiàn)同樣黃色贅生物 ,分布部位、性狀與患兒相同。 實驗室檢查示高膽固醇血癥 ,其膽固醇超過正常值上限 2倍以上 ,最高時為正常值的 5倍。 家系調(diào)查發(fā)現(xiàn) ,患兒之父血清總膽固醇(TC) mmol/L。 患兒之母 TC mmol/L。患兒之弟弟 TC mmol/L,均明顯高于正常參考值上限。 該患兒符合純合子家族性高膽固醇血癥(FH)的診斷。 FH的治療和預(yù)防 純合子 FH藥物治療幾乎是無效的。 患兒家族進(jìn)行了三代共 22人家系譜的調(diào)查 ,發(fā)現(xiàn)有 11人為 FH雜合子。 LDL receptor family ? LDL receptor ? VLDL receptor ? LDL receptor related protein (LRP) ? apoE receptor2 LDL的非受體代謝途徑 血漿中的 LDL還可被修飾 ， 修飾的 LDL如氧化修飾 LDL (oxLDL)可被清除細(xì)胞 。 即單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中的 巨噬細(xì)胞 及 血管內(nèi)皮細(xì)胞 清除 。 這兩類細(xì)胞膜表面具有 清道夫受體 (scavenger receptor, SR)， 攝取清除血漿中的修飾 LDL。 LDL的氧化修飾 ? LDL的修飾在內(nèi)皮下間隙，被俘獲的天然的 LDL可能經(jīng)歷兩種形式的修飾 衍化（ ApoB100的糖基化、氧化（ ApoB100被過氧化物作用），分別形成衍化的 LDL和氧化的 LDL。 【 oxLDL在動脈粥樣硬化形成中的作用 】 【 oxLDL在動脈粥樣硬化形成中的作用 】 LDL LDL 內(nèi)皮細(xì)胞 管腔 單核細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 泡沫細(xì)胞 內(nèi)膜 氧化修飾 LDL PDGF FGF MCSF EF1 細(xì)胞增殖、退化 Ross R. N Engl J Med 1999。340:115126. MCP1 穿越 VCAM1 ICAM1 粘附 SRA 【 oxLDL引起動脈粥樣硬化的機理 】 ? 沉積在動脈粥樣斑塊上的脂質(zhì)是來源于血漿中低密度脂蛋白 (LDL)。膽固醇及其酯在血管壁內(nèi)的聚集很可能與兩條途徑有關(guān) : 一是依靠內(nèi)皮細(xì)胞 (和血管壁內(nèi)的其他細(xì)胞 )膜上的特異性受體進(jìn)行的主動攝取 。 二是經(jīng)過非受體途徑被動性進(jìn)入 , 如在嚴(yán)重內(nèi)皮損傷時。 ? 血管壁內(nèi)和動脈粥樣硬化損傷處的所有主要細(xì)胞都能氧化 LDL, 產(chǎn)生氧化型 LDL(OxLDL)。但是 , 在動脈樣硬化的早期階段 , 內(nèi)皮細(xì)胞對 LDL的輕度氧化可能是至關(guān)重要的。 ? 輕度氧化的 LDL或微小修飾的 LDL(mmLDL)在引起單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞聚集方面具有啟動因子的作用。 ? 巨噬細(xì)胞吞噬了大量的 OxLDL后就衍變成泡沫細(xì)胞，巨噬細(xì)胞或泡沫細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)飽和后 , 無論破裂與否 , 都可釋放大量的活性物質(zhì) , 加速病變的進(jìn)展。泡沫細(xì)胞逐漸增多并融合，形成脂質(zhì)條紋，繼而發(fā)展為成熟的粥樣斑塊。 清道夫受體結(jié)構(gòu)示意圖 第五節(jié) 脂蛋白（ a） ? Lp(a)的組成 1. 脂質(zhì) 成分 : 與 LDL相似 含量 : TG高于 LDL， Ch低于 LDL apoB100和 apo(a) 以二硫鍵相連 注： Lp(a) —不含 apo(a)僅含 apoB100的 Lp(a)顆粒 Lp(a) 脂蛋白電泳及掃描圖譜 ? Lp(a)的性質(zhì) 密度 : ~ 分子量 : ~ 106 電泳位置 : 前 β ? Lp(a)的結(jié)構(gòu) 核心 : 疏水性脂質(zhì) 外周 : 包繞蛋白質(zhì)和磷脂復(fù)合物 ? apo(a)的分子結(jié)構(gòu) N末端疏水信號序列 Kringle4拷貝 ( 15~37個 ) Kringle5拷貝 ( 1個 ) 胰蛋白酶樣區(qū) ( 1個 ) Kringle： 約由 80個氨基酸殘基組成，富含 Cys，并含有 3個內(nèi)部二硫鍵，形成一種形狀頗似丹麥蛋糕結(jié)構(gòu) 載脂蛋白（ a）表型 Identification of 34 Apolipoprotein(a) Isoforms: Diferential Expression of Apolipoprotein(a) Alleles between American Blacks and Whites Biochemical and Biophysical Research Communications, Volume 191, Issue 3, 31 March 1993, Pages 11921196 S. M. Marcovina, Z. H. Zhang, V. P. Gaur and J. J. Albers Identification of 34 Apolipoprotein(a) Isoforms: Diferential Expression of Apolipoprotein(a) Alleles between American Blacks and Whites 蛋白水平與基因水平結(jié)果一致 ? 本人的工作 (1993)從二千多人的血清蛋白電泳證實 apo(a)表型達(dá) 34種之多 . ? Lackner(1991)等用脈沖電泳技術(shù)分析apo(a)基因結(jié)構(gòu) ,從 424人基因中發(fā)現(xiàn)apo(a)cDNA基因結(jié)構(gòu)的 VI區(qū)有多達(dá)約 36個串聯(lián)重復(fù)片段 .這是不同人表型不同的原因 . ? apo(a)的基因 ： 6q27附近 2. 基因區(qū)域有幾個特殊的等位基 因，代表大小不同的 apo(a)異 構(gòu)體 apo（ a）與血纖維蛋白溶酶原基因結(jié)構(gòu)(a)與 cdnr結(jié)構(gòu) (b)的比較 注意： ? 第 36個 Kringle4含有一個額外的 沒有配對的 Cys，此處可能是 apo(a)以二硫鍵與apoB結(jié)合的部位 ? Kringle4的數(shù)目可在 12~39之間變 化，造成 apo(a)有多種不同的異構(gòu)體 纖溶酶原 (plasminogen, PG )的分子結(jié)構(gòu) ? 絲氨酸蛋白酶原 (含 791 個 .) ? 含 5個富含 Cys的 “ Kringle樣 ” 結(jié)構(gòu)， 即 Kringle 5 ? Kringle5的后面為 Ser蛋白酶區(qū) apo(a)和 PG的比較 ? 共性 : apo(a) 的 Kringle4中有 61~75% 的 氨基酸與纖溶酶原的 Kringle4相同 ,兩者有共同的抗原簇和交叉免疫反應(yīng) ? 差異 : apo(a)分子胰蛋白酶樣區(qū)中相當(dāng)于 PG絲氨酸蛋白酶區(qū)的 Ser被 Arg代替 ，使其喪失了酶的功能 ? Lp(a)與動脈粥樣硬化 （ Atherosclerosis, As） 1. Lp(a)是動脈粥樣硬化的獨立危險 因素之一 2. Lp(a)在血液中的含量分布差別極 大 (0~100mg/dL) 。當(dāng) Lp(a) ＞ 30 mg/dL 時，表明 As危險性增高 動脈硬化中的 Lp(a):另一個罪魁禍?zhǔn)祝? ? 結(jié)合了載脂蛋白 a的 LDL顆粒 ? 在大多數(shù)流行病學(xué)調(diào)查中，血漿濃度可以預(yù)測動脈硬化 ? 在動脈硬化斑塊中積累 ? 結(jié)合在含有 apo B的脂蛋白和蛋白多糖上 ? 被泡沫細(xì)胞前體吞入 ? 可能會妨礙溶血 ? Lp(a)致 As的機制 Lp(a)與纖溶酶原結(jié)構(gòu)同源 1. Lp(a)與纖溶酶原競爭底物的結(jié)合部位 Lp(a)中的 apo(a) 與纖溶酶原競爭同一底物纖維蛋白或纖維蛋白原，但由于 apo(a)不具備酶的活性，導(dǎo)致其不能溶解或分解與其結(jié)合的纖維蛋白，相反它還促進(jìn)或有利于纖維蛋白沉著于血管壁，參與血栓形成，繼而啟動 As的發(fā) 生和發(fā)展。 2. Lp(a)競爭性抑制纖溶酶原與細(xì)胞纖溶酶原受體的結(jié)合 纖溶酶原受體的主要作用是加速纖溶酶原的活化，促進(jìn)血栓的溶解，保護(hù)纖溶酶不被抑制。但由于 Lp(a)的分子結(jié)構(gòu)與纖溶酶原極為相似，因此它能與纖溶酶原競爭纖溶酶原受體，從而抑制血栓的溶解，促進(jìn)血栓的形成。 謝謝各位 再見