【正文】 驗(yàn)菌液1ml注入平皿中，立即傾注相應(yīng)瓊脂培養(yǎng)，待凝，在相應(yīng)溫度倒置培養(yǎng)，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，測(cè)定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。（3）供試品對(duì)照組: 各取1：10供試液1ml、 ml、 ml，按試驗(yàn)組操作，不加菌液，測(cè)定樣品本底菌。培養(yǎng)、點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，計(jì)算各試驗(yàn)菌株的回收率。各菌株回收率（%）=（試驗(yàn)組平均菌落數(shù)供試品對(duì)照組平均菌落數(shù)）/菌液組平均菌落數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表7。表7計(jì)數(shù)驗(yàn)證菌各菌株回收率（%）結(jié)果驗(yàn)證菌株大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽胞桿菌白色念珠菌黑曲霉 驗(yàn)證次數(shù) 方法1231231231231231ml/皿758999779790658489989486728784759899961008473911008198999610090849092由表中可見(jiàn)，白色念珠菌和黑曲霉2個(gè)菌株的回收試驗(yàn)，用常規(guī)法1 ml/皿供試液時(shí)，3次試驗(yàn)的回收率均可達(dá)到70%以上，表明本品霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)可用常規(guī)平皿法。而大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽胞桿菌3個(gè)菌株的回收率試驗(yàn)， ml/皿，3次驗(yàn)證的回收率才能均達(dá)到70%以上，因此本品的細(xì)菌計(jì)數(shù)可用培養(yǎng)基稀釋法檢查。（ ml/皿）。2 控制菌檢查法的驗(yàn)證本品為口服中藥材制劑?？刂凭鷳?yīng)檢查大腸埃希菌和大腸菌群。（1）大腸埃希菌查法的驗(yàn)證　 取1︰10供試液10ml及1ml大腸埃希菌菌液加入100ml的BL增菌培養(yǎng)基中，按大腸埃希菌的檢查法進(jìn)行驗(yàn)證。（2）大腸菌群查法的驗(yàn)證　 取1︰10供試液1ml及1ml大腸埃希菌菌液加入不少于15ml的乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基中，按大腸菌群的檢查法進(jìn)行驗(yàn)證。表8 控制菌驗(yàn)證結(jié)果控制菌驗(yàn)證菌種名稱菌種代數(shù)驗(yàn)證加菌數(shù)（CFU）方法結(jié)果結(jié)論大腸埃希菌大腸埃希菌 387常規(guī)法（100ml）檢出方法成立大腸菌群大腸埃希菌 387常規(guī)法（15ml）檢出方法成立由上表可見(jiàn)，均檢出試驗(yàn)菌大腸埃希菌，表明本品可用常規(guī)法檢查大腸埃希菌和大腸菌群。6 浸出物照醇溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄X A）測(cè)定，用70%乙醇作溶劑。實(shí)測(cè)樣品3批，%～%，%（見(jiàn)表9）。參考《中國(guó)藥典》2010年版一部，%。表9 醇溶性浸出物(乙醇)序號(hào)批號(hào)取樣（g）浸出物（%）平均值（%）120090201 220090202 320090203 平均值（%）7 特征圖譜 照高效液相色譜法（《中國(guó)藥典》2010版一部附錄 VI D）測(cè)定。色譜條件 色譜柱：Acquity BEH C18 ( mm 150 mm, )；以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫； ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫為30℃。時(shí)間（分鐘） 流動(dòng)相A（%） 流動(dòng)相B（%）0～8 17 838～22 17→40 83→60參照物溶液的制備 取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Re對(duì)照品和人參皂苷Rb1對(duì)照品適量，分別加50%甲醇制成每1ml含人參皂苷Rg1 、人參皂苷Re 1mg的溶液，即得。供試品溶液的制備 取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和的正丁醇50ml，稱定重量，放冷，再稱定重量，用水飽和正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)?0%甲醇適量使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法 精密吸取參照物溶液與供試品溶液各5181。l，注入超高效液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜圖，即得。特征圖譜中，應(yīng)有7個(gè)特征峰，其中3個(gè)峰應(yīng)分別與相應(yīng)的參照物峰保留時(shí)間相同。7654321對(duì)照特征圖譜峰1：人參皂苷Rg1 峰2：人參皂苷Re 峰3：人參皂苷Rb1對(duì)照特征圖譜峰1：人參皂苷Rg1 峰2：人參皂苷Re 峰3：人參皂苷Rb1西洋參破壁飲片人參皂苷Rg1人參皂苷Re人參皂苷Rb18 含量測(cè)定 本方法參照《中國(guó)藥典》2010年版一部西洋參項(xiàng)下【含量測(cè)定】方法制定，由于本品實(shí)質(zhì)為藥材破壁粉，方法驗(yàn)證考察其重復(fù)性和回收率，結(jié)果重復(fù)性RSD%≤%，%～%，RSD%＜%；十批樣品含量見(jiàn)表10，結(jié)果表明該方法基本可行。表10 十批樣品含量批號(hào)總量（%）平均值（%）20090201 20090202 20090203 2009020420090205200902062009020720090208200902092009010圖11 人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Re對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品混合溶液圖譜圖12 西洋參破壁飲片樣品圖譜9 性味與歸經(jīng)參照《中國(guó)藥典》2010年版一部西洋參項(xiàng)下擬定。10 功能與主治參照《中國(guó)藥典》2010年版一部西洋參項(xiàng)下擬定。11 用法與用量見(jiàn)正文。12 注意參照《中國(guó)藥典》2010年版一部西洋參項(xiàng)下擬定。13 貯藏 見(jiàn)正文。附錄 中藥破壁飲片通則中藥破壁飲片是將符合《中國(guó)藥典》要求并具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的植物類中藥飲片，經(jīng)現(xiàn)代粉碎技術(shù)加工至D90﹤45181。m（300目以上）的粉體，加水或不同濃度的乙醇粘合成型，制成30~100目的原飲片全成分的均勻干燥顆粒狀飲片。中藥破壁飲片可直接沖服、供中醫(yī)臨床調(diào)劑或作為中成藥生產(chǎn)的配方原料。中藥破壁飲片在生產(chǎn)與貯藏期間應(yīng)符合下列有關(guān)規(guī)定。一、 中藥破壁飲片的投料應(yīng)為植物類中藥飲片，原則上動(dòng)物類與礦物類不宜制成破壁飲片，毒性藥材飲片不宜制成破壁飲片。二、 除另有規(guī)定外，供中藥破壁飲片生產(chǎn)的原料飲片應(yīng)符合《中國(guó)藥典》一部、相應(yīng)省藥材標(biāo)準(zhǔn)或飲片炮制規(guī)范相應(yīng)品種項(xiàng)下的規(guī)定，飲片的炮制應(yīng)符合《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅱ D 炮制通則的相關(guān)規(guī)定。三、 中藥破壁飲片生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)針對(duì)各品種的不同特性，采取合理的工藝，從而盡量避免其有效成分損失或發(fā)生變化。四、 中藥破壁飲片加工生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)選用合適儀器設(shè)備，以盡量避免在生產(chǎn)過(guò)程引入有害物質(zhì)；并在符合規(guī)定的潔凈度環(huán)境中生產(chǎn)，必要時(shí)可采取適宜的防護(hù)措施，以盡量減少生產(chǎn)過(guò)程中引入無(wú)關(guān)雜質(zhì)。五、 中藥破壁飲片應(yīng)干燥、顆粒均勻，色澤一致，無(wú)吸潮、結(jié)塊、潮解等現(xiàn)象。六、 中藥破壁飲片應(yīng)密封，在干燥處貯存，防止受潮。除另有規(guī)定外，中藥破壁飲片應(yīng)進(jìn)行以下相應(yīng)檢查：【粒度】 除另有規(guī)定外，照粒度測(cè)定法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅺ B第二法，雙篩分法）測(cè)定，不能通過(guò)一號(hào)篩與能通過(guò)五號(hào)篩的總和，不得過(guò)15%。 【水分】 照水分測(cè)定法（《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅸ H）測(cè)定，應(yīng)符合各品種項(xiàng)下的規(guī)定?！旧珴删鶆蚨取?取供試品適量，置光滑紙上，平鋪，在明亮處觀察，色澤應(yīng)均勻一致?！玖椒植肌?，加水30ml，超聲處理，并時(shí)時(shí)振搖3分鐘，使顆粒分散成混懸于水中的超微粉體，用激光粒度分析儀測(cè)定粉體粒徑，D90不得大于45um（D90值表示粒徑小于或等于此值的顆粒占所有顆粒數(shù)量的90%，而粒徑大于這個(gè)值的顆粒占10%）?！疚雌票诩?xì)胞限度】 ，加入水合氯醛試液–水(1∶1) ml，超聲處理至完全溶散，吸取所有溶液裝片，每片以不溢出、無(wú)氣泡、顆粒分布均勻?yàn)槎龋?00倍顯微鏡下檢視，大于100μm且完整的細(xì)胞的顆粒數(shù)目（如多個(gè)完整的細(xì)胞連成一片，且整片也超過(guò)100μm的，以整片為一個(gè)計(jì)算）不得超過(guò)各品種項(xiàng)下規(guī)定的個(gè)數(shù)?！狙b量差異】 單劑量包裝的中藥破壁飲片，照下述方法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。檢查法 取供試品10袋，分別稱定每袋內(nèi)容物的重量，每袋裝量與標(biāo)示裝量相比較，按表中的規(guī)定，超出裝量差異限度的不得多于2袋，并不得有1袋超出限度1倍。標(biāo)示裝量裝量差異限度1g及1g以下177。10%177。8%177。7%6g以上177。5%【裝量】 多劑量包裝的中藥破壁飲片，照最低裝量檢查法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅻ C）檢查，應(yīng)符合規(guī)定?！疚⑸锵薅取?除另有規(guī)定外，照微生物限度檢查法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅩⅢ C）檢查，應(yīng)符合規(guī)定。中藥破壁飲片為口服給藥，均含藥材原粉，其微生物限度標(biāo)準(zhǔn)如下：細(xì)菌數(shù) 每1g不得過(guò)10 000cfu；霉菌和酵母菌數(shù) 每1g不得過(guò)100cfu；大腸埃希菌 每1g不得檢出；大腸菌群 每1g應(yīng)小于100個(gè)。 霉變、長(zhǎng)螨者 以不合格論。附：粒徑分布測(cè)定法粒徑分布測(cè)定法本方法是通過(guò)等效散射光能分布來(lái)測(cè)量粉粒的大小，全面地反映粉粒的粗細(xì)特征，并通過(guò)工作站進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理。此方法與經(jīng)典測(cè)量如篩分，沉降法和圖像分析等方法相比較，具有速度快、重復(fù)性好、準(zhǔn)確性好、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。本方法適用于中藥破壁飲片粒徑分布測(cè)定。一 儀器設(shè)備激光粒度分析儀主要技術(shù)參數(shù)：測(cè)量范圍：—500μm激光器：HeNe氣體激光器，輸出功率2mw。二 分散介質(zhì) 應(yīng)能使樣品分散的懸浮介質(zhì)，又不讓樣品在其中分解或發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。常用水為分散介質(zhì)。三 試驗(yàn)條件 溫度1030℃，相對(duì)濕度小于85%四 實(shí)驗(yàn)步驟1 供試品處理稱取一定量供試品，加入分散介質(zhì)，超聲處理使供試品粉粒分散均勻（超聲時(shí)間視樣品情況而定）。2 測(cè)定法 打開(kāi)電源，預(yù)熱半小時(shí)左右，待激光功率穩(wěn)定。 背景測(cè)量 鼠標(biāo)點(diǎn)擊“背景測(cè)量”按鈕，待按鈕上的“背景測(cè)量”文字變成“樣品測(cè)量”，即完成了背景測(cè)量。 樣品測(cè)量 把處理好的樣品混懸液倒入進(jìn)樣系統(tǒng)，點(diǎn)操作鍵，開(kāi)始分析樣品。 讀取結(jié)果五 注意事項(xiàng)，應(yīng)待激光功率穩(wěn)定后開(kāi)始測(cè)定。%～25%之間。 每測(cè)完一個(gè)樣品，應(yīng)及時(shí)清洗樣品池。