“生物檢驗(yàn)檢疫”課程實(shí)驗(yàn)教案授課人：陳勇實(shí)驗(yàn)一：病料的采-資料下載頁
2025-04-16 12:23本頁面
【正文】 成中性化合物，不具有使甲基紅變紅的能力。因此進(jìn)行這項(xiàng)試驗(yàn)時，觀察時間顯得很重要。腸道桿菌生長在37。C以下4天觀察為宜，其他細(xì)菌也可參照同樣時間。 實(shí)驗(yàn)材料： 細(xì)菌 培養(yǎng)基 酒精棉球 酒精燈 接種環(huán) 恒溫箱等 ：%酒精300毫升中 實(shí)驗(yàn)步驟： 將被檢菌培養(yǎng)在葡萄糖蛋白胨水中，在37。C條件下培養(yǎng)2~7天后，（5~6滴）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 液體成紅色者為陽性，黃色者為陰性，橙色者為可疑。 六、尿素酶實(shí)驗(yàn)： 實(shí)驗(yàn)原理： 某些細(xì)菌（如布氏桿菌）含有尿素酶，能分解培養(yǎng)基中的尿素產(chǎn)生氨，因而培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，于是酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色（陽性反應(yīng)） 實(shí)驗(yàn)材料： 細(xì)菌 培養(yǎng)基 酒精棉球 酒精燈 接種環(huán) 恒溫箱等 實(shí)驗(yàn)步驟： 將被檢菌接種于含有酚紅指示劑的尿素培養(yǎng)基中，放37。C溫箱中培養(yǎng)24~48小時后觀察結(jié)果。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 如細(xì)菌能分解尿素則培養(yǎng)基因產(chǎn)堿而由黃色變?yōu)榧t色。 七、檸檬酸鹽利用實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? （1）了解檸檬酸鹽實(shí)驗(yàn)的用途和原理 （2）學(xué)習(xí)檸檬酸鹽實(shí)驗(yàn)的技術(shù)操作 實(shí)驗(yàn)原理： 某些細(xì)菌能利用檸檬酸鹽作為唯一碳源，并且分解檸檬酸鈉產(chǎn)生碳酸鈉而顯堿性，使培養(yǎng)基中含有的指示劑——溴麝香草酚藍(lán)由草綠色變?yōu)樗{(lán)色（配制的培養(yǎng)基為草綠色，~）。本實(shí)驗(yàn)是鑒別有關(guān)微生物的依據(jù)之一。 實(shí)驗(yàn)材料： 細(xì)菌 培養(yǎng)基 酒精棉球 酒精燈 接種環(huán) 恒溫箱等 八、硝酸鹽還原試驗(yàn)： 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? （1）了解硝酸鹽還原試驗(yàn)的應(yīng)用及反應(yīng)原理。 （2）學(xué)習(xí)硝酸鹽還原試驗(yàn)的操作技術(shù) 實(shí)驗(yàn)原理： 某些細(xì)菌具有硝酸鹽還原酶，可把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽。試驗(yàn)時，將被檢細(xì)菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基試管中，在37。C培養(yǎng)24~48小時，加入下列試劑： 試劑甲： 對氨基苯磺酸 5摩爾/升冰醋酸 50毫升 試劑乙： α萘胺 5摩爾/升冰醋酸 50毫升 有些細(xì)菌還能繼續(xù)把亞硝酸鹽分解成氨和氮，這是加入試劑不會變紅。但產(chǎn)生的氮可在培養(yǎng)基中置一倒立的小試管而收集到。 九、明膠液化實(shí)驗(yàn)： 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? （1）了解明膠液化試驗(yàn)的應(yīng)用及原理。 （2）學(xué)習(xí)明膠液化試驗(yàn)的操作技術(shù)。 實(shí)驗(yàn)原理： 明膠是一種動物性蛋白，明膠的水解是由于細(xì)菌所產(chǎn)生的蛋白酶的作用。明膠培養(yǎng)基在低于20℃時凝固，高于24℃則自行液化。明膠分解后，其分子變小。雖在低于20℃的溫度下，亦不再凝固。 實(shí)驗(yàn)材料： 細(xì)菌 培養(yǎng)基 酒精棉球 酒精燈 接種環(huán) 恒溫箱等 實(shí)驗(yàn)步驟： 用穿刺法將實(shí)驗(yàn)菌接種在明膠培養(yǎng)基試管中，連同空白對照一同在37℃溫箱中培養(yǎng)4天。每天觀察并紀(jì)錄結(jié)果。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 將試管從溫箱中取出，不要搖動，置于冰箱中30分鐘，取出后立即傾斜試管，觀察試管中培養(yǎng)基的莊臺，若部分或全部成液化狀態(tài)，表明試驗(yàn)菌具有分解明膠的能力，結(jié)果為陽性，否則為陰性。實(shí)驗(yàn)四：病原菌的免疫學(xué)鑒定方法11 /
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