分子生物學實驗報告陳倩倩-資料下載頁
2025-03-23 05:28本頁面
【正文】 用了酚、氯仿、異戊醇的混合液，致使蛋白質殘留較多。另外，電泳條帶中參照物的條帶只有六條，少了兩條，可能是由于電泳我們組一共跑出三條帶，分別為DNA,超螺旋Puc19質粒DNA,RNA。二， 超螺旋狀態(tài)的pUC19質粒，與標準的對比由亮度可知，我們提取的量大體上還不錯。三， 對于出現(xiàn)RNA條帶可能的原因是RNase處理時間不夠，而如果是開環(huán)的DNA或染色體DNA斷片則可能是震蕩過激烈。四， 而對于染色體DNA 的條帶亮度比較暗淡來說，我們組分離掉的染色體還很成功。五， 點樣處有亮帶，說明有雜質蛋白質的存在六，注意事項一， 酚具有腐蝕性，能損傷皮膚和衣物，使用時應小心。皮膚如不小心沾到酚，應立即用堿性溶液、肥皂或大量清水沖洗。二， 注意上樣時要小心操作，避免損壞凝膠或將樣品槽底部的凝膠刺穿。也不要快速擠出吸頭內的樣品，避免擠出的空氣將樣品沖出樣品孔。三， 溴化乙錠是一種具扁平分子的核酸染料，可以插入到DNA或RNA分子的堿基之間，并在300 nm波長的紫外光照射下放射出熒光，所以可用來顯現(xiàn)瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中的核酸分子。溴化乙錠是一種強烈的誘變劑，有毒性，使用含有這種染料的溶液時，應戴手套進行操作。勿將溶液滴灑在臺面或地面上，實驗結束后用水徹底沖洗干凈。四， 沉淀DNA通常使用預冷無水乙醇，在低溫條件下長時間放置可使DNA沉淀完全。除用乙醇沉淀DNA外，還可使用0．6倍體積的異丙醇，但異丙醇也能將鹽等雜質沉淀，所以沉淀需要在常溫下進行，并且時間不宜太長(限20 min內)。沉淀離心后，需用70％乙醇洗滌，以除去鹽類及揮發(fā)性較小的異丙醇。
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