分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告陳倩倩-資料下載頁(yè)
2025-03-23 05:28本頁(yè)面
【正文】 用了酚、氯仿、異戊醇的混合液，致使蛋白質(zhì)殘留較多。另外，電泳條帶中參照物的條帶只有六條，少了兩條，可能是由于電泳我們組一共跑出三條帶，分別為DNA,超螺旋Puc19質(zhì)粒DNA,RNA。二， 超螺旋狀態(tài)的pUC19質(zhì)粒，與標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比由亮度可知，我們提取的量大體上還不錯(cuò)。三， 對(duì)于出現(xiàn)RNA條帶可能的原因是RNase處理時(shí)間不夠，而如果是開(kāi)環(huán)的DNA或染色體DNA斷片則可能是震蕩過(guò)激烈。四， 而對(duì)于染色體DNA 的條帶亮度比較暗淡來(lái)說(shuō)，我們組分離掉的染色體還很成功。五， 點(diǎn)樣處有亮帶，說(shuō)明有雜質(zhì)蛋白質(zhì)的存在六，注意事項(xiàng)一， 酚具有腐蝕性，能損傷皮膚和衣物，使用時(shí)應(yīng)小心。皮膚如不小心沾到酚，應(yīng)立即用堿性溶液、肥皂或大量清水沖洗。二， 注意上樣時(shí)要小心操作，避免損壞凝膠或?qū)悠凡鄣撞康哪z刺穿。也不要快速擠出吸頭內(nèi)的樣品，避免擠出的空氣將樣品沖出樣品孔。三， 溴化乙錠是一種具扁平分子的核酸染料，可以插入到DNA或RNA分子的堿基之間，并在300 nm波長(zhǎng)的紫外光照射下放射出熒光，所以可用來(lái)顯現(xiàn)瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中的核酸分子。溴化乙錠是一種強(qiáng)烈的誘變劑，有毒性，使用含有這種染料的溶液時(shí)，應(yīng)戴手套進(jìn)行操作。勿將溶液滴灑在臺(tái)面或地面上，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用水徹底沖洗干凈。四， 沉淀DNA通常使用預(yù)冷無(wú)水乙醇，在低溫條件下長(zhǎng)時(shí)間放置可使DNA沉淀完全。除用乙醇沉淀DNA外，還可使用0．6倍體積的異丙醇，但異丙醇也能將鹽等雜質(zhì)沉淀，所以沉淀需要在常溫下進(jìn)行，并且時(shí)間不宜太長(zhǎng)(限20 min內(nèi))。沉淀離心后，需用70％乙醇洗滌，以除去鹽類(lèi)及揮發(fā)性較小的異丙醇。
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