細胞與分子生物學-資料下載頁
2025-04-04 23:49本頁面
【正文】 2）用一次性手術刀片在膠上切割差異條帶，加ddH2O 20μl，沸水浴15min，離心取上清為模板。(3) 以原引物擴增： 回收DNA 7 μl 10PCR buffer 5 μl 5mM dNTPmix μl 引物P μl 引物T μl Taq酶 2 μl 加ddH2O至總體積 50μl（4）執(zhí)行PCR程序: 93℃ 3min；93℃ 1min→60℃1min→68℃2min，20次循環(huán)；68℃5min。（5）取PCR產(chǎn)物10μl 2%瓊脂糖電泳檢測。（6）PCR產(chǎn)物乙醇沉淀，10μlddH2O溶解。6．以PCR產(chǎn)物為探針，標記后進行Northern雜交，證實基因的真實性。7．PCR產(chǎn)物的TA克隆。8．DNA序列測定。9．檢索分析。參考文獻：1 Liang P, Pardee A1 Science, 1992, 257: 967～97112 StraussM, Bauer D, Muller H1 Nucleic Acids Research, 1993, 21: 4272～428013 錢前,程式華,水稻遺傳學和功能基因組學[M ] 1北京:科學出版社, 200614 HuWJ, Zhang SH, Zhao Z, et al1 Plant Physiology and MolecularBiology, 2003, 29 (6) : 507～51415 李竑,沈思師,許智宏,等1實驗生物學報, 2003, 36 (1) : 54～6016 高風華,譚學林1云南農(nóng)業(yè)大學學報, 2006 (2) : 150～15317 EndoM, Tsuchiya T, WatanabeM, et al1 Genes Genet Syst, 2004, 79 (4) : 213～21618 Guimil S, Chang HS, Zhu T, et al1 PNAS, 2005, 102: 8066～807019 郭蕾,程英豪,王紫1 北京大學學報(自然科學版) , 2006, 42 (2) : 175～79110 林碧源1用DNA芯片鑒定水稻花器官發(fā)育相關基因[碩士學位論文]1福州:福建農(nóng)林大學, 2006111 辛業(yè)蕓,鄧小林,羅崇善1雜交水稻, 2007, 22 (6) : 1～5112 賀滉,郭安平, 孔華, 等1 安徽農(nóng)業(yè)科學, 2007, 35 ( 5 ) : 1307～1309113 熊建華,陳學峰,張義平1 中國水稻科學, 2004, 18 (2) : 94～98114 姜國強,郭晉隆,孟慶偉,等1 中國農(nóng)業(yè)科學, 2005, 38 ( 1) : 33～3718 /
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