【正文】
ACP DDRTPCR技術(shù) 摘 要:隨著基因組計劃的順利實施,大量的生物信息被解析,分離和鑒定差異表達(dá)基因已成為分子生物學(xué)研究的熱點。mRNA差別顯示技術(shù)(DDRTPCR)是目前有效篩選、分離差異表達(dá)基因的方法之一。就DDRTPCR的基本原理簡要概述,闡明了該技術(shù)在生物生長發(fā)育、雜種優(yōu)勢、抗逆性基因研究中的應(yīng)用等。關(guān)鍵詞::mRNA差異顯示技術(shù) 雜種優(yōu)勢 抗性 ACP技術(shù) Abstrac t: With the development of Genome Project and analysis ofmassive biological information, separation and identification of difference exp ressing gene have bee a hot issue in molecular biology research1 The mRNA differential disp lay (DDRTPCR) is one of effective methods for screening and isolating differentially expressed genes. The principles of DDRTPCR technique were introduced1. The usability and achieved research results by using thismethod were summarized from the aspects of rice development gene, heterosis gene and the resistance gene1 The p rospective app lication of DDRTPCR in paddy rice mutant and resistance to agricultural chemicals research was also exp lored in the paper.Keyword s: mRNA differential display Heterosis Resistance ACP 許多年以來,分離差異表達(dá)基因的方法僅限于差異篩選cDNA文庫,直到1992 年Liang等發(fā)明了一種檢測基因轉(zhuǎn)錄模式的方法,即mRNA 差異顯示技術(shù)(mRNA Differential Display Reverse TranscriptionPCR, DDRTPCR)[1],它是將mRNA反轉(zhuǎn)錄技術(shù)與PCR技術(shù)二者相互結(jié)合發(fā)展起來的一種RNA指紋圖譜技術(shù),目前已廣泛應(yīng)用于分離鑒定組織特異性表達(dá)的基因,差別基因表達(dá)(differential gene express)是細(xì)胞分化的基礎(chǔ)[2]。mRNA差別顯示技術(shù)正是對組織特異性表達(dá)的基因進行分離的一種快速而行之有效的方法。它第一次實現(xiàn)了同時快速靈敏地檢測到真核細(xì)胞中大部分的差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄體的目的[3]。近些年來,在分離和克隆差異表達(dá)基因的功能基因組學(xué)研究中,國內(nèi)外學(xué)者又發(fā)展了多種分析方法,如,代表性差異分析、RNA 指紋技術(shù)、RC4D、SAGE、抑制消減雜交技術(shù)、cDNAAFLP、iAFLP及基因芯片技術(shù)等方法克隆差異表達(dá)基因[4]。這些方法的發(fā)明