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正文內(nèi)容

分子生物學(xué)總復(fù)習(xí)(已修改)

2025-06-19 15:52 本頁(yè)面
 

【正文】 2011年《分子生物學(xué)基礎(chǔ)》本科生答疑專用一、PPT11953年Watson和Crick提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的意義:DNA復(fù)制的明顯方式——半保留復(fù)制。Waston和Crick在1953年就指出:DNA可以按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行半保留復(fù)制。而在此之前對(duì)復(fù)制方式人們一無(wú)所知?;蚝投嚯某删€性對(duì)應(yīng)的一個(gè)可能的理由:DNA核苷酸順序規(guī)定該基因編碼蛋白質(zhì)的氨基酸順序;DNA中的遺傳信息就是堿基序列;并存在某種遺傳密碼(genetic code),將核苷酸序列譯成蛋白質(zhì)氨基酸順序。該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征,最有價(jià)值的是確認(rèn)了堿基配對(duì)原則,這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ),亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是本世紀(jì)生命科學(xué)的重大突破之一,它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。二、PPT2原核生物特點(diǎn):①遺傳物質(zhì)僅一個(gè)環(huán)狀DNA;②無(wú)核膜;③無(wú)細(xì)胞器,無(wú)細(xì)胞骨架;④以無(wú)絲分裂或出芽繁殖。 包括:支原體,細(xì)菌,蘭藻,螺旋藻(人類未來(lái)的蛋白質(zhì)食物新來(lái)源)真核生物三大結(jié)構(gòu)體系:膜系統(tǒng):質(zhì)膜,內(nèi)膜系統(tǒng),細(xì)胞器; 細(xì)胞核系統(tǒng):遺傳信息表達(dá)系統(tǒng);骨架系統(tǒng):細(xì)胞質(zhì), 細(xì)胞核等的骨架系統(tǒng)類核體:通常含有一個(gè)折疊成類核體附著在質(zhì)膜上的環(huán)狀染色體。質(zhì)粒:攜有一定遺傳信息的質(zhì)粒,包括小分子的脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、核糖體:合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所原核生物表面的纖毛作用:可使細(xì)胞能夠附著在其他細(xì)胞的表面上;而鞭毛的作用是:旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)可使細(xì)胞游動(dòng)。溶酶體:是小的有膜包圍的細(xì)膜器,從高爾基體出芽而成,并且含有各類能降解蛋白質(zhì)、核酸、脂類和糖類的消化酶。溶酶體起著從細(xì)胞外帶進(jìn)大分子或來(lái)自損傷細(xì)胞器的大分子的回收中心的作用。微體:乙醛酸循環(huán)體是特定的植物過(guò)氧化物酶體,進(jìn)行乙醛酸循環(huán)。溶酶體、過(guò)氧化物酶體和乙醛酸循環(huán)體合稱微體大小和密度不同的細(xì)胞器,例如細(xì)胞核與線粒體、可以根據(jù)它們的沉降系數(shù)值不同由差速離心法互相分離并與其他細(xì)胞器分開(kāi)。通常在DNA樣品的分析中,往往選用測(cè)量樣品的吸光度來(lái)鑒定其濃度和存度,DNA的吸收峰在 260 nm,蛋白質(zhì)的吸收峰在 280 nm。純凈的DNA A260/A280比值約為 ,純凈的RNA A260/A280比值約為 。HGP是人類基因組計(jì)劃(Human Genome Project)。三、PPT3大多數(shù)蛋白質(zhì)都含有這些氨基酸殘基,因此用紫外分光光度法可測(cè)定蛋白質(zhì)含量。生物體內(nèi)的氨基酸類別:蛋白質(zhì)氨基酸:蛋白質(zhì)中常見(jiàn)的20種氨基酸其中稀有的蛋白質(zhì)氨基酸。蛋白質(zhì)組成中,除上述20種常見(jiàn)氨基酸外,從少數(shù)蛋白質(zhì)中還分離出一些稀有氨基酸,它們都是相應(yīng)常見(jiàn)氨基酸的衍生物。如4羥脯氨酸、5羥賴氨酸等。非蛋白質(zhì)氨基酸:生物體內(nèi)呈游離或結(jié)合態(tài)的氨基酸。氨基酸的性質(zhì):(1 )兩性解離和等電點(diǎn)。(2 )光學(xué)性質(zhì)。(3 )重要化學(xué)反應(yīng) :用于氨基酸定量定性測(cè)定。 ,4一二硝基氟苯(DNFB)的反應(yīng)(sanger反應(yīng)):用于蛋白質(zhì)N端測(cè)定。 c. 與苯異硫氰酯(PITC)的反應(yīng)(Edman反應(yīng)),用于蛋白N端測(cè)定,蛋白質(zhì)順序測(cè)定儀設(shè)計(jì)原理的依據(jù)。sanger反應(yīng):氨基酸與2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反應(yīng)Edman反應(yīng):氨基酸與苯異硫氰酯(PITC)的反應(yīng)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu):多肽鏈中氨基酸的排列順序,包括二硫鍵的位置稱為蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)(primary structure)。這是蛋白質(zhì)最基本的結(jié)構(gòu),它內(nèi)寓著決定蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)和生物功能的信息。蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondary structure):指肽鏈主鏈不同區(qū)段通過(guò)自身的相互作用,形成氫鍵,沿某一主軸盤旋折疊而形成的局部空間結(jié)構(gòu),是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的構(gòu)象單元.主要有以下類型:(1) α-螺旋 (2) β-折疊 (3) β-轉(zhuǎn)角 (4) 無(wú)規(guī)則卷曲蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu):是指由相同或不同的稱作亞基(subunit)的亞單位按照一定排布方式聚合而成的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),維持四級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力是疏水鍵、離子鍵、氫鍵、范得華力。亞基本身都具有球狀三級(jí)結(jié)構(gòu),一般只包含一條多肽鏈,也有的由二條或二條以上由二硫鍵連接的肽鏈組成。論述:蛋白質(zhì)的主要功能是什么?催化功能;結(jié)構(gòu)功能;調(diào)節(jié)功能;防御功能;運(yùn)動(dòng)功能;運(yùn)輸功能;信息功能;儲(chǔ)藏功能……酶:除了少數(shù)有催化活性的RNA分子外,幾乎所有的酶都是蛋白質(zhì)。酶可以將生化反應(yīng)速度提高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。底物與特殊氨基酸側(cè)鏈間的結(jié)合是通過(guò)各種非共價(jià)相互作用。這些相互作用包括范德華力、氫鍵、鹽橋和疏水力。結(jié)合的特異性極高,像只與單一底物結(jié)合(例如葡萄糖氧化酶只與葡萄糖結(jié)合),或者是基團(tuán)特異性的(例如己糖激酶與各種己糖結(jié)合)。側(cè)鏈也可以直接參與催化,例如可作為親核體或質(zhì)子供體或受體。信號(hào)傳遞:細(xì)胞膜上的受體蛋白質(zhì)可以與來(lái)自細(xì)胞外介質(zhì)的配體(如激素)結(jié)合,通過(guò)最終的構(gòu)象改變,在細(xì)胞內(nèi)啟動(dòng)配體的反應(yīng)。配體結(jié)合與底物結(jié)合很相似,但配體通常保持原形。轉(zhuǎn)運(yùn)與貯存:血紅蛋白在紅細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)氧氣,轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)鐵:轉(zhuǎn)鐵蛋白+Fe→進(jìn)入肝臟→轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合以鐵蛋白的形式儲(chǔ)存于肝臟。攝入的脂肪在血液中以脂蛋白形式轉(zhuǎn)運(yùn)。許多其他分子和離子也都以蛋白質(zhì)結(jié)合形式轉(zhuǎn)運(yùn)和貯存,這樣在需要用它們之前,可以增加溶解性、減小反應(yīng)活性。結(jié)構(gòu)與運(yùn)動(dòng):膠原蛋白是皮膚、骨骼和結(jié)締組織中主要的蛋白質(zhì)頭發(fā)主要由角蛋白組成。細(xì)胞內(nèi)還有許多結(jié)構(gòu)蛋白,例如細(xì)胞骨架中的許多蛋白質(zhì)。主要肌肉蛋白肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白組成了滑行絲,成為肌肉收縮的基礎(chǔ)。營(yíng)養(yǎng):
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