【正文】 病。表441列出部分酶遺傳性缺陷病及其所缺陷的酶。表441 遺傳性酶缺陷所致疾病缺陷酶相應(yīng)疾病酪氨酸酶白化病黑尿酸氧化酶黑尿酸癥苯丙氨酸羥化酶苯丙酮酸尿癥1磷酸半乳糖尿苷移換酶半乳糖血癥葡萄糖6磷酸酶糖原貯積癥6磷酸葡萄糖脫氫酶蠶豆病高鐵血紅蛋白還原酶高鐵血紅蛋白血癥谷胱甘肽過氧化物酶新生兒黃疸肌腺苷酸脫氫酶肌病（二）中毒性疾病臨床上有些疾病是由于酶活性受到抑制引起的，常見于中毒性疾病。例如，有機磷農(nóng)藥中毒是由于抑制了膽堿酯酶活性，重金屬鹽中毒是由于抑制了巰基酶活性，氰化物中毒是由于抑制了細胞色素氧化酶的活性等。二、酶與疾病的診斷由于細胞內(nèi)酶含量很少，直接測定其絕對量很難，因此酶學(xué)檢測中一般是測定酶活性。測定血清（血漿）、尿液等體液中酶活性變化，可以反映某些疾病的發(fā)生和發(fā)展，有利于疾病診斷和預(yù)后判斷。（一）酶活性的測定1． 原理 臨床上對酶活性的測定多采用相對測定法。即在一定條件下，測定單位時間內(nèi)酶促反應(yīng)體系中底物的消耗量或產(chǎn)物的生成量來表示酶活性。因為在反應(yīng)初速度時，酶促反應(yīng)體系中的產(chǎn)物從無到有，其生成量最能反映酶活性，故絕大多數(shù)方法都是把酶促反應(yīng)體系中產(chǎn)物生成量作為酶活性測定的依據(jù)。2． 酶活性單位 酶活性的高低用酶活性單位（U）來表示。酶活性單位指在特定條件下、單位時間內(nèi)酶促反應(yīng)過程中底物的減少量或產(chǎn)物的生成量。有習(xí)慣單位和國際單位等方法。習(xí)慣單位是依據(jù)不同的實驗方法定義出來的酶活性單位。同一種酶，測定的方法不同，測定的結(jié)果不能比較。國際單位（IU）是1961年國際酶學(xué)委員會規(guī)定的酶活性單位的統(tǒng)一標準：指在最適條件下，25℃，每分鐘催化1微摩爾底物（1μmol/L）發(fā)生化學(xué)變化的酶量為一個單位。1972年，國際酶學(xué)委員會又推薦了一個新的酶活性單位，即“催量”（Kat），其定義為在最適條件下，每秒鐘催化1摩爾底物（1mol/L）發(fā)生化學(xué)變化的酶量為1催量。（二）酶活性測定的樣品臨床實驗室測定酶活性的樣品很多，有全血、血清、血漿、尿液、腦脊液、胸腔積液和胃液等。由于血清簡便易得，既可避免抗凝劑對酶活性的影響，又可防止加抗凝劑振搖引起溶血，故最為常用。（三）血清酶的測定 血液與全身各組織細胞相溝通，當(dāng)組織細胞損傷時，細胞內(nèi)酶大量入血，使血清酶活性增高；或因細胞病變使其合成酶的能力下降，使血清中酶活性降低。測定血清酶活性對疾病的輔助診斷、治療評價和預(yù)后判斷具有重要的臨床意義。1． 血清（漿）功能性酶的測定 此類酶是血漿蛋白質(zhì)的固有成分，在血漿中發(fā)揮其特異催化作用的酶，故稱血漿功能性酶。如與血液凝固和纖維蛋白溶解有關(guān)的酶類、催化血漿中膽固醇酯化的卵磷脂膽固醇酯?；D(zhuǎn)移酶、使乳糜微粒中三脂酰甘油水解的脂蛋白脂肪酶等。這些酶主要由肝細胞合成后分泌入血，在血漿中的含量較為恒定。測定這些酶在血中的活性，有助于了解肝的功能。2．血清（漿）非功能性酶的測定 此類酶在血漿中濃度很低，來自各組織細胞，在血漿中不發(fā)揮催化的功能，稱做血漿非功能性酶。測定血漿中這些酶活性，能反映產(chǎn)生該酶的組織細胞的病變。許多組織器官的疾病可引起血漿中酶活性的改變，一般有以下幾種原因：①體內(nèi)某些物質(zhì)代謝發(fā)生障礙時，細胞中酶合成增加，使進入血中的酶量增加。如成骨肉瘤或佝僂病時，成骨細胞中堿性磷酸酶活性增高；②組織細胞損傷或細胞膜通透性變大，使進入血液中的酶量增加。例如，急性胰腺炎時，血清淀粉酶活性升高；急性肝炎、心肌梗塞時血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）活性增高。3． 同工酶在臨床診斷上的價值檢測同工酶對于疾病的器官定位具有實用價值。體液中的同工酶多來自不同的組織細胞，當(dāng)體液（主要是血清）中某一酶的總活性升高時，通過同工酶的分離與檢測，可確定升高的那部分同工酶來自何種組織，便能較準確地反映出哪些組織細胞損傷及損傷程度，從而提高酶學(xué)診斷水平。檢測同工酶還能提高酶學(xué)診斷的敏感性，因為某些同工酶的異常升高可在總酶活性改變之前出現(xiàn)。如急性心肌梗塞時，血清心型肌酸激酶（CKMB）的升高早于肌酸激酶總活性的升高。檢測同工酶對某些疾病還具有判斷預(yù)后的參考價值，如肝炎病人血中AST主要來自肝細胞液（胞液型AST），若血中出現(xiàn)線粒體型AST，說明細胞由炎癥發(fā)展到壞死，提示病情相當(dāng)嚴重。4． 檢測血清酶時的注意事項對于目前認為具有診斷價值的每一種血清酶都有一個正常值的范圍。必須強調(diào)，正常值范圍不是絕對的，因為它受多種條件和因素的影響。（1）生理差異的影響：血清酶活性受性別、年齡、進食、運動、妊娠、肥胖和種族等多種因素的影響。例如，成年男性血清γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性明顯高于成年女性，而成年女性血清中的醇脫氫酶活性卻高于成年男性。妊娠后期婦女血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶和γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性都大幅度地高出正常范圍。又如，兒童因骨骼生長，其血清堿性磷酸酶活性可為成年人的3～4倍。再如，一次過量飲酒可使健康成年人血清天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性升高1倍左右。因此，在臨床上判斷血清酶活性是否正常時一定要考慮到上述各種因素的影響。（2） 樣品處理的影響：對檢測樣品的處理和保存不當(dāng)也常常給實驗結(jié)果帶來嚴重的影響。例如，溶血可使紅細胞內(nèi)的乳酸脫氫酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等非功能性酶逸入血清，導(dǎo)致這些酶的檢測結(jié)果明顯高出正常值，出現(xiàn)假性高值。又如，某些抗凝劑能特異地抑制一些酶的活性（EDTA抑制丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、肝素抑制磷酸肌酸激酶），致測定結(jié)果偏低。再如，高溫、劇烈振搖等物理因素均可使酶蛋白變性失去活性，嚴重地影響測定結(jié)果。所以，在臨床護理技術(shù)操作中，要嚴格操作規(guī)程，采血時，盡量減少溶血的發(fā)生，控制影響酶活性的可能因素，提供合格的檢測樣品。對采集后樣品的保存，要注意保潔防塵、輕拿輕放，低溫冷藏、避免光照。三、酶在臨床治療中的應(yīng)用酶已作為藥劑用于臨床治療。1．幫助消化胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和木瓜蛋白酶都可用于幫助消化。2．消炎抑菌溶菌酶、木瓜蛋白酶可緩解炎癥，促進消腫；糜蛋白酶可用于外科清創(chuàng)和燒傷病人痂垢的清除以及防治膿胸病人漿膜粘連，霧化吸入可稀釋痰液便于咳出等。3．防治血栓鏈激酶、尿激酶和纖溶酶等可溶解血栓，可用于腦血栓，心肌梗塞等疾病的防治。4．治療腫瘤天冬酰胺具有促進血癌生長的作用，利用天冬酰胺酶分解天冬酰胺可抑制血癌細胞的生長。人工合成的6巰基嘌呤、5氟尿嘧啶等藥物，通過酶的競爭性抑制作用阻礙腫瘤細胞的異常生長，可起到抑制腫瘤的作用。四、酶在醫(yī)學(xué)科研上的應(yīng)用（一）酶作為試劑用于臨床檢驗酶偶聯(lián)測定法是利用酶作為分析試劑，對一些酶的活性、底物濃度、激活劑和抑制劑等進行定量分析的一種方法。其原理是利用一些酶（稱指示酶）的底物或產(chǎn)物可以直接簡便地監(jiān)測，將該酶偶聯(lián)到待測的酶促反應(yīng)體系中，將本來不易直接測定的反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可以直接監(jiān)測的系列反應(yīng)。（二）酶作為工具酶用于科研與生產(chǎn)1．工具酶 利用酶具有高度特異性的特點，將酶作為工具，在分子水平上對某些生物大分子進行定向的分割與連接。例如，基因克隆用工具酶—限制性核酸內(nèi)切酶、連接酶、TaqDNA聚合酶等。2．酶標記測定法 酶可以代替同位素與某些物質(zhì)結(jié)合，使該物質(zhì)被酶所標記。通過測定酶的活性來判斷被標記物質(zhì)或與其定量結(jié)合的物質(zhì)的存在與含量。3．固定化酶 酶可經(jīng)物理或化學(xué)方法處理，連接在載體（如凝膠、瓊脂糖、樹脂和纖維素等）上形成固定化酶，然后裝柱組成反應(yīng)管道化和自動化。在固定條件下只要定速地注入底物，即可自動流出和收集產(chǎn)物。4．抗體酶底物與酶的活性中心結(jié)合可誘導(dǎo)底物變構(gòu)形成過渡態(tài)底物。設(shè)計由這種過渡態(tài)底物產(chǎn)生的抗體，具有促使底物轉(zhuǎn)變?yōu)檫^渡態(tài)進而發(fā)生催化反應(yīng)的酶活性，故稱之為抗體酶?？贵w酶的研究是酶工程研究的前沿學(xué)科，制造抗體酶的技術(shù)比蛋白質(zhì)工程和生產(chǎn)酶制劑簡單，可以大量生產(chǎn)，因此，關(guān)于抗體酶的應(yīng)用研究必會引起重視和發(fā)展。65 / 22