酶學(xué)與酶工程第二章學(xué)生-資料下載頁
2025-05-26 22:00本頁面
【正文】 ? 8) 有助于尋找代謝過程的限速步驟。 ? 9）了解酶的 Km值及在細(xì)胞內(nèi)底物的濃度，可推知該酶在細(xì)胞內(nèi)是否受到底物濃度的調(diào)節(jié)。 53 College of Life Sciences 二、米氏方程的適用范圍 ? 1．多中間步驟 54 在推導(dǎo)米氏方程時(shí)是以式為出發(fā)點(diǎn) 多中間步驟 中間步驟愈多， Km和 Kcat是由更多環(huán)節(jié)的反應(yīng)速度常數(shù)組成的更復(fù)雜的復(fù)合函數(shù)。而事實(shí)上，一般測得的 Km和 v本身也可能就是由多個(gè)中間步驟提供的復(fù)合函數(shù) College of Life Sciences ?2．穩(wěn)態(tài)前 ? 在任何一個(gè)酶反應(yīng)系統(tǒng)中，酶和底物一經(jīng)混合，就會(huì)立即生成酶 — 底物絡(luò)合物 (ES)及產(chǎn)物 (P)，并隨時(shí)間而逐漸升高。但經(jīng)過一定時(shí)間后， ES的形成與分解達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，而 P也將以恒定速度生成，系統(tǒng)進(jìn)人穩(wěn)態(tài)。但是在進(jìn)入穩(wěn)態(tài)前的動(dòng)力學(xué)與穩(wěn)態(tài)時(shí)的動(dòng)力學(xué)關(guān)系不同，不能用米氏方程表示。 ?3．反應(yīng)全過程和逆反應(yīng) 55 College of Life Sciences ? 4. 高底物濃度抑制與活化 ? ? 56 College of Life Sciences 三、可逆抑制動(dòng)力學(xué) ? 1. 競爭性抑制 Competitive：競爭性抑制劑是較常見、較重要的。 57 College of Life Sciences 58 速度方程式： V = Vmax [S] Km (1+ [ I ] [ Ki ] ) +[S] Km180。 (表觀米式常數(shù) ) Ki: 抑制劑常數(shù) College of Life Sciences 59 Vmax v [S] （不變） Km Km? (變大 ) With petitive inhibitor No inhibitor ? 競爭性抑制曲線 Fig. Competitive inhibition College of Life Sciences 60 Vmax Km V 1 = ) [ I ] [ Ki ] (1+ + Vmax 1 [S] 1 1/[S] [ I ] 1/v [ I ] [ Ki ] Km ( 1+ ) 1 1/Km No inhibitor With petitive inhibitor Fig. LineweaverBurk plot of petitive inhibition. College of Life Sciences ? 2. 非競爭性抑制 Nonpetitive 61 College of Life Sciences 62 V = Km + [S] Vmax [S] [ I ] [ Ki ] 1+ Vmax? College of Life Sciences 63 [S] v Vmax? Vmax （變小） Km (不變 ) No inhibitor With nonpetitive inhibitor College of Life Sciences 64 [S] 1 Vmax Km V 1 = ) [ I ] [ Ki ] (1+ + Vmax 1 ) [ I ] [ Ki ] (1+ No inhibitor With nonpetitive inhibitor [ I ] 1/[S] 1/ v 1 / Km Vmax 1 [ I ] [ Ki ] (1+ ) Fig. LineweaverBurk plot of nonpetitive inhibition. College of Life Sciences 66 表 . 三種抑制作用總結(jié) 類型 米氏方程 Vmax Km 無抑制劑 v0 = Vmax[S]/(Km + [S]) Vmax Km 競爭性抑制 v0 = Vmax[S]Ki/(Km Ki + Km [I] + Ki[S] ) 不變 增加 非競爭性抑制 v0 = Vmax[S]Ki/(Km + [S])( Ki + [I]) 減小 不變 反競爭性抑制 v0 = Vmax[S]Ki/(Km Ki + [S] Ki + [S][I]) 減小 減小
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