dna提取及常見問題分析和對(duì)策-資料下載頁(yè)
2025-03-24 04:50本頁(yè)面
【正文】 1. DNA中含有蛋白、多糖、多酚類雜質(zhì)2. DNA在溶解前，有酒精殘留，酒精抑制 對(duì)后續(xù)酶解反應(yīng) 策3. DNA中殘留有金屬離子4. 有RNA的存留? 重新純化DNA，過(guò)吸附 柱去除蛋白、多糖、 多酚等雜質(zhì)? 重新沉淀DNA，讓酒精 充分揮發(fā)? 增加70％乙醇洗滌的 次數(shù)（23次）? 加入RNase降解RNA 完美WORD格式 整理分享 DNA提取常見問題問題二：DNA降解。原因1. 材料不新鮮或反復(fù)凍 融2. 未很好抑制內(nèi)源核酸酶的活性 對(duì)策3. 提取過(guò)程操作過(guò)于劇烈，DNA被機(jī)械打斷4. 外源核酸酶污染5. 反復(fù)凍融1. 盡量取新鮮材料，低溫保存材料避 免反復(fù)凍融2. 液氮研磨或勻漿組織后，應(yīng)在解凍 前加入裂解緩沖液3. 在提取內(nèi)源核酸酶含量豐富的材料 的DNA時(shí)，可增加裂解液中螯合劑 的含量，細(xì)胞裂解后的后續(xù)操作應(yīng) 盡量輕柔4. 所有試劑用無(wú)菌水配制，耗材經(jīng)高 溫滅菌5. 將DNA分裝保存于緩沖液中，避免反復(fù)凍融DNA提取常見問題問題三：DNA提取量少。原因1. 實(shí)驗(yàn)材料不佳或量少2. 破壁或裂解不充分 對(duì) 策3. 吸附或沉淀不完全4. 洗滌時(shí)DNA丟失1. 盡量選用新鮮（幼嫩）的材料2. 植物要?jiǎng)驖{研磨充分3. 增加吸附的時(shí)間，或低 溫沉淀4. 小心操作
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