[藥學(xué)]hplc及hplcms分析方法的開發(fā)及其在藥物分析中的應(yīng)用-資料下載頁
2025-03-21 22:08本頁面
【正文】 O I A Fl Fe D O C18 pH 10, ACN PhenylHexyl pH 10, MeOH I A P Fl Fe D O Test Probes: I: Imipramine [B] A: Amitriptyline [B] Fl: Flavone [N] O: Octanophenone [N] 堿性及中性化合物 34 固定相、溶劑和流動相 pH的影響因素 I A P Fl Fe D O FluoroPhenyl pH 3, MeOH P C18 pH 3, ACN I A P Fl Fe D O I A Fl Fe D O C18 pH 10, ACN PhenylHexyl pH 10, MeOH I A P Fl Fe D O Test Probes: P: 1pyrenesulfonic acid [A] Fe: fenoprofen [A] D: diclofenac [A] 酸性化合物 35 固定相、溶劑和流動相 pH的影響因素 ? 分析物在其未電離 [中性 ]狀態(tài)時保留較強 ? 甲醇的洗脫能力較乙腈弱，因此所有化合物的保留都會得到增強，同時也具有不同于乙腈的選擇性 ? 當(dāng)流動相 pH值能改變分析物的帶電狀態(tài)時，能得到選擇性的極大改變 ? 在任一條件下，使用不同固定相時，能獲得大的選擇性改變 ? 最顯著的選擇性差異在于將固定相、溶劑和流動相 pH因素綜合時 36 梯度洗脫 ? 優(yōu)點 – 單位時間的分離能力增加－較大的峰容量 – 檢測靈敏度提高 ? 缺點 – 儀器設(shè)備要求高 – 不適合某些檢測方式 – 色譜柱需再生 – 定量分析的重復(fù)性較低 37 梯度洗脫 ? 高壓梯度及低壓梯度 溶劑 A 溶劑 B 泵 A 泵 B 混合器 A 高壓梯度 溶劑 A 泵 溶劑 B 比例閥（溶劑混合點） 混合器 B 低壓梯度 （溶劑混合點） 38 梯度洗脫滯后體積 死體積 /譜帶展寬體積(無色譜柱時 ) 滯后 (系統(tǒng) )體積 滯后 (系統(tǒng) )體積 溶劑輸送系統(tǒng) (泵 ) 檢測器 進樣器 色譜柱 梯度混合器 溶劑輸送系統(tǒng) (泵 ) 高壓梯度 注意 ∶ 滯后體積包括進樣器、阻尼 器、混合器及其管路！ 比例閥 檢測器 進樣器 A B C D 色譜柱 溶劑輸送系統(tǒng) (泵 ) 低壓梯度 阻尼器 混合器 39 ? 滯后體積太大會引起梯度變化的延遲 – 例如：滯后體積為 ，流速 鐘 – 如流速為 ，實際梯度晚 20分鐘 ? 滯后體積的不同會使方法轉(zhuǎn)換麻煩 – 滯后體積比文獻值大或小都使方法不能重現(xiàn) ? 普通 HPLC的滯后體積為 2~4ml – 對分析型 HPLC沒有影響 – 對作微柱實驗用梯度時影響較大 梯度洗脫滯后體積 40 液相色譜的分離機理 ? 從色譜方法上分 – 正相 / 反相 – 離子交換 – 分子體積排除 – 親合 – 疏水回受 ? 從柱子類型上分 – 分配 / 吸附 – 離子交換 – 凝膠 – 親合
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