【正文】 有回文結構 依賴 ?因子的終止 發(fā)夾式結構和寡聚 U的共同作用使 RNA從三元復合物中解離出來。 三、 RNA的轉錄后加工 在細胞內(nèi)，由 RNA聚合酶合成的原初轉錄物（ primary transcript） 往往需要一系列的變化，包括鏈的裂解、 5?和 3?末端的切除和特殊結構的形成、核苷的修飾、以及拼接和編輯等過程，才轉變?yōu)槌墒斓?RNA分子。此過程總稱為 RNA的成熟 或稱為 RNA的轉錄后加工。 mRNA前體的加工 ： ? 原核生物 的 mRNA轉錄后 一般 不需要加工，轉錄的同時即進行翻譯（半壽期短）。 ? 真核生物 mRNA（ 半壽期較長）原初轉錄物很大，在加工過程中形成許多分子大小不等的中間物，它們被稱為 核內(nèi)不均一 RNA（ heterogeneous nuclear RNA,hnRNA) 加工包括： （ 1） hnRNA被剪接，把內(nèi)含子（ DNA上非編碼序列）轉錄序列剪掉，把 外顯子 （ DNA上的編碼序列）轉錄序列 拼接 上 (真核生物一般為不連續(xù)基因 )。 （ 2） 3’ 端添加 polyA “ 尾巴 ” ； （ 3） 5’ 端連接 “ 帽子 ” 結構（ m7G5?ppp5?NmpNp）； （ 4） 分子內(nèi)部的核苷酸甲基化修飾。 tRNA前體的加工： 原核與真核生物的 tRNA轉錄后都需要加工。包括： （ 1）由核酸內(nèi)切酶切除前體上 3?和 5?端上多余的核苷酸； （ 2）由核酸外切酶逐個在 3?切去附加序列，進行修剪。 （ 3） 3’ 端添加 CCAOH序列，由核苷酰轉移酶催化。 （ 4） 核苷的一些特定的堿基和戊糖進行修飾。 酵母酪氨酸 tRNA前體的加工 早轉錄本 成熟 tRNA 加工 ?原核：剛轉錄的 rRNA為 30S， 先在特定的堿基上進行甲基化（核糖 2?羥基）修飾，后逐步裂解（核酸酶的切割）。 ?真核： 45S（ 哺乳動物） 、 38S（ 果蠅） 、 37S（ 酵母） P16 P23 P5 16S 23S 5S（ 一般不含甲基化） 28S 18S rRNA前體的加工： 45S 或 38S 37S 26S 17S rRNA原初 轉錄物 研究四膜蟲 rRNA前體的拼接時發(fā)現(xiàn) ribozyme 原核生物中 rRNA前體的加工 甲基化作用 專一核酸內(nèi)切酶 30S前體 17S tRNA 25S 專一核酸外切酶 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5S rRNA 專一核酸外切酶 真核生物rRNA前體加工 ? 兩個階段 （ 1）其單鏈 RNA可充當 mRNA， 利用寄主中的核糖體合成 外殼蛋白 和復制酶的 β 亞基。 （ 2）復制酶的 β 亞基可與來自寄主細胞的亞基 α ?δ 自動裝配成 RNA復制酶 ，可進行 RNA的復制 . 5 ? RNA 5 ? 3 ? 3 ? RNA+ 釋放 釋放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA+ RNA 四、 RNA的復制 第三節(jié) 基因工程簡介 ? DNA重組與克隆 ①從細胞中分離出 DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片斷 ③分離大腸桿菌中的質(zhì)粒 ④ DNA重組 ⑤用重組質(zhì)粒轉化大腸桿菌 ⑥培養(yǎng)大腸桿菌克隆大量基因 ⑦重組體的篩選 克隆羊多利的誕生 胚胎羊 乳腺上皮細胞（提供 DNA） 母羊 除去細胞核的卵母細胞（受體） 體外融合 植入受體母羊 問答題 比較 DNA復制與 RNA轉錄的異同 。 比較 DNA聚合酶與 RNA聚合酶催化作用的異同 。 DNA復制的高度準確性是通過什么來實現(xiàn)的 ？ 肽鏈合成后的加工處理主要有哪些方式 ？ 何謂基因工程？簡述其基本理論、基本過程及應用價值 名詞解釋 中心法則 半保留復制 轉錄 反轉錄 翻譯 有意義鏈 反意義鏈 內(nèi)含子 外顯子 岡崎片段 突變 下列有關 TATA盒 (Hognessbox)的敘述 ,哪個是正確的 : RNA聚合酶結合 B 2. 轉錄需要的原料是 : A. dNTP B. dNDP C. dNMP D. NTP E . NMP D DNA模板鏈為 5’ATTCAG3 ’ , 其轉錄產(chǎn)物是 : A. 5 ’ GACTTA3 ’ B. 5 ’ CTGAAT3 ’ C. 5 ’ UAAGUC3 ’ D. 5 ’ CUGAAU3 ’ D DNA復制和轉錄過程有許多相同點 ,下列描述哪項是錯誤的 ? DNA一條鏈為模板 ,而以 DNA兩條鏈為模板進行復制 B. 在這兩個過程中合成均為 5`3`方向 C. 復制的產(chǎn)物通常情況下大于轉錄的產(chǎn)物 D. 兩過程均需 RNA引物 D 真核生物的 mRNA加工過程中 ,5’端加上（ ），在 3’端加上（ ），后者由（ ）催化。如果被轉錄基因是不連續(xù)的，那么，（ ）一定要被切除，并通過（ ）過程將（ ）連接在一起。 帽子結構、多聚腺苷酸尾巴、 poly(A)聚合酶、內(nèi)含子、拼接、外顯子 –10位的（ ）區(qū)和 –35位的（ ）區(qū)是 RNA聚合酶與啟動子的結合位點，能與 σ因子相互識別而具有很高的親和力。 TATA、 TTGACA 原核生物 RNA 聚合酶核心酶由（ ）組成，全酶由 （ ）組成。 2αββ′ω 、 2αββ′ωσ 下面那一項不屬于原核生物 mRNA的特征（ ） A：半衰期短 B：存在多順反子的形式 C： 5’端有帽子結構 D： 3’端沒有或只有較短的多聚（ A）結構 比較 RNA轉錄與 DNA復制，下列哪些是正確的？ 5’→3 ’ 為 G－ C 真核細胞中的 mRNA帽子結構是（ ） A. 7甲基鳥嘌呤核苷三磷酸 B. 7甲基尿嘧啶核苷三磷酸 C. 7甲基腺嘌呤核苷三磷酸 D. 7甲基胞嘧啶核苷三磷酸 1下面哪一項是對三元轉錄復合物的正確描述（ ） （ A） σ 因子、核心酶和雙鏈 DNA在啟動子形成的復合物 （ B）全酶、模板 DNA和新生 RNA形成的復合物 （ C）三個全酶在轉錄起始點形成的復合物 （ D） σ 因子、核心酶和促旋酶形成的復合物