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生物顯微技術(shù)第五章原位雜交-資料下載頁(yè)

2025-01-16 18:45本頁(yè)面
  

【正文】 % Blooking 1hr 室溫 ?% Blooking +堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體 1: 5000 ?4 186。C 過(guò)夜 Buffer1 10min 3,室溫 Buffer3 5min 1, 室溫 加顯色液,黑暗室溫靜止顯色。 顯色液: Buffer3 中含 mg/ml NBT( 氮藍(lán)四唑 ) mg/ml BCIP( 5溴 4氯 3吲哚磷酸鹽 ) 2mM Levamisole 觀察出現(xiàn)信號(hào)后,去掉顯色液,甲基綠對(duì)染 照相,保存。 原位雜交中注意的問(wèn)題: 雜交前處理要嚴(yán)格避免 RNA酶的污染。 ?雜交前后的儀器、器皿、藥品要分開(kāi)使用。 ?雜交前使用的器皿、試劑嚴(yán)格處理。 ?雜交前操作帶手套。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定 ? Northern 和 Southern印跡雜交法證明的方式 ? 免疫組織化學(xué)檢測(cè)蛋白的表達(dá)。 ? 對(duì)照實(shí)驗(yàn): ? 陽(yáng)性對(duì)照:取陽(yáng)性組織做實(shí)驗(yàn) ? 陰性實(shí)驗(yàn):不加探針 加 sense探針 在預(yù)雜交液和雜交液中加入 sense探針 課堂測(cè)驗(yàn) ? 簡(jiǎn)述應(yīng)用地高辛標(biāo)記的 RNA探針檢測(cè)石蠟組織切片的原理和基本步驟
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