生物顯微技術(shù)第五章原位雜交(已修改)
2025-01-28 18:45 本頁面
【正文】 原位雜交組織化學(xué) 核酸分子雜交技術(shù) 固相雜交 : ? 菌落原位雜交（ colony in situ hybridization） ? 斑點(diǎn)雜交法（ Dot blot） ? Southern印跡雜交（ Southern blot） ? Northern印跡雜交（ Northern blot） ? 組織原位雜交（ Tissue in situ hybridization） 液相雜交 定義： 特定標(biāo)記的已知序列的核酸作為探針與細(xì)胞或組織切片中的核酸進(jìn)行雜交并對(duì)標(biāo)記的探針進(jìn)行檢測(cè)的方法稱為原位雜交。 Detection of DNA by nucleic acid hybridization 分類 核酸探針標(biāo)記方法： 1. 放射性探針： 32P 3H 35S 2. 非放射性探針：生物素、地高辛 探針的核酸性質(zhì)不同： 1. DNA探針： 單鏈 DNA（ Single stranded, ssDNA）和雙鏈 DNA（ Double stranded, dsDNA） 2. cDNA探針： plementary DNA probe 3. cRNA探針： plementary RNA probe 4. 寡核苷酸探針 原理 ? 探針標(biāo)記：同位素標(biāo)記和非同位素標(biāo)記的探針（生物素標(biāo)記和地高辛標(biāo)記） ? 探針與靶序列根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則特異性結(jié)合 ? 檢測(cè)標(biāo)記的探針：放射自顯影、熒光檢測(cè)和酶法檢測(cè)。 優(yōu)點(diǎn) ? 不需要從組織中提取核酸，對(duì)組織中含量極低的靶序列具有極高的敏感性。 ? 能夠完整的保持組織和細(xì)胞的形態(tài)，
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