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生物化學(xué)研究技術(shù)--3sds-page鑒定菠蘿蛋白酶的純度-資料下載頁(yè)

2025-01-16 13:28本頁(yè)面
  

【正文】 (X),標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)分子量的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo) (Y),繪標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,再根據(jù)樣品相對(duì)遷移率在曲線上求出其蛋白質(zhì)的分子量。 蛋白名稱 遷移距離 相對(duì)遷移率 ( Y) 蛋白分子量 (D) 蛋白分子量對(duì)數(shù) (X) 兔磷酸化酶 B 牛血清白蛋白 牛碳酸酐酶 牛蛋白酶抑制劑 雞蛋清溶菌酶 過(guò)柱的菠蘿蛋白酶 指示劑 低分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的組分: 1) 兔磷酸化酶 B 分子量 97,400 2) 牛血清白蛋白 分子量 66,200 3) 兔肌動(dòng)蛋白 分子量 43,000 4) 牛碳酸酐酶 分子量 31,000 5) 牛蛋白酶抑制劑 分子量 20,100 6) 雞蛋清溶菌酶 分子量 14,400 八.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) pH值、濃度要準(zhǔn)確配置; 。 ,使用前水浴加熱使之溶解。 九.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 1. 各實(shí)驗(yàn)組分析討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果,再由老師進(jìn)行歸納總結(jié)。 2. 做好電泳圖譜的繪制及數(shù)據(jù)記錄。 3. 學(xué)生對(duì)該實(shí)驗(yàn)有哪些體會(huì)。 ? 4. 思考題: ( 1)電泳時(shí),上下電泳槽產(chǎn)生的氣體是什么?用過(guò)一次的電極緩沖液是否可以混合后再用?為什么? ( 2)樣品上樣前為什么要沸水浴加熱 3~ 5分鐘? ( 3) SDSPAGE是否需在低溫下進(jìn)行?為什么? ( 4)做好本實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵是什么? ( 5)如果電泳圖譜模糊,有些電泳帶不出現(xiàn)或拖尾,試分析原因。
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