大專生物化學(xué)酶ppt課件-資料下載頁
2025-01-08 04:53本頁面
【正文】 V 無變構(gòu)效應(yīng)劑 ?變構(gòu)酶常為多個亞基構(gòu)成的寡聚體，具有協(xié)同效應(yīng)。 97 協(xié)同效應(yīng)： 蛋白質(zhì)分子（酶）中的 1個亞基與其配體結(jié)合能影響其它亞基與配體（底物）結(jié)合能力的現(xiàn)象。 包括： 正協(xié)同效應(yīng)和負(fù)協(xié)同效應(yīng) 98 （二） 酶的共價修飾調(diào)節(jié) ?共價修飾 (covalent modification) 在其他 酶的催化 下 ， 酶蛋白肽鏈上的一些基團(tuán)可與某種化學(xué)基團(tuán)發(fā)生可逆的 共價結(jié)合 ， 從而改變酶的活性 ， 此過程稱為共價修飾 。 ? 常見類型 磷酸化與脫磷酸化 （最常見） 乙?；兔撘阴；? 甲基化和脫甲基化 腺苷化和脫腺苷化 － SH與－ S－ S互變 99 2 A T P 2 A D P磷 酸 化 酶 b 激 酶2 P i2 H2O磷 蛋 白磷 酸 酶PPP PPP磷 酸 化 酶 b（ 二 聚 體 ） 無 活 性磷 酸 化 酶 b（ 二 聚 體 ） 有 活 性磷 酸 化 酶 b（ 四 聚 體 ） 低 活 性100 共價修飾調(diào)節(jié)的特點 ① 受共價修飾的酶存在有（高）活性和無（低）活性兩種形式； ②催化正、逆轉(zhuǎn)化所需的其他酶往往不同 ③是體內(nèi)經(jīng)濟(jì)、有效的快速調(diào)節(jié)方式。 ? 同一個酶可以同時受 變構(gòu) 調(diào)節(jié)和 共價修飾 調(diào)節(jié)。 101 瀑布 效應(yīng)（級聯(lián)放大效應(yīng)） 102 （三）酶原與酶原的激活 ?酶原 (zymogen) 有些酶在細(xì)胞內(nèi)合成或初分泌時只是酶的 無活性前體 ，此前體物質(zhì)稱為酶原。 ?酶原的激活 在一定條件下，酶原向有活性酶轉(zhuǎn)化的過程。 103 ? 酶原激活的機(jī)理 酶 原 分子構(gòu)象發(fā)生改變 形成或暴露出酶的活性中心 一個或幾個特定的肽鍵斷裂，水解掉一個或幾個短肽 在特定條件下 104 胰蛋白酶原的激活過程 胃蛋白酶原的激活過程 胃蛋白酶原的激活過程 107 ? 酶原激活的生理意義 1. 避免細(xì)胞產(chǎn)生的酶對細(xì)胞進(jìn)行自身消化 2. 并使酶在特定的部位和環(huán)境中發(fā)揮作用，保證體內(nèi)代謝正常進(jìn)行。 3. 酶原可以視為酶的儲存形式。 108 二、 酶含量的調(diào)節(jié) （一）酶蛋白合成的誘導(dǎo)和阻遏 誘導(dǎo)作用 (induction) 阻遏作用 (repression) （二）酶降解的調(diào)控 3. 同工酶 (isoenzyme) —— 能催化相同的化學(xué)反應(yīng)，但在蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫性能等方面都存在明顯差異的一組酶。 乳酸脫氫酶 （ LDH） M H M M M M M4 H M M M M3H M M H H M2H2 M H H H MH3 H H H H H4 *生理及臨床意義 在代謝調(diào)節(jié)上起著重要的作用； 用于解釋發(fā)育過程中階段特有的代謝特征； 同工酶譜的改變有助于對疾病的診斷； 同工酶可以作為遺傳標(biāo)志，用于遺傳分析研究。 心肌梗死和肝病病人血清 LDH同工酶譜的變化 1 酶活性 心肌梗死酶譜 正常酶譜 肝病酶譜 2 3 4 5 一、材料預(yù)處理及破碎細(xì)胞 物理粉碎法 化學(xué)法 酶的分離、提純及保存 物理粉碎法 （ 1）研磨 （ 2）機(jī)械搗碎 （ 3）高壓法 （ 4）爆破性減壓法 （ 5）快速冰凍融化法 化學(xué)法 （ 1）滲透作用 （ 2）干燥處理 （ 3）自溶 （ 4）溶菌酶處理 （ 5）酶處理 （ 6）表面活性劑處理 （ 7）其他 二、抽提 PH 鹽 溫度 抽提液用量 其他 三、酶溶液的凈化與脫色 使用絮凝劑 脫色 四、濃縮 冷凍干燥法 蒸發(fā)法 超過濾 五、酶分離純化的基本過程 酶分離純化方法的選擇 酶分離純化過程中的一些數(shù)據(jù) 結(jié)晶 六、酶的制劑與保存 酶制劑 酶的保存 （ 1）冰箱保存；（ 2）加保護(hù)劑； （ 3）制成干粉：冷凍干燥法 酶的應(yīng)用 一、酶在食品工業(yè)上的應(yīng)用 淀粉加工 乳品工業(yè) 果蔬加工 釀酒工業(yè) 制糖工業(yè) 肉類及魚類加工 面包烤焙食品制造 二、在醫(yī)藥工業(yè)上應(yīng)用 （一）酶作為試劑用于臨床檢驗和科學(xué)研究 1．酶法分析 即酶偶聯(lián)測定法 (enzyme coupled assays)，是利用酶作為分析試劑，對一些酶的活性、底物濃度、激活劑、抑制劑等進(jìn)行定量分析的一種方法。 2． 酶標(biāo)記測定法 酶可以代替同位素與某些物質(zhì)相結(jié)合 ， 從而使該物質(zhì)被酶所標(biāo)記 。通過測定酶的活性來判斷被標(biāo)記物質(zhì)或與其定量結(jié)合的物質(zhì)的存在和含量 。 3．工具酶 除上述酶偶聯(lián)測定法外，人們利用酶具有高度特異性的特點，將酶做為工具，在分子水平上對某些生物大分子進(jìn)行定向的分割與連接。 （二）酶作為藥物用于臨床治療 藥用酶 診斷用酶 三、酶的分子工程 1．固定化酶 (immobilized enzyme) 將水溶性酶經(jīng)物理或化學(xué)方法處理后，成為不溶于水但仍具有酶活性的一種酶的衍生物。 固定化酶在催化反應(yīng)中以固相狀態(tài)作用于底物，并保持酶的活性。 2．抗體酶 3．模擬酶 具有催化功能的抗體分子稱為抗體酶(abzyme) 。 模擬酶是根據(jù)酶的作用原理，利用有機(jī)化學(xué)合成方法，人工合成的具有底物結(jié)合部位和催化部位的非蛋白質(zhì)有機(jī)化合物。
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