生物化學核酸ppt課件-資料下載頁
2025-05-04 06:29本頁面
【正文】 ? Tm：變性是在一個相當窄的溫度范圍內完成，在這一范圍內，紫外光吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為 DNA的 解鏈溫度 ，又稱熔解溫度 (melting temperature, Tm)。 見 P93 Tm就是 DNA的熱變性過程中， 50%的 DNA雙鏈打開時的溫度。 Tm值的高低與以下因素有關： ? 所含堿基中的 G和 C所占比例 GC含量越高 , Tm值越高 ? DNA分子大小 DNA越長 , Tm值越高 ? 溶液的離子強度 增高 , Tm值增高 ? DNA的均一性 DNA越純 ,相變范圍越小 ? 溶液的 pH 見圖 333 DNA的 Tm與其 G+C含量的關系 （三） DNA的復性與分子雜交 ? DNA復性 (renaturation)的定義 在適當條件下，變性 DNA的兩條互補鏈可恢復天然的雙螺旋構象，這一現象稱為 復性 。 ? 熱變性的 DNA經緩慢冷卻后即可復性，這一過程稱為 退火 (annealing) 。 ? 比 Tm值低 25 ℃ 的溫度是 DNA復性的最佳條件。 ? 減色效應 ? DNA復性時，其溶液 OD260降低。 核酸分子雜交 (hybridization)（ 自學 ） ? 在 DNA變性后的復性過程中，如果將不同種類的DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中，只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對關系，在適宜的條件（溫度及離子強度）下，就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈 (heteroduplex)。 ? 這種雜化雙鏈可以在不同的 DNA與 DNA之間形成，也可以在 DNA和 RNA分子間或者 RNA與 RNA分子間形成。這種現象稱為核酸分子雜交。 見 P85 ? 核酸分子雜交的應用 ? 研究 DNA分子中某一種基因的位置 ? 鑒定兩種核酸分子間的序列相似性 ? 檢測某些專一序列在待檢樣品中存在與否 ? 是基因芯片技術的基礎 本章總結 1 重要名詞 : DNA的變性 。 DNA復性 。退火 。熔解溫度（ Tm） 。增色效應 2 結構層次 ? 組成 :DNA與 RNA的組分的異同 。核苷酸的類型與功能 ? 一級結構 : 3′, 5′ 磷酸二酯鍵； 5′ 端 3′ 端； RNA的類型與結構和功能特點 ? 二級結構： DNA雙螺旋； tRNA的“三葉草形” ? 三級結構： DNA超螺旋結構； tRNA的“倒 L” 結構 3 重要性質： 紫外吸收；變性；復性 課外作業(yè) P101思考題 ： 1 1 14
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