浙江大學生物化學甲實驗課件實驗9氨基移換反應及其產物的鑒定-資料下載頁
2025-01-16 05:47本頁面
【正文】 定和染色 電泳結束后，取下凝膠模，用專用鏟子撬開短玻璃板，將凝膠一角切下做一加樣標記，將凝膠板放在 ￠ 15cm培養(yǎng)皿內，加入 染色液，固定、染色 30min左右， 脫色 棄去染色液，加入蒸餾水漂洗數次，再用脫色液脫色，直至蛋白質區(qū)帶清晰為止。 六、實驗結果 計算蛋白質樣品相對分子質量 將 ￠ 15cm培養(yǎng)皿放在一張坐標紙上，量出加樣端距溴酚藍區(qū)帶中心間的距離（ cm）以及各蛋白質樣品區(qū)帶中心與加樣端 (凝膠頂端 )的距離（ cm），按下式計算相對遷移率 Rf 蛋白樣品距加樣端距離 (cm) 相對遷移率 Rf＝ 溴酚藍區(qū)帶中心距加樣端距離 (cm) 列出電泳后各種蛋白質的遷移率和分子量。 以標準蛋白質的相對遷移率為橫坐標，標準蛋白質分子質量 lgM為縱坐標在半對數坐標紙上作圖，可得到一條標準曲線。根據蛋白質樣品的相對遷移率可直接在標準曲線上查出其相對分子質量。 蛋白質樣品相對分子質量（ Mr)＝ 畫出 SDS－ PAGE圖譜 ㈠ ㈩ 凝膠頂端（加樣端） 溴酚藍區(qū)帶中心 SDS－ PAGE圖譜 電泳方向 染料遷移距離 樣品遷移距離 區(qū)帶中心 作 標準蛋白質相對分子量的對數與電泳相對遷移率標準曲線圖 Mr Rf SDS— PAGE標準蛋白質相對分子量的標準曲線圖 七、實驗結果分析討論 八、參考資料 郭堯君， 蛋白質電泳實驗技術， 北京 ，科學出版社， 1999 李建武等，生物化學實驗原理和方法，北京大學出版社， 酶的基本性質實驗 —— 底物專一性、激活劑和抑制劑、最適溫度 下 次 實 驗 實驗六 丁鳴
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