植化方法學(xué)ppt課件-資料下載頁
2025-01-14 22:22本頁面
【正文】 薄層板暴露在紫外光下十分鐘 ， 由于催化氧化成牦牛兒酸 。 然后再將第二塊板滴加樣品檸檬醛在其上復(fù)加 1滴 10％ 氫化鋰鋁的乙醚溶液 ， 則檸檬醛被還原成牦牛兒醇 。 C O O HU VH 2 O 2 L i A l H 4C H OC H 2 O HH 雖然反應(yīng)薄層在有的時候于薄層板上反應(yīng)不能進(jìn)行完全 ， 以致于有原始樣品與反應(yīng)生成產(chǎn)物混合存在 。 但是許多情況下能夠通過這些有機的特殊反應(yīng)只消耗 未知物極微量的樣品 （ 對天然產(chǎn)物尤其重要 ） 卻提供了大量的有關(guān)結(jié)構(gòu)鑒別的情報 ， 操作又簡單是值得廣泛采用的 。 一 、 氧化 氧化反應(yīng)所使用的氧化劑也有許多種 ， 操作方法也略有不同；有的將薄板上的樣品滴加一滴飽和的鉻酐 （ CrO3） 冰醋酸溶液進(jìn)行氧化 。 有些樣品能用 30％ H2O2在 UV光下暴露十分鐘來氧化 ， 也可用臭氧 （Ozone） 處理薄層；將樣品滴加在薄層上， 再將有樣品的薄板放到內(nèi)含 1015％ 臭氧的干燥器中 1520分鐘 ， 取出薄板放在空氣中除盡 O3， 再展開薄層 。 二 、 還原： 常用 LiAlH4來還原樣品；方法是加入一滴 10％ 氫化鋰鋁溶液來進(jìn)行 ， 溶液試劑不要太濃 ， 以防試劑本身帶來的潮氣使反應(yīng)太猛烈 。 用此試劑進(jìn)行酯的還原需先在小試管或毛細(xì)管中進(jìn)行；而后再將反應(yīng)物滴加在薄板上 。 進(jìn)行酯類的還原反應(yīng)更重要的還原試劑是用異丙醇鋁來實現(xiàn) 。 三 、 脫水 萜醇類可以用加入濃硫酸到樣品的方法變成烴類 。 然后用環(huán)已烷展開 。 因為含氧的化合物極性大不能被環(huán)已烷展開 ， 而烴類可以從反應(yīng)區(qū)域中被展開加以區(qū)別 。 氧氯化磷及無水吡啶 鉻酸也可作為 TLC脫水劑 ， 但需要先在小試管中進(jìn)行然后將反應(yīng)產(chǎn)物滴加在 TLC展開之 。 四 、 水解 薄層板放進(jìn)充滿濃鹽酸蒸氣的槽內(nèi)加熱 100℃ 1530min， 進(jìn)行水解 。 除利用酸水解外 ， 也可以在 TLC上進(jìn)行堿水解 ， 常用 5％ KOH和 2N NaOH加熱進(jìn)行 。 在中草藥的研究中最重要的是還是苷類 （ 皂苷及黃酮苷等等 ） 的水解 ，以便鑒定水解后產(chǎn)生的糖及苷元 。 1． 純苷的鑒定 所要鑒定的苷若已分離成單一化合物 ， 而且量很少時 ， 用下述方法是比較有用的 。 將樣品的乙醇 （ 或甲醇 ） 溶液點在硅膠薄層板 ， 點樣量為 20100μg ， 取一個硬質(zhì)玻璃缸， 缸中加入約 1cm厚的濃鹽酸 ， 并于 100C加熱 30分鐘 ， 使缸中充滿鹽酸蒸氣 ， 再將已載樣的薄層板迅速地放入缸內(nèi)的玻璃架上 （ 勿接觸液面） 然后繼續(xù)在 100C加熱 20分鐘 ， 使苷在鹽酸蒸氣中水解 ， 取出薄層 ， 用吹風(fēng)機吹盡鹽酸 ， 薄層就可以用不同展開劑鑒定水解生成的糖 。 水解條件： 室溫鹽酸蒸氣中放置 4小時 展開系統(tǒng) ： CHCl3： MeOH： H2O 6： 4： 1（ 均相） 顯色劑： 10% H2SO4乙醇液 2． 混合苷的鑒定 一般用適當(dāng)?shù)恼归_劑將混合苷展開分離后 ， 再于薄層上用鹽酸氣將苷水解 ， 鑒定水解生成的糖 。 例如：將報春花屬植物根的乙醇或甲醇提出物或粗混合苷于硅膠薄層 （ 20x20cm） 的一個角上點樣 ， 用二氯乙烷 醋酸 甲醇 水 （ 10： 5： 3： 2） 展開 ， 分出五個皂苷點 ， 同上法用鹽酸蒸氣水解 ， 吹去鹽酸， 與第一次展開成 90176。 角的方向再用乙酸乙酯 甲醇 乙酸 水 （ i2： 3： 3： 2） 展開并顯色 ， 檢出有六種糖 。 第一次展開 第二次展開 五 、 衍生物的制備 用三氟醋酸酐直接在薄層上進(jìn)行甾體上羥基的 酯化 。 用 5％ K2C03／ Me2CO（ 含微量水 ） 處理薄層 ， 令其干燥后用 50％ CH3I的丙酮溶液噴灑 ， 并放在用 CH3I ： Me2CO （ 1： 4）混合蒸氣飽和的槽內(nèi) 50℃ 3個小時進(jìn)行有機酸的 甲基化 。 硝化 wi1k等硝化多環(huán)烴類是將硅膠薄層上滴加樣品后放到一個含有五氧化二磷的槽內(nèi) ， 并且在槽內(nèi)滴加 23ml濃 HNO3， 硝化完全需 10分鐘 。 Po1euk和 Ma， 用噴灑 90％ HNO3（ 應(yīng)該避免過量酸 ） 在薄層上直接將化合物硝化 ， 噴灑試劑的板放到 105℃ 加熱 30分鐘以上 。 有很多衍生物可以在薄層上直接反應(yīng)制備 ， 再展開層析譜以便進(jìn)一步鑒定 。例如加入一滴苯肼到化合物樣品上可以把酮類制備成苯腙類化合物 。 應(yīng)用 ％ 吉拉德試劑 （ Girard’s）[(CH3)3N+CH2CONHNH2]溶于 10％ （ v／ v）KHAc／ 甲醇溶液 ， 滴加在薄板上將羰基化合物制備成衍生物 。 甾酮類化合物的衍生物制備就是一例 。 六 、 混合反應(yīng) Bierl等在薄層上用磷酸反應(yīng)來測定一個未知物中是否有環(huán)氧化物（ epoxides） 存在，并且進(jìn)而能有助于測定其環(huán)氧化物的構(gòu)型。 其方法是：在硅膠板上點加 10％ 磷酸水溶液的位置滴加未知混合物 ， 然后干燥 ， 另加入 5ul酸并令其干燥 20分鐘 ， 另取樣品2010Oug點加在沒有用酸處理的位置上 ，再將板干燥 1小時 ， 將板用乙醚 環(huán)已烷適 宜的比例展開 ， 環(huán)氧化物反應(yīng)后的產(chǎn)物具有更大的極性與原來樣品中環(huán)氧化物對比它保留在靠近原點的位置上 。 如果測定其構(gòu)型 ， 除操作上相同以外要取樣品量在 2535ug， 僅僅控制反應(yīng)在 5分鐘。 順式環(huán)氧化物在此時間內(nèi)反應(yīng)完全斷裂或幾乎完全裂解 ， 而反式環(huán)氧化物在此反應(yīng)時間內(nèi) （ 5分鐘 ） 不裂解或者僅僅是部分反應(yīng)或是微量的反應(yīng) 。
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