常用方法學(xué)簡介(2)-資料下載頁
2025-08-16 01:57本頁面
【正文】 spectrophotometry） 應(yīng)用顯微光光度計，以物質(zhì)分子對光波的選擇性吸收為基礎(chǔ)，在顯微鏡下對生物樣品中的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。 形態(tài)計量術(shù)（ morphometry） 運用幾何學(xué)和統(tǒng)計學(xué)原理，對組織或細(xì)胞進(jìn)行二維和三維的形態(tài)測量研究，如對細(xì)胞的數(shù)量、體積、表面積和周長的相對和絕對值的測量等。 流式細(xì)胞術(shù)（ flow cytometry） 是近年發(fā)展起來的細(xì)胞分類和定量研究技術(shù)，能對細(xì)胞的生物化學(xué)和生物物理特性進(jìn)行快速定量測定，還可分選收集各種細(xì)胞。該技術(shù)的建立為細(xì)胞動力學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)和腫瘤學(xué)等的研究提供了重要的研究手段。如細(xì)胞周期各時相細(xì)胞的比例，同步分析細(xì)胞內(nèi) DNA、RNA和蛋白質(zhì)的含量， T淋巴細(xì)胞亞群的分離和定量，淋巴細(xì)胞表面受體的分析，分離和濃縮造血干細(xì)胞，血細(xì)胞增殖情況，惡性腫瘤早期診斷，藥物作用機(jī)制等。 （ 七）組織培養(yǎng)技術(shù)（ tissue culture） 是將離體的細(xì)胞、組織或器官置于培養(yǎng)基中，在無菌和適宜溫度及酸堿度條件下進(jìn)行培養(yǎng)成活，藉以觀察各種物理、化學(xué)和生物因素對組織或細(xì)胞的作用，探索和提示細(xì)胞生命活動規(guī)律和細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能變化。 新鮮實體組織細(xì)胞分離 膠原纖維 酶消化法原理 緊密連接 粘多糖 常用酶 蛋白酶類 胰酶：脂鍵、肽鍵 膠原酶：膠原 溶菌酶：糖蛋白和肽的糖苷鍵 血管 彈性蛋白酶：糖蛋白和彈性蛋白 心臟 肝臟 注意： 溶解液 酶效價 時間 新鮮組織、酶解時間過長，細(xì)胞自溶 pH值 堿性：胃蛋白酶失活 中性：胰酶活性欠佳 酶純度 細(xì)胞膜改變 機(jī)械法 剪碎組織 100目尼龍網(wǎng)過濾（去除大組織塊） 離心 1000prm35分鐘，去上清 洗三次，每次離心（ 500~800prm）取上清， 棄細(xì)胞碎片 300目尼龍網(wǎng)過濾去除細(xì)胞團(tuán)塊
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