核酸化學(xué)改ppt課件-資料下載頁
2025-01-14 15:35本頁面
【正文】 ： —— 增色效應(yīng)達(dá)到一半時(shí)的溫度 與 Tm值有關(guān)的因素 : GC含量 : GC含量越高 Tm值越高 (三個(gè)氫鍵的緣故 )。 介質(zhì)中的離子強(qiáng)度 : 離子強(qiáng)度越高 Tm值越高。在 1mol/L的 NaCl中穩(wěn)定。 DNA 的不均一性： 影響到了溫度范圍，而不影響 Tm值的大小。 DNA的復(fù)性： 加熱后緩慢冷卻 DNA恢復(fù)雙鏈的過程 DNA的大小： 小的分子比大的分子易復(fù)性。 離子強(qiáng)度： 離子強(qiáng)度增加復(fù)性就快。 DNA的濃度： 濃度大的比濃度小的易于復(fù)性。 影響 DNA的復(fù)性因素： 核酸的分子雜交： 在 DNA的復(fù)性的過程中，同源或異源的 DNA，只要堿基互補(bǔ)就可以形成雜種分子，此過程稱為分子雜交。 分子雜交是一種極其有用的生物技術(shù)手段。 Nucleic Acids from Different Species Can Form Hybrids Southern blot 電泳 酶切 印跡 雜交 探針 NC Southern blot—— DNA Northern blot—— RNA Western blot—— Protein Fingerprinting DNA Microarray（ Gene Chip） 核酸的分離與純化 DNA SDS/CTAB(十六烷基三甲基溴化銨 ) 醋酸鉀 酚－氯仿 （異戊醇） 乙醇 /異丙醇 TE（ Tris－ HCl, EDTA） RNA Trisol, 乙醇 /異丙醇， DEPC（二乙基焦碳酸酯） RNAase作用機(jī)理 DEPC的抑制機(jī)理 DEPC的高溫分解 核酸的定量測定 ? DNA（ ug/ml）＝ OD260/=OD260 50 ? RNA（ ug/ml）＝ OD260/＝ OD260 40 ? OD260/OD280＞ ＝ 核酸的純度鑒定 核酸的分離和分子量測定 ? 瓊脂糖電泳（溴化乙啶） ? PAGE（硝酸銀 ） 核酸的結(jié)構(gòu)： DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)，mRNA及 tRNA的結(jié)構(gòu) 核酸的性質(zhì)： 變性與吸光性， Tm值，純化和鑒定 本章要點(diǎn)： 第一章結(jié)束
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