【正文】 選擇性培養(yǎng)分離法 為了從混雜的微生物群體中分離出某種微生物，可以根據(jù)該微生物的特點，包括營養(yǎng)、生理、生長條件等，采用選擇培養(yǎng)的方法進行分離。 利用選擇培養(yǎng)基進行直接分離 富集培養(yǎng) 三、微生物的培養(yǎng) 好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng) 好氧培養(yǎng)以空氣為氧的來源。實驗室的培養(yǎng)方法用平皿培養(yǎng)和斜面培養(yǎng)；工業(yè)生產(chǎn)時用自然對流和機械通風法來供氧；液體培養(yǎng)時微生物利用培養(yǎng)液中的溶解氧；液體三角瓶培養(yǎng)時利用搖床機達到供氧的目的；發(fā)酵罐培養(yǎng)時用通入無菌壓縮空氣達到供氧的目的。 厭氧培養(yǎng)是通過隔絕空氣或驅(qū)除氧氣的方法來實現(xiàn)的。實驗室培養(yǎng)時，可將菌種接種到固體、半固體培養(yǎng)基的深層進行培養(yǎng)，同時加入還原劑；也可將厭氧微生物放入真空干燥器，抽出空氣，并充入氮氣或氮氣和二氧化碳的混合氣體。 分批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng) 分批培養(yǎng)：將微生物置于一定容積的、定量的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基一次性加入，不再補充和更換，最后一次性收獲。分批培養(yǎng)的過程中菌體、各種代謝產(chǎn)物的數(shù)目與營養(yǎng)物的數(shù)目呈負相關性。當微生物生長及基質(zhì)變化達到一定時，菌體生長則會停止。在發(fā)酵工業(yè)中可用中間補料或連續(xù)流加物料，使培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度保持在適合菌體生長和有利于菌體積累代謝產(chǎn)物的環(huán)境中。 連續(xù)培養(yǎng)：在微生物培養(yǎng)的過程中，不斷地供給新鮮的營養(yǎng)物質(zhì)，同時排除含菌體及代謝產(chǎn)物的發(fā)酵液，讓培養(yǎng)的微生物長時間地處于對數(shù)生長期，以利于微生物的增殖速度和代謝活性處于某種穩(wěn)定狀態(tài)。 連續(xù)培養(yǎng) 理論基礎：由于對典型生長曲線中穩(wěn)定期到來原因的認識，采取相應有效措施推遲其來臨，從而發(fā)展出現(xiàn)在的連續(xù)培養(yǎng)技術。 連續(xù)培養(yǎng)原理 當微生物在單批培養(yǎng)方式下生長達到對數(shù)期后期時，一方面以一定的速度流進新鮮培養(yǎng)基并攪拌，另一方面以溢流方式流出培養(yǎng)液，使培養(yǎng)物達到動態(tài)平衡，其中的微生物就能長期保持對數(shù)期的平衡生長狀態(tài)和穩(wěn)定的生長速率。 ? 連續(xù)培養(yǎng)和單批培養(yǎng)的比較 單批培養(yǎng) 恒濁法 恒化法 單批培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng) 時間 連續(xù)流入 新鮮培養(yǎng)液 lg細胞數(shù)（個/ml） 連續(xù)培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng)器 連續(xù) 培養(yǎng)器 按控制方式分 按培養(yǎng)器的級數(shù)分 按細胞狀態(tài)分 按用途分 內(nèi)控制（控制菌體密度）：恒濁器 外控制（控制培養(yǎng)液流速、以控制生長速率）：恒化器 單級連續(xù)培養(yǎng)器 多級連續(xù)培養(yǎng)器 一般連續(xù)培養(yǎng)器 固定化細胞連續(xù)培養(yǎng)器 實驗室科研用：連續(xù)培養(yǎng)器 發(fā)酵生產(chǎn)用：連續(xù)發(fā)酵罐 連續(xù)培養(yǎng)技術 ——恒化連續(xù)培養(yǎng) 概念：以恒定流速使營養(yǎng)物質(zhì)濃度恒定而保持細菌生長速率恒定的方法。 原理：通過控制某一種營養(yǎng)物濃度（如碳、氮源、生長因子等） ，使其始終成為生長限制因子，而達到控制培養(yǎng)液流速保持不變，并使微生物始終在低于其最高生長速率條件下進行生長繁殖。 特點：維持營養(yǎng)成分的 亞適量 ，控制微生物生長速率。菌體生長速率恒定，菌體均一、密度穩(wěn)定，產(chǎn)量低于最高菌體產(chǎn)量。 應用范圍：實驗室科學研究。 恒化器 連續(xù)培養(yǎng)技術 ——恒濁培養(yǎng) 概念：通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基流速，使培養(yǎng)液濁度保持恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法。 原理：通過調(diào)節(jié)新鮮培養(yǎng)基流入的速度和培養(yǎng)物流出的速度來 維持菌濃度不變 ,即濁度不變 。主要采用恒濁器，當濁度高時，使新鮮培養(yǎng)基的流速加快，濁度降低，則減慢培養(yǎng)基的流速。 連續(xù)培養(yǎng)技術 ——恒濁培養(yǎng) 特點：基質(zhì)過量，微生物始終以最高速率進行生長，并可在允許范圍內(nèi)控制不同的菌體密度；但工藝復雜，煩瑣。 使用范圍：用于生產(chǎn)大量菌體、生產(chǎn)與菌體生長相平行的某些代謝產(chǎn)物，如乳酸、乙醇等。 恒濁器與恒化器的比較 裝置 控制對象 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基流速 生長速率 產(chǎn)物 應用范圍 恒濁器 菌體密度（內(nèi)控制） 無限制生長因子 不恒定 最高 大量菌體或與菌體形成相平行的產(chǎn)物 生產(chǎn)為主 恒化器 培養(yǎng)基流速（外控制） 有限制生長因子 恒定 低于最高 不同生長速率的菌體 實驗室為主 連續(xù)發(fā)酵 連續(xù)培養(yǎng)在生產(chǎn)上的應用，相對于單批發(fā)酵而言。 優(yōu)點： 高效，簡化了操作了裝料、滅菌、出料、清洗發(fā)酵罐等單元操作； 自控：便于利用各種儀表進行自動控制； 產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定 節(jié)約大量動力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負荷均衡合理。 連續(xù)發(fā)酵 缺點：菌種易于退化；易于遭到雜菌污染；營養(yǎng)物利用率低于單批培養(yǎng)。 連續(xù)發(fā)酵的生產(chǎn)時間受以上因素限制，一般只能維持數(shù)月 ~ 1年。 固定化細胞連續(xù)培養(yǎng) 細胞固定化是通過包埋法、微膠囊法、吸附法等將細胞固定在載體的內(nèi)部或表面 ，加入營養(yǎng)液及合適的培養(yǎng)條件，得到代謝產(chǎn)物。 優(yōu)點：可提供高密度的細胞；減少細胞的流失，反復利用；簡化細胞與代謝產(chǎn)物的分離工藝。 缺點：成本高；易污染；物質(zhì)傳遞阻力大；只能用于細胞分泌型產(chǎn)物的發(fā)酵。 混菌培養(yǎng) 兩種或兩種以上的微生物的培養(yǎng)。通常是在發(fā)酵工業(yè)中用兩種或兩種以上的具有互補性質(zhì)的菌種進行混合培養(yǎng)。