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鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢驗人員培訓(xùn)免疫-資料下載頁

2025-01-11 19:58本頁面
  

【正文】 纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細胞癌( HCC),對患者的健康和生命危害極大 HCV主要通過輸血和血制品來進行傳播。 四 .丁型肝炎病毒 (HDV) 是一種缺陷的嗜肝單鏈 RNA病毒,需要 HBV的輔助才能進行復(fù)制,因此 HDV和 HBV同時或重疊感染 。 80 五 .戊型肝炎病毒( HEV) HEV對氯仿敏感,在 4℃ 或 — 20℃ 下易被破壞,在鹼性環(huán)境中較穩(wěn)定。 HEV存在于替伏末期及發(fā)病初期的患者糞便中。有明顯的季節(jié)性,多散發(fā)于雨季后,糞口傳播是主要的傳播途徑。 ? 甲型和戊型肝炎病毒主要引起 急性感染 ,經(jīng)糞-口途徑傳播,有季節(jié)性,可引起暴發(fā)流行。 ? 乙、丙、丁型肝炎常表現(xiàn)為 慢性經(jīng)過 ,主要經(jīng)血液傳播,無季節(jié)性,多為散發(fā),并可發(fā)展為肝硬化和肝細胞癌。 81 第二節(jié) 五型肝炎病毒 (抗體)檢測 82 ? 類風(fēng)濕性因子 ( RF) : 是一種以變性 IgG為靶抗原的 自身抗體 ,主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液中,它是一種抗變性 IgG的抗體,可與 IgGFc段結(jié)合。檢測方法一般有 膠乳凝集試驗 、雙抗原夾心 ELISA法、速率散射比濁法。 ? 膠乳凝集試驗 :將變性 IgG包被于聚苯乙烯膠乳顆粒上,這種致敏膠乳在與待測血清中的 RF相遇時,即發(fā)生肉眼可見的凝集。 ? 正常人 1: 20稀釋血清為陰性,操作要求56℃30 分鐘滅活,( 滅活 C1q以阻止假陽性凝集)。 第三節(jié) 類風(fēng)濕診斷 83 ? 臨床意義 : 未經(jīng)治療的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者其陽性率為80%,且滴定度常在 1: 160以上。 RF不是僅在 RA患者中出現(xiàn),在 SLE、進行性全身性硬化癥等自身免疫性疾病患者和部分老年人中 RF的陽性率可達 %50%,因而 RF對 RA患者并不具有嚴格特異性, 抗鏈球菌溶血素 “ O”,簡稱抗 “ O”或 ASO 溶血性鏈球菌產(chǎn)生的一種代謝產(chǎn)物能溶解紅細胞,所以這種產(chǎn)物被取名為 “ O”溶血素,人體感染了 A組溶血性鏈球菌后, “ O”溶血素在體內(nèi)作為一種抗原物質(zhì)存在。為了測定這種能中和鏈球菌溶血素 “ O”的抗體含量,就稱為 抗鏈球菌溶血素 “ O”試驗。 84 ? 臨床意義 :溶血性鏈球菌感染、猩紅熱、丹毒、鏈球性咽炎、扁桃體炎。對風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎有間接診斷價值、若多次檢測結(jié)果遞增,并伴紅細胞沉降率加快可有助于診斷。 85 第四章 免疫學(xué)檢驗室內(nèi)質(zhì)量控制 ( ELISA) 南充中心醫(yī)院免疫室 李欣 86 質(zhì)量管理的基本要求 ? 免疫檢驗要保證檢驗結(jié)果的準確、可靠、及時、有效,并盡可能使各實驗室間檢驗結(jié)果 ? 可比性,這是免疫檢驗質(zhì)量保證的基本目的。ELISA實驗室內(nèi)質(zhì)控的重點是對 低值弱陽性標本檢測 的精密性進行檢測。臨床免疫學(xué)檢驗主要采用血清標本,檢驗項目既有傳染性病原體的抗原及抗體,還有腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子、治療藥物等;既有定量檢測,又有定性檢測。 87 一、分析前質(zhì)量保證 ? 主要是患者準備、 標本 的正確采集、輸送及保存。防止 溶血、乳糜血、血液污染 ,治療藥物及激素測定還應(yīng)注意采集標本的時間,甚至患者體位都能影響檢測結(jié)果。溶血標本會增加非特異性顯色造成假陽性。 儀器 保持最佳工作狀態(tài)。所要控制的儀器包括移液器(加樣槍),水浴箱(溫箱),洗板機和酶標儀。 88 ? : 加標本應(yīng)用微量移液器,按規(guī)定的量加至微孔板孔底的 1/3 處,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加每份標本應(yīng)更換吸嘴,干吸頭預(yù)先在樣本中抽吸三次。滴瓶滴加試劑時,應(yīng)先將滴瓶搖勻并擠去第 1 滴有氣泡的試劑,注意垂直加樣,并力求量的一致。 一、分析中質(zhì)量保證 89 應(yīng)嚴格按照試劑盒要求選擇溫育次數(shù)和 間,力求準確、一致。 溫育采用能使反應(yīng)液迅速達到平衡的水浴 法。為減少邊緣效應(yīng),水要浸至板條的 1/3 處,不可將板條疊加放置??杉臃饽l以 防止蒸發(fā)。 90 ? 甩去孔內(nèi)反應(yīng)液。 ? 用洗滌液過洗一遍(即注滿孔后即刻甩去)。 ? 將微孔重新注滿洗液后浸泡 12 分鐘,間歇搖動。 ? 甩去孔內(nèi)液體,拍板,用紙徹底吸干。 ? 重復(fù)以上操作至少 5 次,注意各種試劑盒的洗滌液盡量不要混用。 ? 洗板機洗滌時一定按要求設(shè)置洗滌參數(shù),務(wù)必要板架放平 ,填充孔不能高于標本孔,標本孔不能有凝塊,以免堵孔。 91 ? 注意加顯色液次序和顯色時間。 ? 比色前務(wù)必擦干板底。 ? 注意 灰區(qū) 值的判定及處理 。 92 一、分析后質(zhì)量保證 鉤狀效應(yīng) 現(xiàn)象若樣本中抗原濃度過高,會出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象,此時免疫反應(yīng)被明顯抑制,測定結(jié)果偏低。要消除此干擾,只有對樣本進行適當(dāng)稀釋后重新測定。對雙抗體夾心法則抗原時出現(xiàn)的假陰性標本需稀釋( 1: 250、 1: 500、 1: 1000)后重測。 ? 灰區(qū)值 需重復(fù)實驗或換試劑重測以確定其陰陽性,如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報告陽性。 93 一步法 ELISA抗原濃度與顯色變化的反映曲線 94 二步法 ELISA抗原濃度與顯色變化的反映曲線 95 對某些 罕見 模式 ,必須進行復(fù)查。 試劑盒陰性、陽性 對照 或標準濃度系列:陰性對 照值 ≤ ,陽性對照值> ,(陽性對照 值-陰性對照值)> ;標準濃度落在 2S范 圍內(nèi)。 96
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