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酶學(xué)與酶工程第三章酶的生物合成學(xué)生-資料下載頁

2025-01-08 12:59本頁面
  

【正文】 dE/dt= 0 阻遏解除后才開始合成酶 . College of Life Sciences ( 3)滯后合成型:非生長偶聯(lián)型, α =0 , dE/dt=βX ( 4)延續(xù)合成型:部分生長偶聯(lián)型, α ≠0 , β ≠0 dE/dt= α 181。X+βX dE/dt=(α181。+β)x 有關(guān)模型參數(shù)一般通過線性化處理及嘗試誤差法求出 . College of Life Sciences ? 利用動植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)各種天然物質(zhì),是生物工程的一個新領(lǐng)域, 20世紀(jì) 80年代以來,利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的有用產(chǎn)物已達(dá) 100多種,其中酶制劑有 10多種。包括糖苷酶 (胡蘿卜細(xì)胞, 1981),過氧化物酶 (甜菜細(xì)胞, 1983;大豆細(xì)胞, 1989)等。呈現(xiàn)出良好的發(fā)展前景。 College of Life Sciences ? 體積比微生物大; ? 對剪切力敏感; ? 生長和代謝速率低,生長倍增時間和發(fā)酵周期長; ? 動物細(xì)胞營養(yǎng)要求復(fù)雜; ? 發(fā)酵產(chǎn)物不同 College of Life Sciences 植物細(xì)胞發(fā)酵技術(shù)和特點(diǎn): 植物細(xì)胞發(fā)酵技術(shù) 發(fā)酵特點(diǎn)(與直接提取分離相比較而言): ( 1)提高產(chǎn)率; ( 2)縮短周期 。 ( 3)易于管理、減輕勞動強(qiáng)度; ( 4)提高質(zhì)量。 College of Life Sciences 植物細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)酶的工藝條件控制 ( 1)植物細(xì)胞生長和發(fā)酵所使用的培養(yǎng)基: 大量無機(jī)鹽、維生素和植物激素、無機(jī)氮源、碳源(蔗糖) MS培養(yǎng)基和 B5培養(yǎng)基 ( 2)溫度和 pH值 ( 3)通風(fēng)與攪拌 ( 4)光照的控制 ( 5)前體的添加 ( 6)刺激劑的應(yīng)用 College of Life Sciences 動物細(xì)胞可以生產(chǎn)多種具有較高價值的藥物,特別是疫苗、激素、單克隆抗體和酶等。 由動物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的酶有膠原酶,血纖蛋白溶酶原活性劑等。 動物細(xì)胞培養(yǎng)方法: 懸浮培養(yǎng);固定化細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞發(fā)酵工藝條件的控制 College of Life Sciences 又稱固定化活細(xì)胞、固定化增殖細(xì)胞用各種方法固定在載體上又能進(jìn)行生長、繁殖和新陳代謝的細(xì)胞。是 70年代后期 (1978)發(fā)展起來的技術(shù) 。 在發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、纖維素酶等胞外酶方面取得了成功。 固定化細(xì)胞: College of Life Sciences 提高產(chǎn)酶率:細(xì)胞密度增大 生化反應(yīng)加速 產(chǎn)酶率提高 College of Life Sciences 可在高稀釋度下連續(xù)發(fā)酵: D不影響固定化細(xì)胞 。 基因工程菌的質(zhì)粒穩(wěn)定,不易丟失; 發(fā)酵穩(wěn)定性好:細(xì)胞受載體保護(hù), pH和 T適應(yīng)性寬; 縮短發(fā)酵周期,提高設(shè)備利用率; 產(chǎn)品容易分離純化; 適于胞外酶等胞外產(chǎn)物的生產(chǎn)。 College of Life Sciences 與游離細(xì)胞發(fā)酵大同小異,需特別注意的幾個問題: 固定化細(xì)胞的預(yù)培養(yǎng) 先預(yù)培養(yǎng),使固定在載體上的細(xì)胞生長繁殖,長好后,再用于發(fā)酵產(chǎn)酶,其培養(yǎng)基和工藝條件可以相同或不同。 溶解氧的供給 由于受到載體的影響,使氧的供給成為主要的限制性因素。 解決辦法: ( 1)加大通氣量(強(qiáng)烈攪拌會破壞固定化細(xì)胞); ( 2)改變固定化載體,如少用瓊脂等對氧擴(kuò)散不利的載體; ( 3)過氧化氫酶與細(xì)胞共固定化,培養(yǎng)基加入適量的 H2O2; ( 4) 降低培養(yǎng)基的濃度,以降低培養(yǎng)基的粘度。 College of Life Sciences 溫度的控制 連續(xù)發(fā)酵時,由于 D較高,反應(yīng)器內(nèi)溫度變化較大,先預(yù)調(diào)流加液溫度。 培養(yǎng)基成份的控制 某些固定化載體的結(jié)構(gòu)會受到某些成份的影響,如過量的磷酸鹽會破壞海澡酸鈣凝膠制備的固定化細(xì)胞。 College of Life Sciences ? 原生質(zhì)體是除去細(xì)胞壁后由細(xì)胞膜及胞內(nèi)物質(zhì)組成的微球體。 ? 由于原生質(zhì)體不穩(wěn)定,通過凝膠包埋法可使之穩(wěn)定性提高; ? 可使原來胞內(nèi)產(chǎn)物分泌到細(xì)胞外。 College of Life Sciences ? 變胞內(nèi)產(chǎn)物為胞外產(chǎn)物; ? 提高產(chǎn)酶率; ? 穩(wěn)定性較好; ? 易于分離純化。 二、固定化原生質(zhì)體發(fā)酵產(chǎn)酶的工藝條件及其控制 ( 1)滲透壓的控制; ( 2)防止細(xì)胞壁的再生; ( 3)保證原生質(zhì)體的濃度。
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