人類染色體疾病的診斷三-資料下載頁
2025-01-05 23:22本頁面
【正文】 字化圖像 FITC/TRITC 熒光強(qiáng)度比率分析圖 Ratio image FITC/TRITC 比較基因組雜交應(yīng)用范疇 ? 可在基因組水平上對染色體變異部位進(jìn)行準(zhǔn)確的定量定位分析； ? 不需要細(xì)胞培養(yǎng)可對腫瘤基因組 DNA的拷貝數(shù)進(jìn)行定性分析與定量分析； ? 對細(xì)胞遺傳學(xué)難以判斷的腫瘤染色體的某些成分（ 如雙微體 、 標(biāo)記染色體 ） 的來源進(jìn)行鑒定； ? 快速檢出染色體三體性 、 單體性和部分染色體大片段重復(fù)的拷貝數(shù)變化 ， 有利于對先天畸形 、 自然流產(chǎn)等疾病進(jìn)行快速診斷 。 優(yōu)勢： ? 可快捷檢測中期、間期基因組 ? 不需預(yù)先知道 DNA發(fā)生改變的部位 ? 一次實(shí)驗(yàn)即可檢出待測樣本整個(gè)基因 組拷貝數(shù)的增減 多色信號采集 ? 常規(guī)的熒光顯微鏡的熒光顯微鏡的照像， 彩色膠片不易多次曝光，限制了這種聯(lián)合標(biāo)記探針的應(yīng)用，使用 CCD照像系統(tǒng)，先分別多次攝取灰色的影像關(guān)儲存在計(jì)算機(jī)內(nèi)，而后冠以人為的顏色，運(yùn)用軟件系統(tǒng)融合各次得到的影像，最終形成一個(gè)復(fù)合的多顏色的圖像。 FISH和 G顯帶技術(shù)結(jié)合 ? 對已做過 G顯帶的染色體片子用 75%的 乙醇或甲醇褪色后，可使 FISH更清晰的辨認(rèn)各條染色體及染色體結(jié)構(gòu)異常（包括某些復(fù)雜的易位，插入，倒位等） ,不僅可以用新近 G帶外理過的片子，而且還可用陳舊的 G帶片子。因此， FISH技術(shù)可成功的幫助細(xì)胞遺傳學(xué)家做出回顧性分析。 FISH技術(shù)和其他技術(shù)的結(jié)合 ? FISH技術(shù)和 RFLP結(jié)合，可以精確地描述原屬于染色本長短臂等結(jié)構(gòu)改變和染色體核形或復(fù)雜片段的性質(zhì)。 ? FISH和細(xì)胞免疫化學(xué)技術(shù)結(jié)合，可以同時(shí)用多種顏色反應(yīng)不同的核苷酸鏈和蛋白質(zhì)，這樣可以在單個(gè)細(xì)胞內(nèi)同時(shí)找到基因的位點(diǎn)。轉(zhuǎn)錄和翻譯和產(chǎn)物，有助了解核苷酸結(jié)構(gòu)功能以及表達(dá)產(chǎn)物之間關(guān)系的研究。 ? FISH的應(yīng)用 ? (1) 基因定位與基因制圖（ gene mapping） 原理前面已敘述。 FISH已經(jīng)極大地加速了人類基因定位和基因制圖的進(jìn)程。 ? (2) 基因診斷 (gene diagnosis) 精確、直觀、明了 ? (3) 間期細(xì)胞遺傳學(xué)（ interphase cytogeics） ? (4) FISH在腫瘤生物學(xué)中的應(yīng)用 ? ① 腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)（ oncocytogeics）； ? ② 基因定位： FISH可用于分離出的癌基因與抑癌基因初步定位； ? ③ 病毒基因插入基因組部分的檢測：雖然逆轉(zhuǎn)錄病毒以激活原癌基因?yàn)橹?，也有像腺病毒?HPV、 SV40等病毒以蛋白產(chǎn)物與抑癌基因蛋白產(chǎn)物相互作用而誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化。但病毒基因特別是 DNA病毒多有病毒基因成分插入到人基因組。利用 FISH可以檢測到病毒整合到人基因組中的情況，對深入研究病毒致癌機(jī)理，以及檢測、防治腫瘤均具有重要意義； ? ④ 基因的擴(kuò)增與缺失：原癌基因的激活與抑癌基因的失活是目前腫瘤研究的熱點(diǎn)。已知原癌基因的激活方式有：突變、基因擴(kuò)增、易位、病毒序列插入。抑癌基因的失活方式有：點(diǎn)突變、基因缺失。 FISH為研究基因的擴(kuò)增和缺失提供了新的方法，能將基因擴(kuò)增和染色體重復(fù)分開。 多色熒光原位雜交（ MFISH） ? MFISH相當(dāng)于在 一次雜交中給每一條染色體都涂上了不同的顏色 , 因而很容易就可看到多條染色體間的復(fù)雜易位情況和確定標(biāo)志染 色體的來源 . ? MFISH是 1996年才建立的一種新技術(shù)。使用 5種熒光染料按比例標(biāo)記探針，雜交后形成 24條染色體上 24種特異的熒光色彩以供核型分析。它為人們提供了既豐富又完善的細(xì)胞遺傳學(xué)信息，包括確定標(biāo)記染色體的來源、檢測微小的染色體易位和檢測復(fù)雜的染色體易位 。 多色熒光染色體顯帶（ RxFISH） ? 能否讓每條區(qū)帶也雜交上不同的顏色呢 ? 這一想法導(dǎo) 致了彩色核型分析 (RxFISH)的誕生 . ? RxFISH技術(shù)是采用多種熒光素標(biāo)記與人類 DNA有高度同原性猿的 DNA作為探針，雜交后使人類的 24條染色體上呈現(xiàn)特異的帶型。這樣便可根據(jù)彩色的熒光條帶進(jìn)行核型分析。
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