[醫(yī)學(xué)]5-巴比妥類(lèi)藥物的分析-資料下載頁(yè)
2025-10-07 17:51本頁(yè)面
【正文】 取兩份相等的供試溶液 ， 分別制成兩種不同的化學(xué)環(huán)境 （ 如在其一中加酸 、 堿或緩沖液改變?nèi)芤旱膒H， 或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學(xué)反應(yīng)的試劑 ） ， 然后將兩者分別稀釋至同樣濃度 ， 一份置樣品池中 ， 另一份置參比池中 ， 于適當(dāng)波長(zhǎng)處 ， 測(cè)其吸收度的差值 （ ?A值 ） 。 差示分光光度法（ ?A法） 1. 測(cè)定方法 2. 必要條件 （ 1） 供試品在不同的化學(xué)環(huán)境中以不同的分子形式存在 ， 它們的吸收光譜有顯著的差異 。 （ 2）干擾物的吸收不受測(cè)定時(shí)化學(xué)環(huán)境的影響，光譜行為不變。 ClAAAAAAAAAyxyxzyzx)( )()(參比樣 品????????????? 供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別以 x、 y 表示，干擾物用 z 表示 3. 定量依據(jù) CA ??即，吸收度差值（ ?A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)，即干擾組分的干擾被消除。 可用對(duì)照法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 保留了通常的分光光度法簡(jiǎn)易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)，又無(wú)需事先分離，并能消除干擾。 4. 特點(diǎn) 5. 應(yīng)用 （ 1）于波長(zhǎng) 240 nm處，測(cè)定 pH10和 pH2兩種溶液的吸收度之差 （ 2）于波長(zhǎng) 260 nm處，測(cè)定 pH10和強(qiáng)堿溶液的吸收度之差 HPLC法同時(shí)測(cè)定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡馬西平的濃度 色譜條件： 色譜柱 AgilentZORBAX SB C18柱 ( 250 , 5181。m) , 流動(dòng)相為甲醇 ∶ 水 ∶ 乙腈 (45∶ 45∶ 10 ） 流速 l/m in, 柱溫 30℃ , 檢測(cè)波長(zhǎng) 254nm。 血樣處理： 取內(nèi)標(biāo)溶液 100181。L， 60℃ 水浴氮?dú)獯蹈?，?200181。L待測(cè) 血清 , 加提取液（氯仿：乙酸乙醋 =50： 50） 2ml, 旋渦混合 5min, 以 4000轉(zhuǎn) /分離心 10min, 用吸管吸取上層水層 , 棄去。用移液管移取有機(jī)相置帶蓋尖底塑料離心管中 , 于 60℃ 水浴中氮?dú)獯蹈?, 用流動(dòng)相 200181。L溶解 , 取 20181。L進(jìn)樣測(cè)定 五 高效液相色譜 方法驗(yàn)證：標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性、精密度（ RSD 3%) 、方法回收率、提取回收率（大于 87%）、穩(wěn)定性等均符合中國(guó)藥典的要求 六 電泳法 七 氣相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 ? 我們都知道氣相色譜由于它具有高靈敏度、高檢測(cè)性能所以在石油、化工、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、生物和環(huán)保等方面得到廣泛應(yīng)用。氣相色譜的核心部分就是色譜柱，因此在選擇色譜柱時(shí)就要根據(jù)我們的實(shí)際檢測(cè)要求而定。一個(gè)好的色譜柱它具有如下的特性： 影響這兩方面就的因數(shù)有： 、孔徑大小 我們現(xiàn)在只討論第三種影響因數(shù)，我們知道固定液一般是涂布在載體上形成一層漠，這個(gè)漠就能夠把我們復(fù)雜的樣品組分進(jìn)行很好的分離，它的分離原理是“相似相溶”原理，即極性溶于極性，非極性溶于非極性。因此在色譜柱分離過(guò)程中，被分離的樣品組分極性與固定液極性相同的組分后出峰（組分出峰先后順序還與本身組分的融沸點(diǎn)有關(guān)），所以如果要得到很好分離效果的譜圖就需要選擇固定液與樣品中被分離大多數(shù)組分極性相近的色譜柱。
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